載氧脂質(zhì)微泡的制備及體外實(shí)驗(yàn)研究
發(fā)布時(shí)間:2020-05-11 23:15
【摘要】:目的:調(diào)整載氧脂質(zhì)微泡(LOM)氣體核內(nèi)O2與C3F8的體積比,構(gòu)建一種較穩(wěn)定、高效的LOM,并評(píng)價(jià)其理化性質(zhì)。 方法:以DSPC+DPPE-MPEG5000脂質(zhì)體為外殼材料,采用機(jī)械振蕩法制備六種不同體積比氣體核的LOM,即O2與C3F8的體積比為0:1、1:0、1:1、3:1、5:1、10:1。光鏡下觀察各組微泡不同時(shí)間(3h、1d、3d、7d)微泡的形態(tài),計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)各組微泡不同時(shí)間(3h、1d、3d、7d)的濃度,Malvern激光測(cè)量?jī)x檢測(cè)各組微泡不同時(shí)間(1d、3d、7d)粒徑大小,溶解氧測(cè)定儀測(cè)定各組微泡在制備后0.5h、3.0h、1d在極度缺氧溶液中溶液溶解氧濃度(DO)的變化。選擇較優(yōu)的O2與C3F8體積比,并觀察該體積比微泡的Zeta電位,7天內(nèi)PH值的變化,以及60Co輻照后,微泡的形態(tài)、大小、濃度、Zeta電位及釋氧能力的改變。MTT法檢測(cè)較優(yōu)LOM對(duì)缺氧胎鼠海馬神經(jīng)元有無(wú)細(xì)胞毒性作用,分為四組:①缺氧+LOM組、②缺氧對(duì)照組、③triton-x100組、④未缺氧正常組。 結(jié)果:機(jī)械振蕩法制備的各種LOM中,以LOM5:1最優(yōu),其制備后微泡形態(tài)好,大小分布均勻,微泡濃度約為(4.01±0.69)×109/mL,平均粒徑約為(959.7±161.2)nm,Zeta電位為-(12.9±2.4)。7d觀察時(shí)間內(nèi),上述物理性質(zhì)無(wú)顯著變化(p0.05)。LOM5:1在極度缺氧(DO=0.4mg/l)溶液中能高效釋放氧氣,使溶液DO值增加約12倍,載氧能力最強(qiáng),且在1d內(nèi)其釋氧時(shí)間-強(qiáng)度曲線無(wú)明顯變化。60Co輻照LOM5:1后,微泡形態(tài)大小、濃度、Zeta電位及釋氧能力無(wú)明顯變化(p0.05)。MTT結(jié)果顯示:50μl LOM5:1對(duì)細(xì)胞無(wú)毒性。①和④組比較,其MTT吸光值差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p0.05);而和②、③組比較,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p0.05)。 結(jié)論:以DSPC+DPPE-MPEG5000為外殼材料,氣體核內(nèi)O2與C3F8體積比為5:1構(gòu)建的LOM5:1,,微泡形態(tài)好,濃度高,粒徑小且分布范圍較窄,7天內(nèi)物理性質(zhì)無(wú)明顯變化,1天內(nèi)微泡能穩(wěn)定載氧。同時(shí),LOM5:1對(duì)缺氧的胎鼠大腦海馬神經(jīng)元無(wú)細(xì)胞毒性作用。 目的:評(píng)價(jià)LOM5:1在中度缺氧溶液及離體人靜脈血中的釋氧能力;探討超聲輻照對(duì)LOM5:1釋氧量的增強(qiáng)效果;觀察LOM5:1增強(qiáng)兔肝顯影的效果。 方法:機(jī)械振蕩法制備LOM5:1,溶氧儀檢測(cè)LOM5:1對(duì)中度缺氧(DO=4.0mg/L)溶液DO值的影響;在有超聲輻照的條件下,檢測(cè)中度缺氧溶液DO值的改變,對(duì)比有無(wú)超聲輻照LOM5:1釋氧量的改變。LOM5:1與離體人靜脈血混合后,檢測(cè)靜脈血Po2值的變化,并通過(guò)物理推算LOM5:1中的含氧量。評(píng)價(jià)微泡增強(qiáng)兔肝超聲顯影的效果。 結(jié)果:LOM5:1使中度缺氧溶液DO值增加約0.5倍;超聲輻照條件下,能顯著增加微泡的釋氧量,使中度缺氧溶液DO值增加約1倍;LOM5:1能使離體人靜脈血Po2增加約4倍,顯著升高離體人靜脈血Po2(p0.05)。載氧脂質(zhì)微泡可明顯增強(qiáng)兔肝實(shí)質(zhì)超聲顯影,且持續(xù)增強(qiáng)約30min。 結(jié)論:LOM5:1在中度缺氧環(huán)境中較在極度缺氧環(huán)境中釋放氧氣量少;超聲輻照下,該微泡在中度缺氧環(huán)境中的釋氧量明顯增加;能顯著增加離體人靜脈血Po2。LOM5:1有望成為一種安全、有效的靜脈攜氧劑。
