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基于3D細胞模型的楊梅花色苷納米脂質體抗氧化機制的研究

發(fā)布時間:2021-01-08 12:47
  花色苷在自然界廣泛分布,具有良好的抗氧化活性,屬于高效的天然抗氧化劑,但因其穩(wěn)定性較差、體內代謝快等原因導致其抗氧化性能不能高效的發(fā)揮,制約了花色苷資源的深度研發(fā)。納米脂質體因其特殊的結構以及特有的小尺寸、量子效應等特點,使花色苷被包埋后進入機體后具有更好的穩(wěn)定性和更高的生物活性等優(yōu)點。體外自由基氧化損傷模型是基于細胞的細胞內氧化水平研究,能更好地預測物質在體內的抗氧化活性。本實驗研究將花色苷制備成花色苷納米脂質體的最優(yōu)工藝方案,評價其表征、穩(wěn)定性和體外抗氧化活性,探究其對Caco-2細胞存活率、活性、凋亡比例、內部結構等的影響。同時在3D和2D細胞培養(yǎng)模型中,通過SOD、GSH、MDA和T-AOC四個指標對花色苷納米脂質體的抗氧化活性進行了比較,對抗氧化機制進行了初步探究,具體結果如下:(1)花色苷納米脂質體的最優(yōu)處方工藝為脂膽比2.87:1mg/mg、旋蒸溫度41.41℃、花色苷濃度0.17mg/m L。花色苷納米脂質體的包封率為70.43%±1.95%,粒徑為165.78nm;多分散性指數(shù)PDI為0.143;透射電子電鏡下花色苷納米脂質體呈囊泡狀結構,粒徑在200nm左右;(2)... 

【文章來源】:中國計量大學浙江省

【文章頁數(shù)】:98 頁

【學位級別】:碩士

【部分圖文】:

基于3D細胞模型的楊梅花色苷納米脂質體抗氧化機制的研究


矢車菊素-3-葡萄糖苷結構

結構圖,脂質體,結構圖,磷脂


[65],納米脂質體的結構圖如圖1.2所示[66],其可以天然存在也可以人工的合成。目前,制備納米脂質體的壁材主要有膽固醇和磷脂,而其中的磷脂則包括天然磷脂、改性磷脂和合成類脂分子。脂質體按其結構可分為:1、單室脂質體;2、多室脂質體。脂質體中的磷脂為雙親性,兼脂溶性和水溶性,能夠分別包封不同極性的物質。由天然成分組成的脂質體,擁有排列有序的生物膜磷脂雙分子層的結構,又可稱為人工制造的生物膜。脂質體在水中分散時,親水部分會向水相靠近,疏水部分則偏向空氣,經過攪動后含有磷脂雙分子層的球形脂質體進而形成。磷脂主要是指卵磷脂、肌醇磷脂和腦磷脂等物質,是細胞膜結構的主要成分之一,廣泛存在于動物細胞中的生物膜和原生質內。動物體內的磷脂酰膽堿中含有飽和脂肪鏈,可以增強脂質體膜的穩(wěn)定性和非滲透性。PC-大豆卵磷脂的功能:1、可以調節(jié)生物體細胞膜內成分的比例:磷脂和膽固醇;2、可以增加生物體細胞膜磷脂中不飽和脂肪鏈比例

細胞模型,形態(tài)差異


圖 1. 3 2D 細胞模型與 3D 細胞模型的形態(tài)差異[113]Fig 1.3 The morphological difference between 2D and 3D cell culture models.4.3 3D 細胞培養(yǎng)的應用應用 3D 細胞培養(yǎng)模型對細胞進行培養(yǎng),在天然細胞微環(huán)境物質結構基礎的同時, 又更好的模擬機體細胞生長的環(huán)境,為細胞水平的研究提供了一種確、更真實、更可靠的方法。鑒于 3D 細胞培養(yǎng)模型的優(yōu)良性能,其已經被于細胞研究以及多種細胞培養(yǎng)研究的各個方面。在腫瘤研究方面,三維培養(yǎng)被認做是理想的腫瘤學體外藥物測試模型,其能夠再現(xiàn)體內實體瘤中的細信號傳導、細胞異質性、細胞外微環(huán)境、生長動力學、內部結構特征和基因及耐藥性[114;115]。因此,該技術在腫瘤生物學及藥物活性篩選領域已成為研點[116]。由于 3D 細胞培養(yǎng)技術可以再現(xiàn)組織細胞的體內生長情況,現(xiàn)在已經在腫學、再生醫(yī)學、藥物篩選、病毒檢測等各個領域逐漸應用并正在快速發(fā)展中[120]

【參考文獻】:
期刊論文
[1]培養(yǎng)板懸滴法三維細胞培養(yǎng)模型建立及細胞活力檢測方法比較[J]. 林鶴,王婉秋,焦佳媛,楊昊珅,任利翔,邢立國.  藥物評價研究. 2017(08)
[2]分子影像技術在腫瘤細胞凋亡的研究現(xiàn)狀及進展[J]. 劉巖,任佳忠,楊國仁.  腫瘤學雜志. 2017(06)
[3]山楂葉多酚的酶法提取及抗氧化活性研究[J]. 陳安徽,巫永華,劉恩岐,陳尚龍,邵穎.  食品科技. 2017(02)
[4]葉黃素納米脂質體的制備工藝優(yōu)化及其氧化穩(wěn)定性[J]. 焦巖,李大婧,劉春泉,肖亞冬.  食品科學. 2017(18)
[5]桑葚的提取及其自由基清除活性研究[J]. 劉茜,唐潔.  食品研究與開發(fā). 2017(03)
[6]配體介導的納米脂質體作為腫瘤疫苗載體的可行性評價[J]. 李可欣,常莎莎,邸東華,修敬雅.  沈陽藥科大學學報. 2017(01)
[7]脂質體在嬰兒體外胃腸道消化的膜結構穩(wěn)定性[J]. 馮炎雯,李娜,徐紀璇,鄔琰澤,韓劍眾,劉瑋琳.  食品科學. 2017(13)
[8]抗腫瘤靶向脂質體的研究進展[J]. 姜雅萌,朱妍妍,趙軼男,甄宇紅,張樹彪.  生命科學. 2016(09)
[9]丁香精油納米脂質體的制備及其在不同豆制品中的應用[J]. 林琳,代婭婕,周昌倩,陶貴澤,黎雅婷,崔海英.  中國食品添加劑. 2016(09)
[10]正交設計與響應面優(yōu)化玄參黃酮提取工藝研究[J]. 索南卓瑪,包顯云,包錦淵.  分子科學學報. 2016(01)

博士論文
[1]類胡蘿卜素脂質體的研究[D]. 譚晨.江南大學 2015
[2]楊梅花色苷對胰島細胞氧化應激損傷的保護作用及其機制探討[D]. 張波.浙江大學 2010
[3]紅景天苷納米脂質體的研制[D]. 范明輝.江南大學 2008

碩士論文
[1]基于2D和3D Caco-2細胞培養(yǎng)研究納米氧化鋅的安全性[D]. 陶淼.中國計量大學 2016
[2]矢車菊素-3-葡萄糖苷對重金屬鎘、鉛致大鼠損傷的的保護機制研究[D]. 藺懷.沈陽大學 2016
[3]連翹酯苷對雞胸腺組織中炎癥因子及抗氧化的作用[D]. 吳悅.東北農業(yè)大學 2013
[4]小分子化合物木脂素VB6通過激活JNK信號通路誘導腫瘤細胞凋亡和自噬的機制研究[D]. 胡會永.浙江大學 2012



本文編號:2964623

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