發(fā)布時間：2018-04-14 20:01

  本文選題：透明質(zhì)酸寡糖 + 糖尿病傷口愈合��； 參考：《錦州醫(yī)科大學》2017年碩士論文

【摘要】：目的1、探討透明質(zhì)酸寡糖對人臍靜脈內(nèi)皮細胞增殖、遷移及血管形成的影響。2、研究透明質(zhì)酸寡糖對糖尿病大鼠傷口愈合面積、傷口周圍血流供應情況及血管新生的作用。3、探討透明質(zhì)酸寡糖對糖尿病大鼠傷口愈合的機制。方法建立實驗性糖尿病體內(nèi)與體外模型,研究透明質(zhì)酸寡糖(Hyaluronic acid oligosaccharide,o-HA)對在體糖尿病大鼠傷口愈合的作用。葡萄糖(33 mmol/L)誘導人臍靜脈內(nèi)皮細胞(Human Umbilical Vein Endothelial Cells,HUVEC)模擬糖尿病體外模型,通過MTT、劃痕及小管形成實驗,檢測o-HA在10μg/m L濃度條件下對高糖環(huán)境下的HUVEC增殖、遷移及小管形成的影響。采用乳化法制備o-HA軟膏并將其應用于糖尿病大鼠傷口模型上,行拍照、記錄、觀察傷口創(chuàng)面大小及炎癥情況;HE染色檢測上皮化程度、肉芽組織和成纖維細胞再生情況;激光多普勒血流儀觀察傷口周圍血流供應情況;CD31免疫組化染色檢測傷口血管新生情況,并通過檢測傷口組織中p-Src、p-ERK和TGF-beta1蛋白的表達情況,進一步研究o-HA通過促進內(nèi)皮細胞增殖、遷移和血管新生等活動促進糖尿病大鼠傷口愈合。結(jié)果1、MTT實驗結(jié)果顯示:o-HA組細胞增殖數(shù)量較PBS組增多(P0.05);遷移實驗結(jié)果顯示:o-HA組劃痕縮小面積較PBS組明顯增多(P0.01),其劃痕面積縮小率約為58%;小管形成實驗結(jié)果顯示:o-HA組管腔形成數(shù)量較PBS組增多,且具有統(tǒng)計學差異(P0.05)。2、成功制備透明質(zhì)酸寡糖軟膏并將其局部應用于糖尿病大鼠傷口模型上。3、HE染色和拍照記錄觀察結(jié)果分別從組織學和形態(tài)學兩個角度表明給予透明質(zhì)酸寡糖軟膏組大鼠的傷口愈合情況明顯較基質(zhì)組傷口愈合的快且面積小。7 d時,兩組傷口愈合面積就有明顯的差異(P0.05);成纖維細胞、肉芽組織再生和上皮化程度較基質(zhì)組明顯增多,差異具有統(tǒng)計學差異(P0.01)。激光多普勒血流圖和CD31免疫組化染色結(jié)果顯示o-HA軟膏處理的大鼠傷口周圍血流供應增多,血管新生,較基質(zhì)組之間具有統(tǒng)計學差異(P0.05)。4、Western Blot提示o-HA軟膏組p-Src、p-ERK和TGF-beta1蛋白的表達明顯高于基質(zhì)組(P0.01)。結(jié)論1、o-HA促進高糖環(huán)境下的HUVEC增殖、遷移和小管形成。2、局部應用o-HA軟膏通過增加內(nèi)皮細胞增值、遷移,血管新生,成纖維細胞、肉芽組織再生促進糖尿病大鼠傷口愈合。
[Abstract]:Objective to investigate the 1 oligosaccharides of hyaluronic acid on human umbilical vein endothelial cell proliferation, migration and angiogenesis of.2 effect, the research area of oligosaccharides of hyaluronic acid on wound healing in diabetic rats, the role of.3 around the wound blood supply and angiogenesis, to explore the mechanism of oligosaccharides of hyaluronic acid on wound healing in diabetic rats. Experimental diabetes in vivo and in vitro model research of hyaluronan oligosaccharides (Hyaluronic acid oligosaccharide, o-HA) on the healing of wounds in the body of diabetic rats. Glucose (33 mmol/L) induced human umbilical vein endothelial cells (Human Umbilical Vein Endothelial Cells, HUVEC) simulation model in vitro by MTT, diabetes, scratch and tubule formation the detection of o-HA in 10 g/m L concentration under the conditions of high glucose environment HUVEC proliferation, migration and tubule formation. The effect of o-HA ointment and its preparation by emulsification method For diabetic wound of rat model, for taking pictures, recording, observation of wound size and inflammation; HE staining of epithelial cells and fibroblasts, granulation tissue regeneration; laser Doppler flowmetry observed around the wound blood supply; CD31 immunohistochemical staining was used to detect the wound angiogenesis, wound tissue were detected by p-Src in the expression of p-ERK and TGF-beta1 proteins, the further study of o-HA by promoting endothelial cell proliferation, migration and angiogenesis to promote wound healing in diabetic rats. The results of the 1 MTT, the experimental results show that: the proliferation of cell numbers in o-HA group than the PBS group increased (P0.05); migration experiments showed that: o-HA group reduced the area of scratches increased significantly than in group PBS (P0.01), the scratch area reduction ratio is about 58%; the tube formation assay showed that: o-HA group the number of tube formation was more than PBS group, and has statistics The difference (P0.05).2, the successful preparation of oligosaccharides of hyaluronic acid and its ointment topical application to the wound of diabetic rat model of.3, HE staining and photographed observation results respectively from two angles and histology showed that giving oligosaccharides of hyaluronic acid ointment group rat wound healing condition was significantly higher than plausible matrix group wound healing fast and small area of.7 D, the two group wound healing area have obvious difference (P0.05); fibroblast, granulation tissue regeneration and epithelization degree was significantly higher than the matrix group increased, the difference has statistics difference (P0.01). The laser Doppler imaging and CD31 immunohistochemical staining showed that the o-HA ointment the wound of rat peripheral blood flow increased supply, angiogenesis, a matrix between groups with statistical difference (P0.05).4, Western Blot o-HA p-Src p-ERK ointment group, and the expression of TGF-beta1 protein was obviously higher than that of matrix group (P0. 01) conclusion 1, o-HA promotes HUVEC proliferation, migration and tubule formation.2 in high glucose environment. Topical application of o-HA ointment can promote endothelial cell proliferation, migration, angiogenesis, fibroblast, granulation tissue regeneration, and promote wound healing in diabetic rats.

【學位授予單位】：錦州醫(yī)科大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2017
【分類號】：R965

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本文編號：1750803