【圖文】:
16圖 1-3 各組微泡各時(shí)間點(diǎn)光鏡觀察(×400)Fig.1-3 Microscope images of different LOMs at different time(×400)2 各組 LOM 濃度隨時(shí)間的變化①LOM 0:1:制備后 3 h,微泡濃度為(2.720±0.647)×109/ml;制備后 1 d,泡濃度為(2.637±0.657)×109/ml;制備后 3 d,微泡濃度為(2.734±0.743)109/ml;制備后 7 d,微泡濃度為(2.629±0.623)×109/ml; ② LOM 1:0:制后 3 h,微泡濃度為(0.446±0.104)×109/ml;制備后 1 d,微泡濃度為(0.041
LOM 5:1 微泡在制備后0.5 h、1 d、3 d及7 d,其懸液PH值分別為7.120±0.078、7.073±0.031、7.070±0.075及7.010±0.026,表明該組微泡在7天內(nèi)溶液PH值無(wú)明顯變化(P>0.05)(圖1-7)。LOM 5:1 微泡溶液Zeta電位為 -(12.9±2.4)
【學(xué)位授予單位】:重慶醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2014
【分類號(hào)】:R943
本文編號(hào):2659218
【圖文】:
16圖 1-3 各組微泡各時(shí)間點(diǎn)光鏡觀察(×400)Fig.1-3 Microscope images of different LOMs at different time(×400)2 各組 LOM 濃度隨時(shí)間的變化①LOM 0:1:制備后 3 h,微泡濃度為(2.720±0.647)×109/ml;制備后 1 d,泡濃度為(2.637±0.657)×109/ml;制備后 3 d,微泡濃度為(2.734±0.743)109/ml;制備后 7 d,微泡濃度為(2.629±0.623)×109/ml; ② LOM 1:0:制后 3 h,微泡濃度為(0.446±0.104)×109/ml;制備后 1 d,微泡濃度為(0.041
LOM 5:1 微泡在制備后0.5 h、1 d、3 d及7 d,其懸液PH值分別為7.120±0.078、7.073±0.031、7.070±0.075及7.010±0.026,表明該組微泡在7天內(nèi)溶液PH值無(wú)明顯變化(P>0.05)(圖1-7)。LOM 5:1 微泡溶液Zeta電位為 -(12.9±2.4)
【學(xué)位授予單位】:重慶醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2014
【分類號(hào)】:R943
【參考文獻(xiàn)】
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1 雷瑚儀;趙謝蘭;;幽門螺桿菌細(xì)胞毒素相關(guān)蛋白A在特發(fā)性血小板減少性紫癜發(fā)病機(jī)制中的作用[J];醫(yī)學(xué)研究生學(xué)報(bào);2012年01期
2 譚開彬,高云華,劉平,左松,劉政,朱賢勝;自制脂膜氟碳聲學(xué)造影劑長(zhǎng)時(shí)間增強(qiáng)組織灰階顯像的機(jī)理初探[J];中國(guó)超聲醫(yī)學(xué)雜志;2003年03期
本文編號(hào):2659218
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