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維生素D對糖皮質(zhì)激素免疫抑制模型小鼠的免疫調(diào)節(jié)作用

發(fā)布時間:2017-03-25 17:15

  本文關(guān)鍵詞:維生素D對糖皮質(zhì)激素免疫抑制模型小鼠的免疫調(diào)節(jié)作用,由筆耕文化傳播整理發(fā)布。


【摘要】:目的通過觀察維生素D對糖皮質(zhì)激素誘導的免疫抑制模型小鼠免疫學指標的影響,探討維生素D對免疫功能低下的調(diào)節(jié)作用及部分機制。方法實驗小鼠隨機分成5組:對照組、模型組和維生素D低、中、高劑量組。模型組小鼠連續(xù)3天腹腔注射地塞米松(25 mg/kg體重)建立免疫抑制小鼠模型,對照組小鼠連續(xù)3天腹腔注射與地塞米松相同體積的注射用水;低、中、高劑量組小鼠在建立模型的基礎(chǔ)上,于腹腔注射地塞米松的第一天,同時分別給予三個不同劑量(4、6、10 IU/g體重)1,25(OH)2D3灌胃處理,模型組和對照組于注射的第一天,同時灌胃給予0.2ml的注射用水,連續(xù)7天;。于實驗的第8天,小鼠稱重,摘眼球取血,EDTA抗凝,然后斷頸處死小鼠,無菌取脾和胸腺,分別稱重,計算小鼠胸腺、脾臟指數(shù);制備脾細胞懸液,經(jīng)過刀豆素A(T淋巴細胞活化劑)刺激后,采用MTT法檢測小鼠脾臟T淋巴細胞增殖指數(shù),同時吸取細胞培養(yǎng)上清,采用酶聯(lián)免疫吸附實驗檢測白細胞介素-2的濃度;采用全自動血細胞分析儀檢測小鼠外周血白細胞總數(shù)及分類,采用流式細胞術(shù)檢測外周血T淋巴細胞及其亞群、B淋巴細胞及NK細胞的百分比。結(jié)果1.模型組小鼠胸腺指數(shù)、脾臟指數(shù)、脾臟淋巴細胞增殖指數(shù)、外周血淋巴細胞百分比、脾臟T淋巴細胞產(chǎn)生白細胞介素-2的能力及外周血B淋巴細胞、除NK T淋巴細胞以外的T淋巴亞群均明顯低于對照組,而NK T淋巴細胞百分比與對照組相比明顯增高。2.維生素D不同劑量組小鼠胸腺指數(shù)均明顯高于模型組,并且隨著劑量增高,胸腺指數(shù)有增高的趨勢;而給予不同劑量的維生素D對小鼠的脾臟指數(shù)無明顯影響。3.維生素D中劑量組淋巴細胞增殖指數(shù)明顯高于模型組,但仍低于對照組的增殖指數(shù);維生素D低劑量組和維生素D高劑量組與模型組相比較,增殖指數(shù)無明顯差異。4.維生素D中劑量組小鼠脾淋巴細胞培養(yǎng)上清液中白細胞介素-2的濃度明顯高于模型組;但維生素D低劑量組和維生素D高劑量組與模型組相比,白細胞介素-2水平無明顯差異。5.維生素D中劑量組外周血淋巴細胞數(shù)量明顯高于模型組;而白細胞是隨著維生素D使用藥劑量的增加而逐漸升高。6.維生素D低劑量組外周血B淋巴細胞百分比明顯高于模型組。維生素D中劑量組及維生素D高劑量組與模型組無明顯差異。7.維生素D低劑量組外周血自然殺傷細胞百分比與模型組相比有增高的趨勢。而維生素D高劑量組自然殺傷細胞百分比明顯低于模型組。當維生素D給藥劑量增加時,自然殺傷細胞百分比有降低的趨勢。8.維生素D低劑量組CD4~+淋巴細胞百分比低于模型組,隨著維生素D給藥劑量的增加,CD4~+淋巴細胞百分比逐漸增高。維生素D低劑量組的CD8+淋巴細胞百分比較模型組明顯降低。維生素D中劑量組與維生素D高劑量組CD4~+/CD8+值較模型組明顯升高,而維生素D低劑量組與模型組不具有明顯差異,隨維生素D給藥劑量增高,CD4~+/CD8+值也隨之增高。結(jié)論維生素D可以改善糖皮質(zhì)激素誘導的免疫抑制小鼠的免疫功能,不同劑量的維生素D對免疫調(diào)節(jié)作用存在差異,其中,中等劑量(6IU/g)維生素D補充對免疫功能的調(diào)節(jié)作用最強;進一步增高維生素D劑量對免疫的調(diào)節(jié)作用相對減弱?傊,維生素D可以促進免疫功能低下小鼠免疫功能的恢復(fù),可能通過調(diào)節(jié)T淋巴細胞增殖及分泌細胞因子如白細胞介素-2的水平對免疫功能進行調(diào)節(jié)。
