本文關(guān)鍵詞：伯氏疏螺旋體重組膜蛋白rBmpA對小鼠巨噬細胞和淋巴細胞體外作用研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：研究目的： 通過用伯氏疏螺旋體重組膜蛋白A(rBmpA)刺激體外培養(yǎng)細胞,包括昆明小鼠(KM)腹腔巨噬細胞、脾臟淋巴細胞及小鼠單核巨噬細胞株(RAW264.7),對其進行細胞增殖實驗(MTT),并且收集不同rBmpA濃度刺激后細胞培養(yǎng)上清液,檢測IL-1p,IL-6及IL-17細胞因子含量,來探討各種細胞在萊姆關(guān)節(jié)炎致病機制中的作用。 研究方法： 1、探索昆明小鼠脾臟淋巴細胞分離技術(shù),優(yōu)化提取及培養(yǎng)條件,使其順利獲得較多淋巴細胞。 2、探索昆明小鼠腹腔巨噬細胞分離技術(shù),優(yōu)化提取及培養(yǎng)條件,使其獲得更多腹腔巨噬細胞。 3、探索RAW264.7巨噬細胞株培養(yǎng)條件,培養(yǎng)方法。 4、對昆明小鼠脾臟淋巴細胞及RAW264.7巨噬細胞株進行MTT實驗。 5、ELISA檢測各細胞培養(yǎng)上清中炎性細胞因子IL-6、IL-17及IL-1β含量,探討不同細胞在萊姆關(guān)節(jié)炎致病機制中作用。 研究結(jié)果： 1、經(jīng)過探索,成功開展了昆明小鼠脾臟淋巴細胞和腹腔巨噬細胞分離及培養(yǎng)技術(shù)。 2、成功開展了RAW264.7巨噬細胞株培養(yǎng)技術(shù)。 3、對昆明小鼠脾臟淋巴細胞進行MTT實驗,與正常對照組相比,差別有統(tǒng)計學意義(P0.05)。 4、檢測昆明小鼠脾臟淋巴細胞培養(yǎng)上清液中炎性細胞因子IL-6和IL-17含量,與正常對照組比較,差別有統(tǒng)計學意義(P0.05)。 5、檢測昆明小鼠腹腔巨噬細胞培養(yǎng)上清液中炎性細胞因子IL-lp含量,與正常對照組比較,差別無統(tǒng)計學意義(P0.05),分析和探討了相關(guān)原因,為后期進一步研究奠定了基礎(chǔ)。 6、對RAW264.7巨噬細胞株進行細胞增殖實驗,與正常對照組相比,差別有統(tǒng)計學意義(P0.05)。 結(jié)論： 1、rBmpA在刺激脾臟淋巴細胞分泌炎性細胞因子IL-6和IL-17中起到關(guān)鍵作用。 2、rBmpA可引起脾臟淋巴細胞和RAW264.7巨噬細胞株增殖。 3、腹腔巨噬細胞IL-1β不受rBmpA影響。 4、rBmpA與萊姆關(guān)節(jié)炎密切相關(guān)。
【關(guān)鍵詞】：萊姆關(guān)節(jié)炎 伯氏疏螺旋體 rBmpA 巨噬細胞 淋巴細胞
【學位授予單位】：昆明醫(yī)科大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2013
【分類號】：R377
【目錄】：

• 中文摘要6-8
• Abstract8-10
• 相關(guān)縮略詞10-11
• 前言11-14
• 1 BmpA(Borrelia burgdorferi membrance protein A)11-12
• 2 BmpA與萊姆關(guān)節(jié)炎關(guān)系12
• 3 萊姆關(guān)節(jié)炎致病機制12-14
• 第一部分 rBmpA對小鼠脾臟淋巴細胞體外作用研究14-26
• 1 材料14-16
• 1.1 主要儀器14-15
• 1.2 主要試劑15
• 1.3 主要溶液試劑配制15-16
• 2 實驗方法16-18
• 2.1 rBmpA蛋白液制備16
• 2.2 實驗動物16
• 2.3 小鼠脾臟淋巴細胞的分離、培養(yǎng)及rBmpA作用研究16-18
• 2.4 統(tǒng)計學處理18
• 3 實驗結(jié)果18-22
• 3.1 小鼠脾臟淋巴細胞分離18
• 3.2 小鼠脾臟淋巴細胞培養(yǎng)18
• 3.3 小鼠脾臟淋巴細胞形態(tài)觀察18-19
• 3.4 小鼠脾臟淋巴細胞增殖活性檢測19-20
• 3.5 PHA小鼠脾臟淋巴細胞分泌細胞因子IL-6的測定20-21
• 3.6 PHA對小鼠脾臟淋巴細胞分泌細胞因子IL-17的測定21-22
• 4 討論22-24
• 5 結(jié)論24-26
• 第二部分：rBmpA對昆明小鼠腹腔巨噬細胞體外作用研究26-34
• 1 材料26-28
• 1.1 主要儀器26
• 1.2 主要試劑26-27
• 1.3 主要溶液試劑配制27-28
• 2 實驗方法28-29
• 2.1 rBmpA蛋白液制備28
• 2.2 實驗動物28-29
• 2.3 動物處理29
• 2.4 腹腔巨噬細胞收集及培養(yǎng)29
• 2.5 實驗分組29
• 2.6 rBmpA對小鼠腹腔巨噬細胞分泌細胞因子的影響29
• 2.7 統(tǒng)計學處理29
• 3 實驗結(jié)果29-31
• 3.1 細胞形態(tài)學觀察30
• 3.2 rBmpA對小鼠腹腔巨噬細胞分泌細胞因子IL-1β的測定30-31
• 4 討論31-32
• 5 結(jié)論32-34
• 第三部分 rBmpA對小鼠單核巨噬細胞株RAW264.7增殖作用研究34-41
• 1 材料34-36
• 1.1 主要儀器34
• 1.2 主要試劑34-35
• 1.3 主要溶液試劑配制35-36
• 2 實驗方法36-37
• 2.1 rBmpA蛋白液制備36
• 2.2 巨噬細胞株RAW264.7培養(yǎng)36-37
• 2.3 統(tǒng)計學處理37
• 3 實驗結(jié)果37-39
• 3.1 細胞培養(yǎng)形態(tài)觀察37
• 3.2 細胞增殖活性檢測37-39
• 4 討論39-40
• 5 結(jié)論40-41
• 參考文獻41-45
• 綜述45-66
• 參考文獻58-66
• 攻讀學位期間發(fā)表的論文66-67
• 致謝67

【參考文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前2條

1 耿震;萬康林;;萊姆病流行病學研究新進展[J];中國自然醫(yī)學雜志;2007年02期

2 白生賓;陳紅香;鐘近潔;馮樹梅;李甜;羅學港;;MTT法檢測RAW264.7細胞活力及可能因素分析[J];中國現(xiàn)代醫(yī)學雜志;2011年23期

  本文關(guān)鍵詞：伯氏疏螺旋體重組膜蛋白rBmpA對小鼠巨噬細胞和淋巴細胞體外作用研究，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

本文編號：410327