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蛇毒金屬蛋白酶抑制劑重組蛋白抗腫瘤血管生成作用及其機制

發(fā)布時間:2018-03-26 00:03

  本文選題:蛇毒 切入點:基質金屬蛋白酶抑制劑 出處:《中國藥理學通報》2017年03期


【摘要】:目的研究蛇毒金屬蛋白酶抑制劑重組蛋白(recombinant snake venom metalloproteinase inhibitor,r SVMPI)對血管生成的影響及其分子機制。方法應用雞胚絨毛尿囊膜(chicken chorioallantoic membrane,CAM)血管生成模型觀察SVMPI重組蛋白對血管生成的影響;采用Alamar Blue分析方法檢測人臍靜脈內皮細胞(human umbilical veins endothelial cells,HUVECs)增殖能力、Annexin V-FITC雙標記流式細胞術檢測細胞凋亡、劃痕標記法檢測細胞體外遷移能力、Boyden小室分析方法檢測細胞體外趨化能力及管腔形成法檢測體外血管新生能力;通過real-time PCR及Western blot檢測重組蛋白處理后的HUVECs KDR、FGFR-1表達。結果r SVMPI減少雞胚尿囊膜新生血管密度指數,減弱由VEGF誘導的HUVECs趨化能力,抑制HUVECs體外新生小管的形成,降低HUVECs細胞KDR和FGFR-1的表達水平。結論r SVMPI可能通過阻斷VEGF-KDR或b FGF-FGFR信號轉導途徑,發(fā)揮抑制血管生成的作用。
[Abstract]:Objective to study the effect of recombinant snake venom metalloproteinase inhibitor (SVMPI) on angiogenesis and its molecular mechanism. Methods the angiogenesis model of chicken chorioallantoic membrane was used to observe the effect of SVMPI recombinant protein on angiogenesis. Alamar Blue assay was used to detect the proliferation of human umbilical veins endothelial cells (HUVECs) and Annexin V-FITC double labeling flow cytometry (FCM) was used to detect the apoptosis of human umbilical vein endothelial cells (HUVECs). In vitro migration ability was detected by scratch labeling method. Boyden chamber analysis method was used to detect the chemotaxis of cells in vitro and angiogenesis in vitro by lumen formation method. The expression of HUVECs KDRN FGFR-1 was detected by real-time PCR and Western blot. Results r SVMPI reduced the angiogenesis density index of chicken embryo allantoic membrane, decreased HUVECs chemotaxis induced by VEGF, and inhibited the formation of new tubules of HUVECs in vitro. Conclusion r SVMPI may inhibit angiogenesis by blocking VEGF-KDR or b FGF-FGFR signal transduction pathway.
【作者單位】: 福建醫(yī)科大學附屬第一醫(yī)院皮膚科;福建醫(yī)科大學分子醫(yī)學研究中心消化道惡性腫瘤教育部重點實驗室;福建省腫瘤醫(yī)院病理科;
【基金】:福建省衛(wèi)生系統(tǒng)中青年骨干人才培養(yǎng)項目(No 2014-ZQNJC-17)
【分類號】:R96

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