【關(guān)鍵詞】:維生素D免疫 白細胞介素-2 T淋巴細胞 B淋巴細胞 自然殺傷細胞
【學位授予單位】:安徽醫(yī)科大學
【學位級別】:碩士
【學位授予年份】:2016
【分類號】:R-332;R965
【目錄】:
  • 英文縮略詞6-7
  • 中文摘要7-9
  • 英文摘要9-12
  • 1 前言12-15
  • 2 實驗材料15-16
  • 2.1 動物15
  • 2.2 藥物與試劑15-16
  • 2.3 主要實驗儀器16
  • 3 實驗方法16-20
  • 3.1 糖皮質(zhì)激素誘導的免疫抑制小鼠模型的建立16-17
  • 3.2 實驗動物分組及給藥方法17
  • 3.3 小鼠體重、胸腺指數(shù)、脾臟指數(shù)的測定17
  • 3.4 小鼠脾臟淋巴細胞增殖指數(shù)測定17-18
  • 3.5 細胞因子IL-2 的測定18
  • 3.7 B、NK、T淋巴細胞亞群的測定18-19
  • 3.6 外周血白細胞數(shù)量檢測19
  • 3.8 統(tǒng)計學處理19-20
  • 4 結(jié)果20-27
  • 4.1 維生素D對小鼠體重、胸腺指數(shù)、脾臟指數(shù)的影響20-21
  • 4.2 維生素D對小鼠脾臟淋巴細胞增殖的影響21
  • 4.3 維生素D對細胞因子IL-2 分泌的影響21-22
  • 4.4 維生素D對小鼠外周血白細胞及淋巴細胞數(shù)量的影響22-23
  • 4.5 維生素D對小鼠外周血T淋巴細胞亞群百分比及比值影響23-26
  • 4.6 維生素D對小鼠外周血B淋巴細胞百分比的影響26
  • 4.7 維生素D對小鼠外周血NK細胞百分比的影響26-27
  • 5 討論27-36
  • 5.1 維生素D對小鼠胸腺指數(shù)、脾臟指數(shù)的影響27-28
  • 5.2 維生素D對小鼠脾臟淋巴細胞增殖的影響28-29
  • 5.3 維生素D對細胞因子IL-2 分泌的影響29-30
  • 5.4 維生素D對小鼠外周血白細胞及淋巴細胞總數(shù)量的影響30
  • 5.5 維生素D對小鼠外周血T淋巴細胞亞群百分比及比值影響30-33
  • 5.6 維生素D對小鼠外周血B淋巴細胞百分比的影響33-34
  • 5.7 維生素D對小鼠外周血NK細胞百分比的影響34-35
  • 5.8 維生素D的不同劑量對免疫調(diào)節(jié)作用35-36
  • 6 結(jié)論36-37
  • 參考文獻37-44
  • 附錄44-45
  • 致謝45-46
  • 綜述46-55
  • 參考文獻52-55

【參考文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前9條

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本文編號:267532

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