【摘要】：惡性腫瘤的發(fā)生是由于細胞內基因組的異常改變及累積而導致其生物學行為上的變化,是各種致癌因素共同作用的結果。據(jù)2015年國家統(tǒng)計局數(shù)據(jù),我國惡性腫瘤的發(fā)病率約占全球惡性腫瘤發(fā)病率的21.8%,因其發(fā)展迅速、難以根治等特性導致死亡率居高不下。惡性腫瘤細胞周期失常,具有無限增殖的特性。細胞增殖需要有序地經過細胞周期,細胞周期素依賴性激酶2(CDK2)能夠與細胞周期素(cyclin)結合,直接參與調控細胞有絲分裂由G1到S期的進程。CDK2靶向抑制劑如Milciclib、Seliciclib和Dinaciclib等已進入臨床II/III期研究,表現(xiàn)出極大的抗腫瘤潛力。本論文綜述了腫瘤分子的靶向治療藥物及CDK2抑制劑的研究進展。以CDK2抑制劑Milciclib作為先導化合物,在總結其構效關系的基礎上,設計并合成了以5,6-二氫-1H-嘧啶并[4,5-f]喹唑啉為母核的32個I系列化合物和以8-環(huán)戊基-6-羥基蝶啶-7(8H)-酮為母核的16個II系列化合物。目標化合物均未見文獻報道,結構經質譜、核磁共振氫譜和碳譜確認。I系列化合物以1,3-環(huán)己二酮(M-1)為原料,經縮合、成環(huán)、氧化、加成、水解等反應得到目標產物,在母核2位和8位分別引入氫原子、甲基、對位取代的芳胺等基團,用于探索不同取代基作用于鉸鏈區(qū)與核糖結合區(qū)時對生物活性的影響。II系列化合物以5-硝基-2,4-二氯嘧啶(N-1)為原料,經取代、縮合、成環(huán)、偶聯(lián)等反應得到目標產物。在母核的3位引入羥基、鹵素、氨基等能夠產生氫鍵相互作用的基團;在母核7位引入芳胺,保持化合物與亮氨酸殘基Leu 83的氫鍵作用,同時在芳胺對位引入能夠與溶劑區(qū)產生相互作用的親水性側鏈。本論文對合成的目標化合物進行體外CDK2激酶活性檢測及乳腺癌細胞MCF-7與結直腸癌細胞HCT 116抗增殖實驗。激酶抑制實驗結果表明:I類化合物中,化合物I-10~I-17對CDK2的抑制效果優(yōu)于化合物I-1~I-9,即2位引入芳胺類取代基化合物的活性優(yōu)于8位引入芳胺類取代基化合物的活性,表明I類化合物中8位的芳胺類取代修飾是提高活性的主要策略。化合物I-20、I-23、I-26、I-27、I-28、I-29、I-31、I-32對CDK2的IC_(50)均小于0.2μM,其中化合物I-23、I-28的IC_(50)值分別為0.11μM和0.09μM,與陽性化合物Milciclib的抑制活性(IC_(50)=0.052μM)相近。II類化合物中,母核3位為羥基取代、7位為苯胺取代的化合物(II-1~II-7)對CDK2有較好的抑制活性,IC_(50)值均小于3μM;當母核3位為鹵素或氨基取代(化合物II-9~II-11)時,對CDK2的抑制活性不佳,IC_(50)值均大于30μM;母核3位為羥基取代,在7位苯胺的對位引入哌嗪等親水性基團時活性增強,當取代基為酰胺時活性減弱。體外腫瘤細胞抗增殖實驗結果表明:I類化合物I-20~I-32與II類化合物II-4~II-9對兩種腫瘤細胞均有不同程度的抗增殖活性。其中,化合物I-23(IC_(50)=1.3μM,0.9μM)、I-28(IC_(50)=1.1μM,1.4μM)、I-31(IC_(50)=1.9μM,1.3μM)、I-32(IC_(50)=1.6μM,1.7μM)、II-5(IC_(50)=5.6μM,8.0μM)和II-6(IC_(50)=4.5μM,6.2μM)對乳腺癌細胞MCF-7和結直腸癌細胞HCT 116顯示出一定的抗增殖活性,具有進一步開發(fā)為臨床前研究的CDK2抑制劑的潛力。
【學位授予單位】：江南大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2019
【分類號】：R914;R96
【圖文】：

生物學基礎腫瘤的發(fā)生發(fā)展是一個多階段、多步驟、涉及多基因的病理過程。正常細胞在致瘤因素的長期作用下演變而來的，這種變化的核心在性的改變，其物質基礎主要是 DNA 和遺傳密碼。癌變后的正常細細胞進一步生長繁殖，發(fā)生浸潤和轉移即發(fā)展為惡性腫瘤。腫瘤可概括為：原發(fā)瘤增殖、腫瘤新生血管生長；腫瘤細胞侵襲基膜；循環(huán)系統(tǒng)中存活，形成瘤栓并轉運到遠隔靶器官；滯留于靶器官血管并形成微小轉移灶；腫瘤血管形成，轉移癌灶增殖[26]。腫瘤細胞進展期表現(xiàn)出來的特征可歸為 6 大類(圖 1-1)，腫瘤分子此展開。例如以腫瘤細胞信號傳導通路為靶點開發(fā)的表皮生長因子和單克隆抗體藥物[28]；針對腫瘤新生血管的形成機制，靶向血管內體(VEGF/VEGFR)[29]開發(fā)藥物；靶向調控腫瘤細胞周期[30]以改變用基因治療[31]的方法引入抑癌基因或干擾細胞的轉錄和翻譯從而

第一章 緒論n)通過與CDK結合以誘導其構象改變，使得C中移開，從而激活 CDK 的激酶活性[57]。T-lDK 與底物的相互作用。直接參與調節(jié)細胞周6 和 CDK7。CDK-cyclin 復合物在細胞周期中細胞周期蛋白 cyclin D 結合，主要調控 G1 CDK2-cyclin E 調控細胞由 G1 期進入 S 期合成 DNA 并為有絲分裂做準備；進入 G2/行有絲分裂；CDK7-cyclin H 在整個細胞周op 的蘇氨酸進一步促進 CDK 的激活。

圖 1-8 CDKs 調控細胞周期Fig. 1-8 Regulation of cell cycle by CDKs激酶抑制蛋白(CDK inhibitor，CKI)是一可以分為兩個家族(圖 1-9)。第一類為 I15Ink4b、p18Ink4c和 p19Ink4d。這四個蛋l(fā)in D 復合物使 CDK 與 cyclin 分離，或從而阻礙細胞周期的進行[58]。第二類為這幾個成員之間大約有 50%的序列是并抑制它們的活性，但在功能上是 CD

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本文編號：2766812