為了制備3D打印犬組織工程半月板支架并評價其性能,探索體外成軟骨誘導時間對犬骨髓間充質(zhì)干細胞(BMSCs)-支架復合物生長分化的影響,本試驗使用3D打印技術制備聚己內(nèi)酯(PCL)半月板支架,肉眼和掃描電鏡觀察支架形態(tài)及微觀結(jié)構(gòu),生物力學試驗測定支架壓縮模量,使用CCK-8細胞毒性試驗評價支架與細胞的相容性,并接種犬BMSCs在體外分別進行成軟骨誘導7、14、21、28 d,通過倒置相差顯微鏡觀察細胞在支架上的生長情況,通過測定不同誘導時間糖胺聚糖(GAG)含量和Ⅱ型膠原的表達量,分析和比較不同體外誘導時間對其基質(zhì)合成的影響。結(jié)果顯示,3D打印制備出的PCL支架對天然半月板解剖形狀的還原度較高,孔隙均勻且孔間連通性好,有一定的力學抗壓性能和緩慢的降解速度,接種其上的細胞數(shù)量呈遞增趨勢;在BMSCs-支架復合物的體外誘導過程中,細胞不斷增殖,GAG和Ⅱ型膠原合成量都隨誘導時間的延長而增加,誘導21 d時的合成量顯著高于其他誘導時間的合成量(P<0.05)。結(jié)果說明,3D打印制備的PCL半月板支架具有良好的理化性能和細胞相容性,有望作為半月板組織工程支架,且體外誘導時間對BMSCs-支...

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圖２ＣＣＫ－８檢測ＰＣＬ半月板支架細胞相容性Ｆｉｇ．２ＴｈｅｃｅｌｌｃｏｍｐａｔｉｂｉｌｉｔｙｏｆｔｈｅＰＣＬｍｅｎｉｓｃｕｓｓｃａｆｆｏｌｄｓｂｙＣＣＫ－８

細胞，其增殖的ＯＤ值分別為０．２５１±０．０２１、０．４４５±０．０４８、０．６１６±０．０３２。說明隨時間延長，接種于ＰＣＬ支架上的細胞數(shù)量呈遞增趨勢，提示支架無細胞毒性，與細胞有較好的相容性。２．４ＢＭＳＣｓ－支架復合物形態(tài)學觀察通過倒置相差顯微鏡可以觀察到（圖３），在細胞接....

圖４不同誘導時間ＢＭＳＣｓ－支架復合物的ＧＡＧ／ＤＮＡ比值Ｆｉｇ．４ＧＡＧ／ＤＮＡｒａｔｉｏｏｆＢＭＳＣｓ－ｓｃａｆｆｏｌｄｃｏｎｓｔｒｕｃｔｉｏｎａｔｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉｎｄｕｃｔｉｏｎｔｉｍｅ

７期趙雯等：犬ＢＭＳＣｓ復合３Ｄ打印支架制備組織工程半月板及體外成軟骨誘導時間對其分化的影響圖４不同誘導時間ＢＭＳＣｓ－支架復合物的ＧＡＧ／ＤＮＡ比值Ｆｉｇ．４ＧＡＧ／ＤＮＡｒａｔｉｏｏｆＢＭＳＣｓ－ｓｃａｆｆｏｌｄｃｏｎｓｔｒｕｃｔｉｏｎａｔｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉｎｄｕｃｔｉｏｎ....

本文編號：3983809