本文關鍵詞：寧夏地區(qū)大腸桿菌臨床分離株的耐藥性研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：為了研究寧夏地區(qū)大腸桿菌臨床分離株的耐藥性,本研究對182株大腸桿菌臨床分離株采用PCR方法進行了耐藥基因的的分子檢測；采用紙片擴散法進行了耐藥表型的分析；并分析了182株菌株的致病性以及致病性與耐藥性的關系、血清型與耐藥性的相關性。實驗結果如下： 1.根據(jù)Genbank報道的參考序列設計磺胺類藥物耐藥基因：sull、sul2.Sull3:四環(huán)素類藥物耐藥基因：tetA、tetB、tetC、tetD、tetE、tetG;氨基糖苷類藥物耐藥基因：aadB、 aadD、aadA1、aadA2.aacC2.aacC4.aac(3)-Ia、aac(3)-Ⅱa、aph(3)-Ⅱa；氯霉素類藥物耐藥基因：CatI、CmlA、Flor;β-內(nèi)酰胺類藥物耐藥基因：CTX-M、SHY、OXA、TEM,共25種耐藥基因的PCR特異性引物,建立了耐藥基因的PCR檢測方法,結果表明,耐藥基因的陽性株分別擴增出了預期大小的片段,而陰性菌株和空白對照沒有擴增出預期大小的片段,且目的條帶清晰、特異,說明本實驗所建立的PCR檢測方法特異、靈敏,可作為大腸桿菌臨床分離株耐藥基因的檢測方法。 2.采用已建立的PCR方法,對以上25種耐藥基因進行了分子檢測。結果表明,共檢測到了17種耐藥基因,分別為sull(62.6%)、Sul2(46.7%)、Sul3(1.6%)、tetA(40.1%)、tetB (33.5%)、aadA1(8.2%)、aadA2(8.2%)、aacC2(47.8%)、aacC4(17.0%).aac(3)-Ⅱa (45.1%)、aph(3)-Ⅱa(6.6%).Cat1(16.5%).CmlA(7.1%).Flor(4.9%).CTX-M(20.3%). OXA(12.6%).TEM(54.4%).未檢測到tetC、tetD、tetE、tetG、aadB、aadD、aac(3)-Ⅰa、 SHV8種耐藥基因。 3.采用CLSI推薦的K-B紙片擴散法對182株大腸桿菌臨床分離株進行了五類12種抗菌藥物的藥敏試驗。結果表明,182株菌株對12種抗菌藥物表現(xiàn)出不同程度的耐藥,耐藥率分別為氨芐西林(86.3%)、阿莫西林(85.7%)、四環(huán)素(74.7%)、復方新諾明(63.7%)、慶大霉素(52.7%)、頭孢噻肟(38.5%)、妥布霉素(29.1%)、卡那霉素(25.3%)、強力霉素(19.2%)、氯霉素(18.7%)、阿米卡星(8.8%)、頭孢他啶(8.2%)。182株大腸桿菌臨床分離株共有86種耐藥譜,且以多重耐藥為主,最少的為1耐,最多的可達12耐,5耐菌株數(shù)量最多。 4.通過致病性試驗分析,182株大腸桿菌臨床分離株中有145株致病性大腸桿菌。在145株致病性菌株中,135株菌株檢測出有耐藥性,致病性大腸桿菌的耐藥率為93.1%。在12種抗菌藥物中,致病性大腸桿菌對氨芐西林的耐藥率最高為87.6%。 5.在本實驗室前期對182株大腸桿菌進行血清型鑒定的基礎上,本研究對寧夏地區(qū)大腸桿菌血清型和耐藥性進行了相關性分析,結果表明在01和05型菌株中,69%以上菌株耐氨芐西林、阿莫西林、四環(huán)素和復方新諾明；018、0101和0111型菌株中,60%以上耐復方新諾明、氨芐西林、阿莫西林、四環(huán)素和慶大霉素；02型菌株中,80%以上耐四環(huán)素、氨芐西林和阿莫西林；078型菌株中,54%以上耐氨芐西林、阿莫西林、四環(huán)素、復方新諾明和頭孢噻肟。
【關鍵詞】：大腸桿菌 耐藥性 耐藥基因 耐藥表型 分子流行病學
【學位授予單位】：寧夏大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2013
【分類號】：R378
【目錄】：

• 摘要4-5
• Abstract5-8
• 第一章 文獻綜述8-16
• 1.1 大腸桿菌病的研究進展8-9
• 1.2 大腸桿菌耐藥性的研究進展9-12
• 1.3 大腸桿菌的耐藥機理12-13
• 1.4 大腸桿菌血清型與致病性13-14
• 1.5 大腸桿菌致病性與耐藥性的關系14
• 1.6 大腸桿菌血清型與耐藥性的關系14-16
• 第二章 大腸桿菌臨床分離株的致病性分析16-18
• 2.1 材料16
• 2.2 方法16-17
• 2.3 結果與分析17
• 2.4 結論與討論17-18
• 第三章 大腸桿菌臨床分離株主要耐藥基因PCR檢測方法的建立18-28
• 3.1 材料18-21
• 3.2 方法21-24
• 3.3 結果與分析24-27
• 3.4 結論與討論27-28
• 第四章 大腸桿菌臨床分離株耐藥基因的分子檢測28-35
• 4.1 材料28-29
• 4.2 方法29-30
• 4.3 結果與分析30-32
• 4.4 結論與討論32-35
• 第五章 大腸桿菌臨床分離株的耐藥表型分析35-46
• 5.1 材料35
• 5.2 方法35-37
• 5.3 結果與分析37-44
• 5.4 結論與討論44-46
• 第六章 結論46-47
• 參考文獻47-52
• 致謝52-53
• 附錄53-54
• 作者簡介54

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本文編號：360204