發(fā)布時(shí)間：2017-03-30 22:12

  本文關(guān)鍵詞：MrgC受體調(diào)制慢性嗎啡誘發(fā)大鼠DRG神經(jīng)元痛介質(zhì)上調(diào)的研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：Mrg受體(Mas-related gene receptors)已被證實(shí)其激活可抑制或翻轉(zhuǎn)嗎啡耐受的形成。研究指出,基質(zhì)金屬蛋白酶9 (matrix metalloproteinase-9, MMP-9)、CX3CL1 (Chemokine (C-X3-C motif) ligand 1, CX3CL1)、CCL2 (chemokine (C-C motif) ligand 2, CCL2)、白細(xì)胞介素-1β (interleukin 1β, IL-1β)參與了慢性嗎啡作用誘導(dǎo)的反應(yīng),但其細(xì)胞內(nèi)信號轉(zhuǎn)導(dǎo)機(jī)制仍不是很清楚。本文旨在指出,MrgC受體通過背根神經(jīng)節(jié)(dorsal root ganglia, DRG)神經(jīng)元上MMP-9. CX3CL1、CCL2、IL-1β這些痛介質(zhì)調(diào)節(jié)嗎啡耐受的細(xì)胞內(nèi)機(jī)制。本實(shí)驗(yàn)采用在體鞘內(nèi)注射藥物,離體組織培養(yǎng),免疫組織化學(xué)熒光染色和實(shí)時(shí)熒光定量PCR (quantitative real-time polymerase chain reaction, qRT-PCR)等實(shí)驗(yàn)技術(shù)研究了：(1)鞘內(nèi)隔天聯(lián)合注射MrgC受體激動劑牛腎上腺髓質(zhì)素8-22(bovine adrenal medulla peptide 8-22, BAM8-22)和嗎啡對大鼠嗎啡耐受形成過程熱痛覺反射時(shí)的影響和對大鼠DRG中MMP-9、CX3CL1、IL-1β蛋白表達(dá)的影響；(2)體外離體培養(yǎng)DRG,嗎啡作用時(shí)間不同及激活MrgC受體對DRG中MMP-9、CX3CL1、L-1β mRNA表達(dá)的影響；(3)離體培養(yǎng)DRG, MrgC受體的抗體對慢性應(yīng)用嗎啡誘導(dǎo)的DRG中MMP-9、CX3CL1、IL-1β mRNA表達(dá)的影響；(4)離體培養(yǎng)DRG, MrgC受體不同激活時(shí)間對慢性嗎啡誘導(dǎo)的DRG中MMP-9、CX3CL1、CCL2、IL-1β mRNA表達(dá)的影響。結(jié)果顯示：(1)鞘內(nèi)連續(xù)6d注射20μg嗎啡,并在第1、3、5 d聯(lián)合注射1 nmol MrgC受體激動劑BAM8-22可抑制嗎啡耐受的形成,恢復(fù)嗎啡抗傷害性效力；(2)嗎啡耐受使DRG中、小型神經(jīng)元中MMP-9、CX3CL1和IL-1β蛋白表達(dá)均增多,鞘內(nèi)聯(lián)合注射1nmol BAM8-22可抑制嗎啡耐受誘導(dǎo)的MMP-9、CX3CL1和IL-1β蛋白表達(dá)增加；(3)BAM8-22作用1h可以逆轉(zhuǎn)慢性嗎啡誘導(dǎo)的離體DRG中MMP-9、CX3CL1和IL-1β mRNA表達(dá)量上調(diào)；(4)運(yùn)用MrgC受體的抗體后,再用BAM8-22無法激活MrgC受體,因而使慢性嗎啡應(yīng)用后DRG中MMP-9、 CX3CL1、IL-1β這些痛介質(zhì)的表達(dá)顯著增加,但與慢性嗎啡組比無顯著差異。單純阻斷MrgC受體并不改變慢性嗎啡作用；(5)BAM8-22作用24 h激活MrgC受體可以逆轉(zhuǎn)慢性嗎啡誘導(dǎo)的離體DRG中MMP-9、CX3CL1、CCL2和IL-1β mRNA表達(dá)量上調(diào)；(6)BAM8-22作用72 h激活MrgC受體可以促進(jìn)慢性嗎啡誘導(dǎo)的離體DRG中MMP-9、CX3CL1、CCL2和IL-1β mRNA表達(dá)量進(jìn)一步上調(diào)。上述結(jié)果表明,短期內(nèi)激活MrgC受體可以抑制或是翻轉(zhuǎn)嗎啡耐受的形成,但長期連續(xù)激活MrgC受體可以促進(jìn)慢性嗎啡作用。DRG中MMP-9、CX3CL1、CCL2、 IL-1β是MrgC受體調(diào)節(jié)嗎啡耐受的細(xì)胞內(nèi)機(jī)制。這些痛介質(zhì)通過細(xì)胞內(nèi)相關(guān)信號通路傳遞信息產(chǎn)生嗎啡耐受。
【關(guān)鍵詞】：慢性嗎啡 DRG MrgC受體 BAM8-22 MMP-9 CX3CL1 CCL2 IL-1β
【學(xué)位授予單位】：福建師范大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號】：R96
【目錄】：

