發(fā)布時間：2018-06-08 15:50

  本文選題：胰島素抵抗 + 內皮細胞��； 參考：《吉林大學》2015年博士論文

【摘要】：胰島素抵抗常與內皮功能障礙同時出現，它們擁有共同的發(fā)病機制（如高血糖、高血脂、高胰島素、炎癥、凝血功能障礙、激素釋放紊亂等），相互影響、相互交錯并加重，最終可導致糖尿病、肥胖、代謝綜合征、全身心腦血管系統(tǒng)疾病及相關靶器官損害的出現和發(fā)展。所以說二者是上述疾病形成的主要推動力和重要基礎條件。 正常情況下胰島素可通過與內皮細胞上的胰島素受體結合后激活IRS（胰島素受體底物）并憑借特定的細胞信號通路相繼激活PI3K（磷脂酰肌醇-3激酶）、Akt（蛋白激酶B）、eNOS（內皮型一氧化氮合酶）以刺激內皮細胞產生一氧化氮（NO），完成其使血管擴張，血流增加的生物學特性。但是當處于高糖、氧化應激等條件下胰島素信號更容易通過MAPK（絲裂原活化蛋白激酶）——ET-1細胞信號通路作用血管內皮細胞，刺激血管內皮素-1（ET-1）和粘附分子（AM）的表達，這樣可達到與IRS-1——PI3K——Akt信號傳導通路相反的生理、病理反應，使血管收縮，血流減少，細胞增殖、增生，血栓容易形成，凝血系統(tǒng)異常，從而影響內皮細胞功能，導致內皮細胞完整性被破壞，引發(fā)內皮細胞功能障礙。反過來內皮功能障礙也可影響胰島素的正常生物特性，使之不能有效和其受體結合并產生細胞信號，最終可導致胰島素靶器官對胰島素調節(jié)葡萄糖利用的靈敏度和/或代謝作用的反應下降而引發(fā)胰島素抵抗。導致多系統(tǒng)疾病的能量穩(wěn)態(tài)、細胞生長和組織修復之間失衡，出現葡萄糖和脂質代謝紊亂，表現為脂質沉積、氧化應激、炎癥反應增多，趨化因子和細胞因子隨即釋放而損傷血管，進一步加重胰島素抵抗和內皮功能障礙的程度，最終導致多種臨床慢性疾病的出現直至MODS（多器官功能障礙綜合征）的發(fā)生。 因此胰島素和內皮細胞能否正常發(fā)揮生理效應，對保持健康機體內環(huán)境中代謝和血流動力學間的平衡起著至關重要的作用。所以尋找能夠同時增強胰島素敏感性并保護血管內皮細胞，確保胰島細胞能如常分泌適宜胰島素作用正常內皮細胞以使二者生理功能得以如常發(fā)揮，避免或減輕胰島素抵抗和內皮功能障礙的病理損害發(fā)展到如血管結構異常增生及斷裂、胰島素靶器官喪失對其敏感性、胰島分泌功能耗竭影響代謝導致內環(huán)境紊亂引發(fā)多種疾病出現并走向終末階段以致不可逆轉，降低相關疾病如糖尿病、冠心病的發(fā)病率及死亡率的方法，，對臨床工作將大有裨益。 吡格列酮（Pioglitazone）作為噻唑烷二酮家族成員之一，屬于胰島素增敏劑。而因為吡格列酮具有提高胰島素靶器官對胰島素的敏感性，促進葡萄糖的攝取從而降低血糖的作用，目前臨床工作中主要用來針對2型糖尿病患者進行治療。新近一些實驗、調查、研究表明吡格列酮可能對損傷的內皮功能有改善作用，但是否對內皮細胞有保護作用及具體機制依然沒有明確提出。本研究應用吡格列酮作用胰島素抵抗血管內皮細胞，觀察其對胰島素抵抗血管內皮細胞是否具有保護作用及可能的作用機制。 方法： 1、以高濃度葡萄糖培養(yǎng)基加糖皮質激素和不同濃度的胰島素培養(yǎng)人臍靜脈內皮細胞，通過模擬人體胰島素抵抗形成的常見環(huán)境建立胰島素模型。利用葡萄糖消耗實驗檢測糖耗量，利用硝基還原酶法測定一氧化氮的含量，確定胰島素血管內皮細胞造模的最佳時間和最佳劑量；利用RT-PCR、western blot方法觀察胰島素抵抗血管內皮細胞IRS-1、PPAR-γ的mRNA基因及蛋白表達水平，觀察胰島素抵抗對該兩種蛋白的影響。 2、在各組胰島素抵抗血管內皮細胞中加入不同濃度的吡格列酮溶液，檢測其對胰島素抵抗血管內皮細胞的作用，利用MTT法觀察細胞活性，利用流式細胞儀檢測細胞凋亡率、分光光度法測量Caspase-3，檢測各組中細胞凋亡情況；利用硝基還原酶法測定一氧化氮的含量，利用western blot檢測eNOS蛋白質的表達情況。 3、利用RT-PCR、western blot方法檢測各吡格列酮組對照組中IRS-1、PPAR-γ、PI3K、Akt mRNA及蛋白質的表達情況，探討吡格列酮對胰島素抵抗血管內皮細胞的保護機制。 結果： 1、葡萄糖消耗結果顯示，與對照組比較，10-4mM胰島素+30mM葡萄糖+1μM地塞米培養(yǎng)48h葡萄糖消耗最少，NO含量最低（P0.05），為模型最佳劑量；與對照組相比，胰島素抵抗模型組IRS-1、PPAR-γ基因、蛋白表達降低。胰島素抵抗血管內皮細胞造模成功，并且該模型抑制IRS-1、PPAR-γ的表達。 2、MTT實驗結果顯示：吡格列酮組細胞生存率明顯高于胰島素抵抗模型組，呈劑量依賴性，50ng/mL為最佳實驗劑量；與胰島素抵抗模型組相比，吡格列酮可以有效的降低細胞凋亡率。與胰島素抵抗模型組相比，吡格列酮組可以有效的降低caspase-3活性；與胰島素抵抗模型組相比，吡格列酮組（50ng/mL）可以有效的升高eNOS蛋白水平表達。 3、吡格列酮作用胰島素抵抗血管內皮細胞后，與對照組相比，IRS-1、PI3K，AktmRNA及蛋白的表達量升高，吡格列酮可能通過調節(jié)PI3K/Akt信號傳導途徑對胰島素抵抗血管內皮細胞起到保護作用。 結論： 1、成功復制胰島素抵抗血管內皮細胞模型。 2、吡格列酮可能對胰島素抵抗血管內皮細胞起到保護作用，降低細胞損傷，其分子機制可能通過激活PI3K-Akt信號傳導通路實現其保護作用。 創(chuàng)新點從細胞信號通路角度探討吡格列酮對胰島素抵抗血管內皮細胞的保護作用，為其臨床應用提供實驗及理論依據。
[Abstract]:......
【學位授予單位】：吉林大學
【學位級別】：博士
【學位授予年份】：2015
【分類號】：R96

