【摘要】：細(xì)胞內(nèi)外正常的陰離子濃度動(dòng)態(tài)平衡是細(xì)胞維持正常形態(tài)和功能的基礎(chǔ)。能夠促進(jìn)陰離子跨膜轉(zhuǎn)運(yùn)的有機(jī)小分子化合物即陰離子轉(zhuǎn)運(yùn)體,因可紊亂細(xì)胞內(nèi)外正常的陰離子,特別是氯離子濃度動(dòng)態(tài)平衡以誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡,具有發(fā)展成為一類(lèi)新型抗腫瘤藥物的良好前景。雖然目前已有一些陰離子轉(zhuǎn)運(yùn)體表現(xiàn)出優(yōu)異的抗腫瘤活性,但是陰離子轉(zhuǎn)運(yùn)體的抗腫瘤活性與離子轉(zhuǎn)運(yùn)活性之間的相關(guān)性尚不十分清晰,而且陰離子轉(zhuǎn)運(yùn)體的抗腫瘤作用機(jī)制研究還處于相對(duì)早期階段。因此,為了初步闡明這些問(wèn)題以及推動(dòng)陰離子轉(zhuǎn)運(yùn)體在抗腫瘤藥物研發(fā)領(lǐng)域中的應(yīng)用,本論文設(shè)計(jì)合成了一系列雙苯并咪唑類(lèi)陰離子轉(zhuǎn)運(yùn)體,并詳細(xì)研究了其在脂質(zhì)體模型和細(xì)胞上的陰離子轉(zhuǎn)運(yùn)、腫瘤細(xì)胞增殖抑制活性以及可能的作用機(jī)制。本論文共分為三章。第一章對(duì)近十年來(lái)陰離子轉(zhuǎn)運(yùn)體在細(xì)胞上的陰離子轉(zhuǎn)運(yùn)與抗腫瘤活性的研究現(xiàn)狀進(jìn)行了總結(jié),并歸納了陰離子轉(zhuǎn)運(yùn)活性的優(yōu)化策略,簡(jiǎn)述了本論文課題的設(shè)計(jì)思路和研究意義。第二章詳細(xì)測(cè)試了本課題組已合成的1,3-雙(2-苯并咪唑基)苯及其衍生物的抗腫瘤活性及可能的作用機(jī)制,以期初步闡明該類(lèi)化合物的抗腫瘤活性與其陰離子轉(zhuǎn)運(yùn)活性之間的相關(guān)性。MTT法測(cè)試表明,這些化合物的大部分都具有較好的腫瘤抑制活性。構(gòu)效關(guān)系分析表明只有當(dāng)兩個(gè)苯并咪唑單元處于間位且保留其-NH時(shí)才具有抗腫瘤活性。以1,3-雙(2-苯并咪唑基)苯,1,3-雙[2-(5-三氟甲基-苯并咪唑基)]苯,1,3-雙[2-(5-三氟甲基-苯并咪唑基)]-5-硝基苯和1,3-雙[2-(5-三氟甲基-苯并咪唑基)]-5-甲氧基苯為例,基于HeLa細(xì)胞的MQAE和吖啶橙細(xì)胞染色實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,這些化合物能夠引起細(xì)胞內(nèi)氯離子濃度升高和堿化溶酶體,而且在細(xì)胞上的離子轉(zhuǎn)運(yùn)活性與脂質(zhì)體模型上的離子轉(zhuǎn)運(yùn)活性相一致。此外,細(xì)胞外液的氯離子可明顯增強(qiáng)這些化合物對(duì)腫瘤細(xì)胞的抑制活性,表明氯離子在細(xì)胞毒性中起著較重要的作用。細(xì)胞核染色質(zhì)的固縮及線(xiàn)粒體膜電位的下降表明,這些化合物可能是通過(guò)細(xì)胞凋亡機(jī)制發(fā)揮抗腫瘤活性的。第三章設(shè)計(jì)合成了一系列氟原子取代的1,3-雙(2-苯并咪唑基)苯衍生物,以?xún)?yōu)化陰離子轉(zhuǎn)運(yùn)和抗腫瘤活性。結(jié)果發(fā)現(xiàn),在中間苯環(huán)上引入氟原子不僅能提高這些衍生物的氯離子轉(zhuǎn)運(yùn)活性,還能明顯提高其抗腫瘤增殖活性;苯并咪唑單元上的氟原子總數(shù)能顯著提高氯離子轉(zhuǎn)運(yùn)活性,但對(duì)抗腫瘤活性的影響不大。雖然苯并咪唑單元上的氟原子位置對(duì)氯離子轉(zhuǎn)運(yùn)活性影響不大,但是當(dāng)苯并咪唑單元上有不超過(guò)2個(gè)氟原子時(shí),氟原子在苯并咪唑單元上的4位或7位取代時(shí)細(xì)胞毒性較弱。另外,基于HeLa細(xì)胞上的MQAE和吖啶橙細(xì)胞染色實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,1,3-雙[2-(4,5,6,7-四氟-苯并咪唑基)]-5-氟苯不僅能夠紊亂細(xì)胞內(nèi)外的氯離子平衡,還能堿化溶酶體。細(xì)胞核染色質(zhì)的固縮及線(xiàn)粒體膜電位的下降表明該化合物的抗腫瘤機(jī)制可能為凋亡。綜上所述,本研究發(fā)現(xiàn)了雙苯并咪唑類(lèi)陰離子轉(zhuǎn)運(yùn)體通過(guò)紊亂陰離子平衡發(fā)揮抗腫瘤作用,并采用氟原子修飾的策略?xún)?yōu)化了 1,3-雙(2-苯并咪唑基)苯的離子轉(zhuǎn)運(yùn)活性和抗腫瘤活性,初步闡明了氟原子修飾對(duì)陰離子轉(zhuǎn)運(yùn)體的陰離子轉(zhuǎn)運(yùn)活性和抗腫瘤活性的影響。這些結(jié)果可望為通過(guò)紊亂陰離子動(dòng)態(tài)平衡而發(fā)揮藥理活性的新型抗腫瘤小分子藥物的合理設(shè)計(jì)提供一定的參考。
【圖文】：

Ｈ３邐１１４逡逑圖１－３．方酰胺類(lèi)化合物１１０－１１４的結(jié)構(gòu)逡逑Ｆｉｇｕｒｅ邋１－３．邋Ｓｔｒｕｃｔｕｒｅｓ邋ｏｆ邋ｓｑｕａｒａｍｉｄｅ－ｂａｓｅｄ邋ｄｅｒｉｖａｔｉｖｅｓ邋１１０－１１４逡逑２０１６年，Ｓａｈａ等用具有膜通透性的氯離子選擇性熒光探針ＭＱＡＥ逡逑［Ｎ－（Ｅｔｈｏｘｙｃａｒｂｏｎｙｌｍｅｔｈｙｌ）－６－ｍｅｔｈｏｘｙｑｕｉｎｏｌｉｎｉｕｍ邋ｂｒｏｍｉｄｅ］測(cè)試了雙d趲０防嗷義蝦銜錚保插澹ㄍ跡保保┰諳赴系穆壤胱幼嘶钚裕郟常矗蕁＝峁⑾鄭弊饔檬奔湟歡ㄊ保義纖孀嘔銜錚保駁吶ǘ壬擼�，细胞内ＭＱＡ｝嫬光强墩J(rèn)陸擔(dān)得髟詬沒(méi)銜锏慕殄義希村義

本文編號(hào)：2689802