• 中文摘要2-4
• Abstract4-6
• 中文文痛6-12
• 緒論12-28
• 第一章 鞘內(nèi)注射BAM8-22對嗎啡耐受誘導(dǎo)的DRG神經(jīng)元中MMP-9、CX3CL1和IL-1β表達(dá)的作用28-42
• 1.1 前言28
• 1.2 實(shí)驗(yàn)材料28-30
• 1.2.1 實(shí)驗(yàn)動物28-29
• 1.2.2 主要實(shí)驗(yàn)儀器和器材29
• 1.2.3 主要實(shí)驗(yàn)試劑29
• 1.2.4 溶劑配制29-30
• 1.3 實(shí)驗(yàn)方法及步驟30-31
• 1.4 圖片分析與統(tǒng)計(jì)31-32
• 1.5 實(shí)驗(yàn)結(jié)果32-39
• 1.5.1 BAM8-22激活MrgC受體對嗎啡耐受大鼠熱痛甩尾反射行為的影響32-33
• 1.5.2 BAM8-22對嗎啡耐受誘導(dǎo)的DRG神經(jīng)元中MMP-9表達(dá)的影響33-35
• 1.5.3 BAM8-22對嗎啡耐受誘導(dǎo)的DRG神經(jīng)元中CX3CL1表達(dá)的影響35-37
• 1.5.4 BAM8-22對嗎啡耐受誘導(dǎo)的DRG神經(jīng)元中IL-1β表達(dá)的影響37-39
• 1.6 討論39-42
• 第二章 激活MrgC受體對慢性嗎啡誘導(dǎo)的離體DRG中MMP-9、CX3CL1和IL-1β表達(dá)的影響42-60
• 2.1 前言42
• 2.2 實(shí)驗(yàn)材料42-44
• 2.2.1 實(shí)驗(yàn)動物42
• 2.2.2 實(shí)驗(yàn)儀器與器材42-43
• 2.2.3 主要實(shí)驗(yàn)試劑43
• 2.2.4 溶液配制43-44
• 2.2.5 引物序列44
• 2.3 實(shí)驗(yàn)方法及步驟44-47
• 2.3.1 實(shí)驗(yàn)分組44
• 2.3.2 DRG離體培養(yǎng)44-45
• 2.3.3 總RNA提取和逆轉(zhuǎn)錄45-46
• 2.3.4 qRT-PCR檢測離體DRG中MMP-9 mRNA表達(dá)量46-47
• 2.3.5 實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)處理及分析47
• 2.4 實(shí)驗(yàn)結(jié)果47-58
• 2.4.1 RNA完整性檢測結(jié)果47-48
• 2.4.2 引物特異性檢測結(jié)果48-50
• 2.4.3 嗎啡作用1d、3d、5d對離體培養(yǎng)DRG中MMP-9表達(dá)的影響50-51
• 2.4.4 BAM8-22作用20min、40min、60min對慢性嗎啡誘導(dǎo)的離體DRG中MMP-9表達(dá)的影響51-52
• 2.4.5 MrgC受體的抗體對慢性嗎啡誘導(dǎo)的離體DRG中CXCL1、MMP-9和IL-1β表達(dá)的影響52-55
• 2.4.6 激活MrgC受體對慢性嗎啡誘導(dǎo)的離體DRG中MMP-9表達(dá)的影響55-56
• 2.4.7 激活MrgC受體對慢性嗎啡誘導(dǎo)的離體DRG中CX3CL1表達(dá)的影響56-57
• 2.4.8 激活MrgC受體對慢性嗎啡誘導(dǎo)的離體DRG中比1L-Iβ表達(dá)的影響57-58
• 2.5 討論58-60
