目的 建立定量黑猩猩腺病毒68型（chimpanzee adenovirus type 68,AdC68）含量的雙抗體夾心ELISA,并驗(yàn)證其可行性。方法 用表達(dá)綠色熒光蛋白（green fluorescence protein,GFP）的非復(fù)制型AdC68（AdC68GFP）感染HEK293細(xì)胞,收獲病變細(xì)胞并進(jìn)行超速離心純化AdC68GFP。用純化AdC68GFP免疫家兔制備抗AdC68GFP抗體。以抗AdC68GFP抗體為包被抗體,辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記的抗腺病毒HEXON IgG為酶標(biāo)抗體,建立雙抗體夾心ELISA,確定該法的線性范圍,并驗(yàn)證該法的準(zhǔn)確度、精密度、專屬性和適用性。結(jié)果 純化AdC68GFP的蛋白濃度為38.8 μg/ml,其中HEK293細(xì)胞蛋白濃度低于0.3 μg/ml。雙抗體夾心ELISA的最適包被抗體和酶標(biāo)抗體濃度分別為1∶50和1∶500。該法的線性范圍為0.06～3.88 μg/ml,線性相關(guān)系數(shù)為0.999 6。高、低濃度AdC68GFP樣品的回收率分別為93.17%和94.33%,變異系數(shù)分別為6.72%和3.44%。該法可特異性檢測(cè)AdC68GFP抗... 

【文章來(lái)源】：國(guó)際生物制品學(xué)雜志. 2019,42(01)

【文章頁(yè)數(shù)】：5 頁(yè)


本文編號(hào)：3552055