本文關(guān)鍵詞： -羥基喜樹堿 白藜蘆醇 酪氨酸酶 黑色素 小眼相關(guān)轉(zhuǎn)錄因子　出處：《生物技術(shù)通報(bào)》2017年08期 　論文類型：期刊論文

【摘要】：旨在研究10-羥基喜樹堿(10-hydroxycamptothecin,HCPT)和白藜蘆醇(Resveratrol,Res)對體外培養(yǎng)的小鼠惡性黑色素瘤B16F10細(xì)胞的增殖及黑色素合成抑制機(jī)理。利用MTT法、顯微觀察、L-Dopa氧化法、Na OH裂解法分析不同濃度HCPT和Res對細(xì)胞增殖、細(xì)胞形態(tài)、酪氨酸酶活性及黑色素合成含量的影響。熒光半定量PCR方法(Semi-RT-PCR)分析該化合物對黑色素合成關(guān)鍵因子酪氨酸酶(TYR)和小眼相關(guān)轉(zhuǎn)錄因子(MITF)基因表達(dá)的影響。結(jié)果表明HCPT(40、80、120、160和200μmol/L)和Res(80、120、160和200μmol/L)能夠通過誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡抑制B16F10細(xì)胞的增殖,同時(shí)對酪氨酸酶活性和細(xì)胞黑色素生成具有明顯抑制作用(P0.05),且呈現(xiàn)濃度依賴性。另外,不同濃度的HCPT以及高濃度Res(120和160μmol/L)能夠顯著下調(diào)B16F10細(xì)胞TYR和MITF基因的mRNA水平。HCPT和Res可能通過誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡抑制B16F10細(xì)胞的增殖,同時(shí)通過下調(diào)MITF基因轉(zhuǎn)錄,抑制TYR m RNA的表達(dá)及TYR酶活性,進(jìn)而抑制細(xì)胞黑色素的生成。
[Abstract]:The aim of this study was to study the inhibitory mechanism of 10-hydroxycamptothecin HCPTand resveratrol on the proliferation and melanin synthesis of murine malignant melanoma B16F10 cells cultured in vitro. The cell proliferation and morphology of different concentrations of HCPT and Res were analyzed by L-Dopa oxidation method. The effects of tyrosinase activity and melanin synthesis on the expression of tyrosinase tyrosinase tyrosinase and MITFs in melanin synthesis were analyzed by semi-quantitative PCR semi-quantitative PCR method. The results showed that the expression of tyrosinase tyrosinase and transcriptional factor MITFs were related to melanin synthesis. HCPTT (40, 80, 80, 120, 160 and 200 渭 mol / L) and Resch80 (120, 200 渭 mol / L) could inhibit the proliferation of B16F10 cells by inducing apoptosis. At the same time, the activity of tyrosinase and the formation of cytomelanin were significantly inhibited by P0.05, and in a concentration-dependent manner. Different concentrations of HCPT and high concentrations of Res(120 and 160 渭 mol / L could significantly down-regulate the mRNA level of TYR and MITF genes in B16F10 cells. HCPT and Res could inhibit the proliferation of B16F10 cells by inducing apoptosis, and down-regulate the transcription of MITF gene. It inhibited the expression of TYR m RNA and the activity of TYR, and then inhibited the production of cytomelanin.
【作者單位】： 仲愷農(nóng)業(yè)工程學(xué)院天然產(chǎn)物化學(xué)研究所;中國科學(xué)院南海海洋研究所;
【基金】：國家自然科學(xué)基金項(xiàng)目(21406274,21376281) 廣東省大學(xué)生創(chuàng)新訓(xùn)練項(xiàng)目(201411347034,201511347056)
【分類號】：R96

【參考文獻(xiàn)】

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【共引文獻(xiàn)】

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【二級參考文獻(xiàn)】

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本文編號：1506312