• 第三章 MrgC受體不同激活時(shí)間對慢性嗎啡誘導(dǎo)的離體DRG中MMP-9、CX3CL1、CCL2和IL-1β表達(dá)的影響60-74
• 3.1 前言60
• 3.2 實(shí)驗(yàn)材料60-61
• 3.2.1 實(shí)驗(yàn)動物60-61
• 3.2.2 實(shí)驗(yàn)儀器與器材61
• 3.2.3 主要實(shí)驗(yàn)試劑61
• 3.2.4 引物序列61
• 3.3 實(shí)驗(yàn)方法及步驟61-62
• 3.3.1 實(shí)驗(yàn)分組61
• 3.3.2 樣品采集61
• 3.3.3 DRG離體培養(yǎng)61
• 3.3.4 RNA提取與逆轉(zhuǎn)錄61-62
• 3.3.5 qRT-PCR測定離體DRG中MMP-9、CX3CL1、CCL2和IL-1β的表達(dá)量62
• 3.3.6 實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)處理及分析62
• 3.4 實(shí)驗(yàn)結(jié)果62-71
• 3.4.1 引物特異性檢測結(jié)果62-63
• 3.4.2 BAM8-22作用24h激活MrgC受體對慢性嗎啡誘導(dǎo)的離體DRG中CX3CL63-64
• 3.4.3 BAM8-22作用24h激活MrgC受體對慢性嗎啡誘導(dǎo)的離體DRG中CCL2表達(dá)的影響64-65
• 3.4.4 BAM8-22作用24h激活MrgC受體對慢性嗎啡誘導(dǎo)的離體DRG中IL-1β表達(dá)的影響65-66
• 3.4.5 BAM8-22作用24h激活MrgC受體對慢性嗎啡誘導(dǎo)的離體DRG中MMP-9表達(dá)的影響66-67
• 3.4.6 BAM8-22作用72h激活MrgC受體對慢性嗎啡誘導(dǎo)的離體DRG中CX3CL67-68
• 3.4.7 BAM8-22作用72h激活MrgC受體對慢性嗎啡誘導(dǎo)的離體DRG中CCL2表達(dá)的影響68-69
• 3.4.8 BAM8-22作用72h激活MrgC受體對慢性嗎啡誘導(dǎo)的離體DRG中IL-1β表達(dá)的影響69-70
• 3.4.9 BAM8-22作用72h激活MrgC受體對慢性嗎啡誘導(dǎo)的離體DRG中MMP-9表達(dá)的影響70-71
• 3.5 討論71-74
• 第四章 結(jié)論74-76
• 附錄76-78
• 參考文獻(xiàn)78-88
• 攻讀學(xué)位期間承擔(dān)的科研任務(wù)與主要成果88-90
• 致謝90-92
• 個(gè)人簡歷92-95

【相似文獻(xiàn)】

中國碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前2條

1 林銘燕;MrgC受體調(diào)制慢性嗎啡誘發(fā)大鼠DRG神經(jīng)元痛介質(zhì)上調(diào)的研究[D];福建師范大學(xué);2015年

2 李琦;腎上腺髓質(zhì)素參與嗎啡耐受的產(chǎn)生和MrgC受體對嗎啡耐受的調(diào)制的研究[D];福建師范大學(xué);2015年

  本文關(guān)鍵詞：MrgC受體調(diào)制慢性嗎啡誘發(fā)大鼠DRG神經(jīng)元痛介質(zhì)上調(diào)的研究，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

本文編號：278201