【相似文獻】

相關期刊論文 前10條

1 游捷,陳瑤,黃培基,林哲章;血清可溶性腫瘤壞死因子受體與胰島素抵抗的關系[J];中華內分泌代謝雜志;2002年01期

2 楊凌輝,鄒大進;肥胖致胰島素抵抗的機制[J];中華內分泌代謝雜志;2002年03期

3 管立學,王敬先,王景明,陳亮,朱國明,王瑞麗;血管緊張素轉換酶基因多態(tài)性與胰島素抵抗的臨床應用研究[J];中華檢驗醫(yī)學雜志;2002年02期

4 劉鐵迎;微血管內皮異常與胰島素抵抗[J];中國老年學雜志;2002年01期

5 蔡紅衛(wèi);脂聯素與胰島素抵抗的研究進展[J];重慶醫(yī)學;2002年11期

6 時海波,程雷,徐其昌;阻塞性睡眠呼吸暫停綜合征與胰島素抵抗[J];臨床耳鼻咽喉科雜志;2003年05期

7 盧德成,羅佐杰;肥胖與胰島素抵抗有關調控因素的研究進展[J];臨床薈萃;2003年16期

8 周昭明;小劑量胰島素治療糖尿病酮癥酸中毒68例觀察[J];國際醫(yī)藥衛(wèi)生導報;2003年12期

9 王繼旺;吸煙與胰島素抵抗[J];國外醫(yī)學(內分泌學分冊);2003年04期

10 楊瑞平 ,甘曉健;老年2型糖尿病患者血清瘦素與胰島素及胰島素抵抗關系的探討[J];廣西醫(yī)學;2003年11期

相關會議論文 前10條

1 李晨鐘;張素華;舒昌達;任偉;;氯喹對胰島素抵抗大鼠胰島素降解酶基因及酶蛋白表達的影響[A];中華醫(yī)學會第六次全國內分泌學術會議論文匯編[C];2001年

2 劉鐵迎;高鑫;江孫蘇;孫璇;周庭川;姚君厘;余丹青;雪怡;;肥胖患者胰島素抵抗和血漿vWF水平的變化[A];中華醫(yī)學會第六次全國內分泌學術會議論文匯編[C];2001年

3 都健;劉國良;;胰島素抵抗大鼠內皮依賴性血管舒張功能及其發(fā)生機制的研究[A];中華醫(yī)學會第六次全國內分泌學術會議論文匯編[C];2001年

4 曲波;;中醫(yī)藥防治胰島素抵抗的研究進展[A];第七次中國中西醫(yī)結合糖尿病學術會議論文匯編[C];2004年

5 李光偉;;胰島素抵抗評估[A];第八次全國婦產科學學術會議論文匯編[C];2004年

6 郭正宇;尹衛(wèi)東;宋硯明;鄧小健;;褪黑素改善胰島素抵抗大鼠海馬胰島素信號通路障礙[A];湖南省生理科學會2008年度學術年會論文摘要匯編[C];2008年

