目的：中樞神經(jīng)系統(tǒng)再生困難是由于神經(jīng)再生的不利環(huán)境因素,以及通常認(rèn)為神經(jīng)細(xì)胞不能進(jìn)行再分裂和增殖的終末分化細(xì)胞。神經(jīng)干細(xì)胞可以自我更新及復(fù)制分裂,被認(rèn)為能夠替換與治療多種神經(jīng)系統(tǒng)疾病,它們的一系列潛在價(jià)值在最近才被發(fā)現(xiàn),神經(jīng)干細(xì)胞具有高度的遷移性并能夠被吸引并移至病變大腦側(cè)如缺血或腫瘤的病變部位,從而它成為非常有治療前景的工具。 本研究擬采用逆轉(zhuǎn)錄病毒將攜帶Cre-LoxP系統(tǒng)的SV40-T基因外源性導(dǎo)入胚胎小鼠神經(jīng)干細(xì)胞制備永生化胚胎神經(jīng)干/祖細(xì)胞系。使用神經(jīng)干/祖細(xì)胞特異性標(biāo)記物鑒定永生化神經(jīng)祖細(xì)胞的干/祖細(xì)胞表型,及具有多向分化潛能的可能性。另外,實(shí)驗(yàn)擬證明使用Cre重組酶敲除SV40-T基因可逆轉(zhuǎn)永生化神經(jīng)干細(xì)胞增殖特性,使其成為原代細(xì)胞從而具有向不同神經(jīng)細(xì)胞分化的能力。同時運(yùn)用在體研究證實(shí)永生化的神經(jīng)干細(xì)胞有別于腫瘤細(xì)胞,不具有侵襲性。進(jìn)一步證實(shí)其具有廣泛的臨床及科研利用價(jià)值,為中樞神經(jīng)系統(tǒng)再生和功能恢復(fù)提供了新的手段。 方法：第一部分：孕12.5天和14天CD1小鼠各1只,從孕鼠子宮中取出12.5天及14天胚胎。解剖顯微鏡下分離胎鼠端腦組織,胰酶消化為單細(xì)胞懸液,采用神經(jīng)球...

【文章頁數(shù)】：90 頁

【學(xué)位級別】：博士

【文章目錄】：
目錄
英漢縮略語名詞對照
摘要
ABSTRACT
前言
第一部分：小鼠胚胎大腦神經(jīng)干細(xì)胞的分離培養(yǎng)及永生化神經(jīng)祖細(xì)胞的建立
    1 材料與方法
    2 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
    3 討論
第二部分：永生化胚鼠神經(jīng)祖細(xì)胞的鑒定與分化
    1 材料與方法
    2 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
    3 討論
全文小結(jié)
參考文獻(xiàn)
文獻(xiàn)綜述
    參考文獻(xiàn)
致謝
博士期間發(fā)表論文



本文編號：3877457