【摘要】：目的觀察吡格列酮(Pioglitazone)對(duì)趨化素誘導(dǎo)成骨細(xì)胞代謝過(guò)程的影響,探討吡格列酮改善成骨細(xì)胞凋亡的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)機(jī)制。方法將成骨細(xì)胞隨機(jī)分組,選取適宜濃度的趨化素(Chemerin)進(jìn)行誘導(dǎo)后,加入吡格列酮,觀察成骨細(xì)胞活力變化。ELISA法檢測(cè)細(xì)胞趨化蛋白1(MCP-1)、E選擇素(E-selection)的影響,采用Western blot法檢測(cè)成骨細(xì)胞黏附分子1(ICAM-1)、需肌醇跨膜激酶/核酸內(nèi)切酶1(inositol-requiring transmembrane kinase/endonuclease 1,IRE1)、葡萄糖調(diào)節(jié)蛋白78(Glucose-regulated protein 78,GRP78)的表達(dá)變化,探究?jī)?nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激反應(yīng)在此過(guò)程中作用。結(jié)果 MTT法檢測(cè)提示加入Pioglitazone后對(duì)成骨細(xì)胞活力未見(jiàn)明顯影響;與對(duì)照組相比,成骨細(xì)胞ICAM-1、MCP-1、E-selection、IRE1、GRP78、在Chemerin組的指標(biāo)較高(P0.05),而Pioglitazone呈濃度依賴性地抑制Chemerin所誘導(dǎo)的上述效應(yīng),差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05),當(dāng)吡格列酮濃度為20μmol/L時(shí)效果最顯著。結(jié)論內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激可能參與趨化素誘導(dǎo)成骨細(xì)胞代謝中的細(xì)胞凋亡過(guò)程,吡格列酮可抑制趨化素的作用,對(duì)成骨細(xì)胞具有保護(hù)功能,其機(jī)制可能與抑制內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激反應(yīng)相關(guān)。
【圖文】：

每次5min，加ECL熒光液顯色，上機(jī)檢測(cè)。用目標(biāo)條帶與內(nèi)標(biāo)條帶(β-actin)的積分吸光度值(Integratedabsorbance，IA)的比值的百分率表示IκB-α和ICAM-1的表達(dá)水平。1.7統(tǒng)計(jì)學(xué)處理采用SPSS16.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，所有實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)均以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(mean±SD)表示，采用t檢驗(yàn)進(jìn)行組間比較，P＜0.05為有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。2結(jié)果2.1MTT法檢測(cè)成骨細(xì)胞活力各組細(xì)胞處理后酶標(biāo)儀檢測(cè)表明:與對(duì)照組和趨化素模型組比較，不同濃度的吡格列酮干預(yù)組(10μmol/L、20μmol/L)的細(xì)胞活力未見(jiàn)明顯降低，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)，見(jiàn)圖1。圖1吡格列酮對(duì)趨化素誘導(dǎo)的成骨細(xì)胞活力的影響1:對(duì)照組;2:1×10－5mol/L濃度趨化素組;3:1×10－6mol/L濃度趨化素+10μmol/L吡格列酮組;4:1×10－5mol/L濃度趨化素+20μmol/L吡格列酮組;與對(duì)照組相比較，P＞0.05Fig．1Effectofpioglitazoneonviabilityofosteoblastsinducedbychemerin1:Controlgroup;2:Chemerin1×10－5mol/Lgroup;3:Chemerin1×10－5mol/L+pioglitazone10μmol/Lgroup;4:Chemerin1×10－5mol/L+pioglitazone20μmol/Lgroup;vs．control，P＞0.052.2吡格列酮對(duì)趨化素誘導(dǎo)的原代成骨細(xì)胞MCP-1含量表達(dá)的影響與對(duì)照組比較，趨化素模型組、10μmol/L吡格列酮干預(yù)組和20μmol/L吡格列酮干預(yù)組的MCP-1含量均升高(P＜0.05);與趨化素模型組比較，隨著吡格列酮干預(yù)組濃度的升高，原代成骨細(xì)胞的MCP-1含量下降(P＜0.05)，且在吡格列酮濃度為20μmol/L時(shí)效果最為顯著，提示吡格列酮呈濃度依賴性抑制趨化素對(duì)原代成骨細(xì)胞MCP-1含量的增加作用。見(jiàn)圖2。圖2吡格列酮對(duì)趨化素誘導(dǎo)的成骨細(xì)胞MCP-1含量的影響1:對(duì)照組;2:1×10－5mol/L濃度趨化素組;3:1×10－5mol/L濃?

10－5mol/L+pioglitazone10μmol/Lgroup;4:Chemerin1×10－5mol/L+pioglitazone20μmol/Lgroup;vs．control，P＞0.052.2吡格列酮對(duì)趨化素誘導(dǎo)的原代成骨細(xì)胞MCP-1含量表達(dá)的影響與對(duì)照組比較，趨化素模型組、10μmol/L吡格列酮干預(yù)組和20μmol/L吡格列酮干預(yù)組的MCP-1含量均升高(P＜0.05);與趨化素模型組比較，隨著吡格列酮干預(yù)組濃度的升高，原代成骨細(xì)胞的MCP-1含量下降(P＜0.05)，且在吡格列酮濃度為20μmol/L時(shí)效果最為顯著，提示吡格列酮呈濃度依賴性抑制趨化素對(duì)原代成骨細(xì)胞MCP-1含量的增加作用。見(jiàn)圖2。圖2吡格列酮對(duì)趨化素誘導(dǎo)的成骨細(xì)胞MCP-1含量的影響1:對(duì)照組;2:1×10－5mol/L濃度趨化素組;3:1×10－5mol/L濃度趨化素+10μmol/L吡格列酮組;4:1×10－5mol/L濃度趨化素+20μmol/L吡格列酮組;與對(duì)照組相比較，*P＜0.05;與1×10－5mol/L濃度趨化素組比較，，#P＜0.05;與1×10－5mol/L濃度趨化素+10μmol/L吡格列酮組比較，＆P＜0.05Fig．2EffectofpioglitazoneonMCP-1productioninosteoblastsinducedbychemerin1:Controlgroup;2:Chemerin1×10－5mol/Lgroup;3:Chemerin1×10－5mol/L+pioglitazone10μmol/Lgroup;4:Chemerin1×10－5mol/L+pioglitazone20μmol/Lgroup;*P＞0.05vs．control;#P＜0.05，comparedwithChemerin1×10－5mol/Lgroup;＆P＜0.05，comparedwithChemerin1×10－5mol/L+pioglitazone10μmol/mLgroup2.3吡格列酮對(duì)趨化素誘導(dǎo)的原代成骨細(xì)胞E-selection含量表達(dá)的影響與對(duì)照組比較，趨化素模型組、10μmol/L吡格列酮干預(yù)組和20μmol/L吡格列酮干預(yù)組的E-selection含量均升高(P＜0.05);與趨化素模型組比較，隨著吡格列酮干

【參考文獻(xiàn)】

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【共引文獻(xiàn)】

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【二級(jí)參考文獻(xiàn)】

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本文編號(hào)：2556710