7 張榮;單慧敏;趙三妹;許榮q;;高脂飼料誘導的大鼠胰島素抵抗及與血清瘦素的關系[A];加入WTO和中國科技與可持續(xù)發(fā)展——挑戰(zhàn)與機遇、責任和對策（下冊）[C];2002年

8 柴國祿;譚麗艷;楊玉紅;劉晶礫;李麗疆;;糖尿病合并高血壓患者胰島素抵抗與血漿血管緊張素Ⅱ及內皮素的關系[A];中華醫(yī)學會第六次全國內分泌學術會議論文匯編[C];2001年

9 陳瑩;高彥彬;;中醫(yī)藥對胰島素抵抗及胰島素抵抗綜合征的研究進展[A];第七次全國中醫(yī)糖尿病學術大會論文匯編[C];2003年

10 孫琳;班博;于世鵬;孫冰;趙秀貞;;胰島素抵抗、血脂與老年2型糖尿病合并高血壓的關系[A];第三屆全國老年醫(yī)學進展學術會議論文集[C];2003年

相關重要報紙文章 前10條

1 孟懷東;“致命四重奏”與胰島素抵抗[N];中國醫(yī)藥報;2007年

2 ;應正確認識胰島素[N];醫(yī)藥養(yǎng)生保健報;2006年

3 ;哪些人不宜過早應用胰島素[N];醫(yī)藥導報;2008年

4 劉燕玲;中醫(yī)藥防治胰島素抵抗[N];健康報;2002年

5 本報記者趙晴晴;胰島素治療后為何發(fā)胖？[N];健康時報;2003年

6 本報特約記者 徐夕;“口服植物胰島素”并不存在[N];衛(wèi)生與生活報;2005年

7 河南省鄭州市第三人民醫(yī)院內分泌科副主任醫(yī)師 劉龍誕邋陳錦屏 整理;胰島素抵抗試試增敏劑[N];健康報;2007年

8 董飛俠;解開胰島素抵抗密碼[N];醫(yī)藥經濟報;2006年

9 北京協(xié)和醫(yī)院主任醫(yī)生 姚我清;胰島素抵抗的藥物治療[N];醫(yī)藥養(yǎng)生保健報;2006年

10 指導專家 全軍糖尿病診治中心、306醫(yī)院內分泌科副主任 劉彥君 博士;現在開始，讓您的胰島素活起來！[N];醫(yī)藥導報;2007年

相關博士學位論文 前10條

1 王曉凌;高脂飲食大鼠的胰島素抵抗及肝脂肪酸的代謝[D];河北醫(yī)科大學;2008年

2 吳勉云;高脂誘導胰島素抵抗機理及花生四烯酸對胰島素抵抗預防作用研究[D];華中科技大學;2007年

3 萬學東;褪黑素對體內體外高脂誘導胰島素抵抗的預防作用及機制研究[D];華中科技大學;2009年

4 易瑋;針刺對胰島素抵抗干預作用的研究[D];廣州中醫(yī)藥大學;2002年

5 邵偉娟;胰島素對小鼠早期胚胎發(fā)育的程序化影響及相關分子機理的研究[D];南京農業(yè)大學;2007年

6 劉蓉;胰島素油溶液的制備及性質研究[D];中南大學;2008年

7 張治國;乙酸調節(jié)脂代謝及乙酸、醋粉預防胰島素抵抗研究[D];浙江大學;2008年

8 關宇光;不同運動時間對胰島素抵抗大鼠尾加壓素Ⅱ及其受體影響的研究[D];北京體育大學;2007年

9 張靜;游離脂肪酸致胰島素抵抗的作用機制[D];中國醫(yī)科大學;2004年

10 完強;乙醇對大鼠骨骼肌胰島素敏感性的影響及機制探討[D];山東大學;2005年

相關碩士學位論文 前10條

1 于婷;胰島素抵抗大鼠硫化氫/胱硫醚γ—裂解酶體系的實驗觀察[D];山東大學;2007年

2 甘宇;2型糖尿病患者血清真胰島素水平與血脂的關系研究[D];中國醫(yī)科大學;2003年

3 楊衛(wèi)紅;高糖和胰島素對鼠骨髓間充質干細胞增殖的影響及其機制研究[D];華中科技大學;2007年

4 李小寧;骨骼肌組織磷脂酰肌醇3激酶表達與妊娠期糖尿病胰島素抵抗關系研究[D];青島大學;2008年

5 侯連國;胰島素抵抗與2型糖尿病大鼠心肌脂肪酸代謝相關基因轉錄水平的改變[D];河北醫(yī)科大學;2009年

6 鄧娟;圍術期胰島素抵抗相關影響因素的分析[D];中南大學;2009年

7 李海東;蛋白質酪氨酸硝化對胰島素磷酸化信號的影響[D];華中科技大學;2008年

8 張紅玉;哈薩克族肥胖、胰島素抵抗與糖調節(jié)異常的關系[D];新疆醫(yī)科大學;2009年

9 劉慧琳;胰島素抵抗與絕經后骨質疏松癥的關系初探[D];四川大學;2005年

10 張俊防;真胰島素、胰島素原與2型糖尿病大血管病[D];河北醫(yī)科大學;2002年

本文編號：1996331