氨肽酶N作為鋅離子依賴Ⅱ型糖蛋白,廣泛分布在哺乳動物的各種細胞膜上和中樞神經(jīng)系統(tǒng)中。氨肽酶N作為一種外切蛋白酶,與各種疾病關系密切,在關節(jié)炎、類風濕、膽結石和阿爾茲海默癥等免疫和中樞神經(jīng)系統(tǒng)中都有表達,在人結腸、卵巢、乳腺、肝臟等部位的腫瘤細胞中高度表達。氨肽酶N在生物學功能方面具有多樣性,作為免疫抗原參與免疫調節(jié)過程、參與病毒感染過程、抑制劑參與鎮(zhèn)痛過程、與腫瘤細胞血管的生成、參與腫瘤細胞的生長、侵襲和轉移等等,結合氨肽酶N結構的特異性,這些理論都為合成先導化合物提供基礎。本課題根據(jù)氨肽酶N的結構特點對化合物進行設計,由于其水解底物的專屬性和優(yōu)先性,首先選擇丙氨酸作為連接基團,在結合實驗室已有的活性研究結果基礎上,選擇連接具有良好抗腫瘤活性的肉桂酸結構、苯甲酸結構、苯乙酸結構。通過化合物合成線路改造,經(jīng)酰胺化、縮合、水解、混合酸酐法等反應合成出了目標化合物,經(jīng)過氫譜、質譜、紅外光譜確認并查閱相關文獻,所合成21個化合物均為全新的化合物。對所有新化合物通過CCK-8法體外細胞活性試驗測定目標化合物對人肺泡上皮癌細胞A549生長抑制作用,結果顯示,本課題設計合成出的化合物7a,9b,9c... 

【文章來源】：南昌大學江西省 211工程院校

【文章頁數(shù)】：90 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

圖１－１人源氨肽酶Ｎ與同族肽酶家族基因序列比對結果［１４］??（以Ｃｌｕｓｔａｌ?Ｘ進行序列比對，保守序列為：ＧＡＭＥＮ和ＨＥＸＸＨ）??

的鋅離子依賴型金屬蛋白酶具有相同的鋅離子結合模式。并且發(fā)現(xiàn)哺乳科動物氨??肽酶Ｎ的全一級序列同源性超過８０％［１３］�；钚晕稽c中含有高度保守的ＨＥＸＸＨ??和ＧＡＭＥＮ氨基酸序列，其中ＨＥＸＸＨ序列為鋅離子結合區(qū)，如圖１－１。??＿＿龜＿??，人ｆＷ?■ｒｍ??ＶＺＡＰ．７ＤｆｆＡｆＩ＞Ｆｌ＾ＬＤＩＢｍｃ?ｉｔｔｌＰｐＨＴＱｉＲＶ｜ＣＲＩ＞ＭＦ＾〇Ｌ：?ＵＷ?ｌｙｐｒＴｒ．－?－ＩｇＳ７Ｓ３??ＰＣＬｊｒｖ７ｉ｜－－?ｌｌｍｐｋ???－?＾ｍｕ?－ｕｆｉ?ｍ＃?Ｊｉｆｘｃｓ??ＴＬＨ?Ｌｉｆ＾ＷＭ３ＵＩ＿ｇｙｊ｜＆｜ｙ＾｜ｌＷＡｎｉｉｑｉ＾（ＶｇｇｇＱＤＣＣｆＦｍ＾ｑｉＩ，ＶＶＪ?ｌｉＭ＾Ｖ｜ＤＹ｜ｌＬＧＬｌ｜ｇ｜｜＾４＾｜ｉａｒｔｉｐｄ－ＴＬＶ￡Ｆ｜??ｉｐ：Ｈ＊：：；ｉ??ｌｔａ４?—?－ｖｊｆｌｇＬｇ�。鳎觯撸迹常妫撸穑穑睿欤祝模椋保睿担簦常海椋粒蓿海椋撸辏颍幔簦粒酰颍椋酰恪椋簦铮�?ｐ｜ｘｐ：．??？ｌｋ?ｗｗｒＤｎｎｃｑｆＰｐｉ＞ｓ?３ｆ肛ｐｎＨｙｓＫ］ａｆ３ｐｃＰＭＳ５＼＃Ｎ｜＃海沙桑停觶酰瞟枺錚瘢?穡潁觶媯鮭\ｉａｐｗｉａＦＹ??圖１－１人源氨肽酶Ｎ與同族肽酶家族基因序列比對結果［１４］??（以Ｃｌｕｓｔａｌ?Ｘ進行序列比對，保守序列為：ＧＡＭＥＮ和ＨＥＸＸＨ）??氨肽酶Ｎ二級結構是一個以非共價鍵結合的同源二聚體［１５］，這與Ｍｌ家族??蛋白酶的其他單體有所不同。氨肽酶Ｎ的活性位點位于二聚體的中間位置，此??位置有一條５ｎｍ的裂隙，是由氨基酸Ｈｉｓ－Ｇｌｕ－Ｌｅｕ－Ａｌａ－Ｈｉｓ組成，這也是鋅離子??結合位點。二級結構中由７個不同功能的結構域組成

