[目的]探究諾考達唑和阿非科林聯(lián)合應用對人胚胎干細胞周期同步化到G1和S期的作用并觀察藥物對細胞生長和生物功能的影響。[方法]采用諾考達唑和阿非科林先后作用于胚胎干細胞,流式細胞儀測定細胞周期,顯微鏡下觀察藥物對細胞生長狀態(tài)的影響,熒光染色技術觀察胚層標志物α-SMA和β-tubulin表達。[結果]加入諾考達唑和阿非科林后,G1期為66.35%,S期為33.52%,多數(shù)細胞被同步化在G1期;諾考達唑作用16 h,G1期為18.45%,S期為79.10%,多數(shù)細胞從周期抑制中恢復;能夠形成典型的擬胚體;熒光染色顯示α-SMA和β-tubulin均有表達。[結論]諾考達唑和阿非科林聯(lián)合作用能夠使胚胎干細胞66.35%同步化在G1期,諾考達唑作用16 h,79.10%的細胞同步化在S期。中胚層標志物α-平滑肌肌動蛋白和外胚層標志物β微管蛋白在蛋白水平均有明顯表達。去除藥物后,細胞未發(fā)生顯著性損傷。 

【文章來源】：生物技術. 2015年06期 北大核心

【文章頁數(shù)】：6 頁

【文章目錄】：
0 引言
1 材料與方法
    1. 1 材料
        1. 1. 1 實驗材料
        1. 1. 2 試劑
        1. 1. 3 儀器
        1. 1. 4 培養(yǎng)基
    1. 2 方法
        1. 2. 1 人胚胎干細胞培養(yǎng)
        1. 2. 2 小鼠胚胎成纖維細胞的分離培養(yǎng)
        1. 2. 3 實驗分組與給藥方案
        1. 2. 4碘化丙錠（ PI） 染色流式細胞術細胞周期測定
        1. 2. 5 免疫細胞化學染色
        1. 2. 6 統(tǒng)計學處理
2 結果與分析
    2. 1 諾考達唑和阿非科林對人胚胎干細胞生長的影響
    2. 2 諾考達唑和阿非科林聯(lián)合作用對人胚胎干細胞存活的影響
    2. 3 諾考達唑和阿非科林聯(lián)合作用對人胚胎干細胞周期同步化的影響
    2. 4 撤除藥物后細胞擬胚體的形成
    2. 5 撤除藥物后細胞擬胚體多向分化能力檢測
3 討論
4 結論



本文編號：2919178