支原體污染經(jīng)p38 MAPK途徑降低人類(lèi)細(xì)胞株28S和18S RNC-rRNA
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【摘要】:目的:研究支原體感染對(duì)人類(lèi)細(xì)胞株的核糖體新生肽鏈復(fù)合體(RNC)中rRNA組成的影響及其相關(guān)機(jī)制。方法:分別提取支原體陽(yáng)性與陰性RNC-RNA進(jìn)行瓊脂糖凝膠電泳,分析RNC-rRNA組成改變情況;在支原體污染環(huán)境中培養(yǎng)人正常肺上皮(HBE)細(xì)胞,比較培養(yǎng)前后RNC-rRNA的變化;對(duì)RNC-RNA條帶異常細(xì)胞進(jìn)行抗支原體治療,比較治療前后RNC-rRNA的變化。利用免疫印跡分析支原體污染對(duì)絲裂原活化蛋白激酶(mitogen-activated protein kinase,MAPK)途徑的影響。結(jié)果:不同組織來(lái)源的多株細(xì)胞中,支原體陰性和陽(yáng)性細(xì)胞RNCRNA的瓊脂糖電泳顯示細(xì)胞中RNC-rRNA組成發(fā)生異常改變,主要體現(xiàn)為28S和18S真核rRNA的降低,以及16S和未知原核rRNA的增加。在污染環(huán)境中培養(yǎng)HBE細(xì)胞,其RNC-rRNA組成可由支原體陰性轉(zhuǎn)變?yōu)殛?yáng)性譜型。以環(huán)丙沙星抗支原體治療可逆轉(zhuǎn)上述RNC-rRNA譜型的改變。總蛋白和磷酸化蛋白的免疫印記結(jié)果表明,支原體污染顯著抑制A549細(xì)胞的p38 MAPK途徑的活化,而對(duì)該細(xì)胞的ERK1/2途徑無(wú)顯著改變。結(jié)論:支原體感染可通過(guò)抑制p38 MAPK活化嚴(yán)重改變?nèi)祟?lèi)細(xì)胞株中RNC-rRNA的組成,從而影響宿主細(xì)胞的翻譯行為。
【作者單位】: 功能蛋白質(zhì)研究廣東普通高校重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室 暨南大學(xué)生命與健康工程研究院;暨南大學(xué)第一附屬醫(yī)院;
【關(guān)鍵詞】: RNC-rRNA 支原體 人細(xì)胞系
【基金】:國(guó)家自然科學(xué)基金資助項(xiàng)目(No.81372135) 廣東省自然科學(xué)基金資助項(xiàng)目(No.2014A030313369)
【分類(lèi)號(hào)】:R375
【正文快照】: 細(xì)胞體外培養(yǎng)模型是病理生理研究中不可或缺的工具,然而,實(shí)驗(yàn)室支原體污染在世界范圍內(nèi)廣泛流行,其在體外組織培養(yǎng)的污染率高達(dá)5%~35%[1-2]。支原體是已知最小的原核生物,直徑多為0.1~0.3μm,能夠通過(guò)除菌濾膜(0.22μm),其唯一可見(jiàn)的細(xì)胞器是核糖體。受非致病性支原體污染的細(xì)
【參考文獻(xiàn)】
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【二級(jí)參考文獻(xiàn)】
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本文編號(hào):410288
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