ｎｈ２?ＮＨ？??圖１－２氨肽酶Ｎ的二級結構（分成７個不同的結構域）［１Ｓ］??關于氨肽酶Ｎ的研宄進行的十分廣泛，但是直到２００６年才知悉氨肽酶Ｎ的??三級結構。由日本和美國課題組［１９＿２１］先后從來源于氨肽酶Ｎ的五．Ｃ〇／／分離純化??得到的氨肽酶Ｎ晶體和Ｂｅｓｔａｔｉｎ的共晶體中解析出的三級結構。人源氨肽酶Ｎ??與其催化區(qū)域具有很高的同源性。２０１２年，Ｊａｍｅｓ?Ｍ．Ｒｉｎｉ等首次從人源氨肽酶Ｎ??晶體以及其與底物、氨肽酶Ｎ抑制劑Ｂｅｓｔａｔｉｎ和ａｍａｓｔａｔｉｎ的共結晶體復合物中??解析出人源氨肽酶Ｎ的三級結構［２２］。這些發(fā)現(xiàn)對以后氨肽酶Ｎ的研宄具有重要??意義，同時也為先導化合物的設計提供了理論基礎。??１．１．２氨肽酶Ｎ的主要功能??１．１．２．１作為免疫抗原參與免疫調節(jié)過程??為避免細胞受到不必要的信號干擾或使細胞終止信號，細胞表面的氨肽酶Ｎ??在生長分化過程中發(fā)揮著重要的作用。在許多調節(jié)肽因子的降解過程都能發(fā)現(xiàn)氨??肽酶Ｎ的高濃度表達。據(jù)報道，胸腺噴丁、吞嗤刺激素等一些免疫活性物質的??降解過程都有氨肽酶Ｎ的參與［２３］，從而使機體的免疫力下降。而且，在細胞表??面存在主要組織相容性復合物（ＭＨＣ）ＩＩ型識別Ｔ細胞的過程，氨肽酶Ｎ參與上??述過程并使Ｔ細胞對其抗原的識別性降低

【參考文獻】：
期刊論文
[1]氨肽酶N在乳腺癌血管生成中的作用及其與VEGF的相關性[J]. 曹文慶,寧殿賓,馮麗,趙玉哲,張靜.  天津醫(yī)科大學學報. 2015(01)
[2]中國癌癥流行態(tài)勢與對策[J]. 趙平.  醫(yī)學研究雜志. 2013(10)
[3]組蛋白變構及其在惡性血液病治療中的應用[J]. 房明浩,紀雪梅.  中國實驗血液學雜志. 2009(03)
[4]肉桂酸對胃腺癌細胞誘導分化的實驗研究[J]. 盧娟,汪暉,盧方安.  中國藥理學通報. 2007(02)
[5]國內外羥肟酸的合成及其在浮選中的應用[J]. 高穎劍,林江順.  國外金屬礦選礦. 1997(06)

博士論文
[1]小分子類肽APN抑制劑的活性評價及其抗腫瘤作用機制研究[D]. 王學健.山東大學 2010
[2]1，3，4-噻二唑類氨肽酶N抑制劑的設計、合成及活性研究[D]. 涂國剛.山東大學 2009
[3]環(huán)酰亞胺類肽金屬蛋白酶抑制劑的設計、合成及其抗腫瘤活性研究[D]. 李乾斌.山東大學 2008

碩士論文
[1]AHPA類氨肽酶N抑制劑的設計、合成與初步活性評價[D]. 張濤.山東大學 2005



本文編號：2905710