本文關(guān)鍵詞：樹枝狀大分子聚合物包載sh-miR-34a抗惡性黑素瘤增殖作用研究，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：黑色素瘤(malignant melanoma,MM)是一種由黑色素細胞引起進而累及全身的惡性腫瘤,其轉(zhuǎn)移發(fā)生較早、死亡率較高。目前在我國,惡性黑色素瘤的發(fā)病率呈現(xiàn)出逐年上升的趨勢。由于相關(guān)知識的缺乏,患者在就診時往往病情已經(jīng)惡化,因此黑素瘤的治療結(jié)果并不理想。臨床上傳統(tǒng)治療惡性黑素瘤的方法包括手術(shù)和化療等,如何利用新技術(shù)克服傳統(tǒng)治療過程中存在的副作用大、患者順應性差等難題是目前研究的熱點。同時近年來,隨著人們對腫瘤相關(guān)發(fā)病機制研究的不斷深入以及基因工程技術(shù)和分子生物學的發(fā)展,針對惡性黑素瘤基因治療的研究逐漸成為惡性黑素瘤治療領域的熱門。基因治療利用外源正�；�,將其導入基因缺陷和異常的生物體內(nèi),進而達到治療的目的。本課題利用樹枝狀大分子材料聚酰胺-胺(PAMAM)作為非病毒載體材料,采用可以表達miR-34a的質(zhì)粒sh-miR-34a作為基因藥物,應用RNAi技術(shù)研究惡性黑素瘤的治療方案。研究利用靜電復合原理構(gòu)建PAMAM/sh-miR-34a納米復合物,對其粒徑和電位進行表征后發(fā)現(xiàn)在N/P=20時,PAMAM/sh-miR-34a納米復合物的粒徑為180 nm左右,電位為30 mV左右。瓊脂糖凝膠電泳顯示PAMAM在N/P=5時可以有效包裹基因藥物sh-miR-34a。隨后在體外細胞水平對PAMAM/sh-miR-34a納米復合物的抗腫瘤作用進行了考察。攝取實驗發(fā)現(xiàn)A375細胞對PAMAM/sh-miR-34a納米復合物的攝取高達80%以上。CCK8實驗顯示PAMAM/sh-miR-34a納米復合物可以在體外有效抑制A375細胞的增殖,A375細胞的存活率僅為61.2±2.5%。細胞遷移和侵襲實驗結(jié)果顯示A375細胞的遷移和侵襲可以被PAMAM/sh-mi R-34a納米復合物有效抑制。本研究最后在體內(nèi)對PAMAM/sh-miR-34a納米復合物的抗腫瘤作用進行了考察。利用皮下注射法構(gòu)建了A375裸鼠移植瘤模型,通過尾靜脈注射給藥的方式考察了PAMAM/sh-miR-34a納米復合物的體內(nèi)作用,結(jié)果發(fā)現(xiàn)PAMAM/sh-miR-34a在體內(nèi)也可以抑制A375移植瘤的生長,PAMAM/sh-miR-34a組實驗結(jié)束后的腫瘤體積僅為對照組的74.8%,腫瘤質(zhì)量僅為對照組的66.9%。通過本課題的研究,成功構(gòu)建了PAMAM/sh-miR-34a納米給藥系統(tǒng),詳細表征了其電位、粒徑、包裹能力以及體外抗A375細胞增殖作用,sh-miR-34a抑制A375細胞生長的機制為抑制磷酸化的蛋白激酶(extracellular regulated protein kinases)ERK1和ERK2以及磷酸化的AKT激酶。體內(nèi)實驗結(jié)果也表明sh-miR-34a在荷瘤裸鼠體內(nèi)也有較為理想的抑瘤作用。
【關(guān)鍵詞】：惡性黑素瘤 樹枝狀大分子 基因治療 sh-miR-34a 納米給藥系統(tǒng)
【學位授予單位】：河北北方學院
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2016
【分類號】：R96
【目錄】：

• 中文摘要5-7
• 英文摘要7-9
• 英文縮寫9-10
• 前言10-13
• 材料與方法13-20
• 結(jié)果20-24
• 附圖24-32
• 討論32-35
• 結(jié)論35-36
• 參考文獻36-39
• 綜述 非病毒類載體材料靶向治療黑色素瘤研究進展39-48
• 參考文獻46-48
• 致謝48-49
• 個人簡歷49

【參考文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前7條

1 李寧;吉曉濱;謝景華;劉啟才;;喉癌來源黑色素瘤抗原A3在小鼠黑色素瘤細胞模型的表達[J];中國免疫學雜志;2014年11期

2 溫斯健;孫建方;;黑素瘤生物標志物的研究進展[J];國際皮膚性病學雜志;2014年04期

3 沈楠;朱宏;;藥物載體PAMAM樹狀大分子的毒理[J];材料導報;2012年19期

4 李薇薇;涂平;汪e

本文編號：268095