本文關(guān)鍵詞：小鼠小腦皮質(zhì)發(fā)育過(guò)程中細(xì)胞遷移與血管之間的相互作用，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：傳統(tǒng)理論認(rèn)為未成熟的神經(jīng)元主要是沿著放射狀膠質(zhì)細(xì)胞遷移至最終目的地。放射狀膠質(zhì)細(xì)胞是脊椎動(dòng)物中樞神經(jīng)系統(tǒng)發(fā)育過(guò)程中普遍存在的一種細(xì)胞，該細(xì)胞又稱(chēng)伯格曼膠質(zhì)細(xì)胞（Bergmann glia cell），為神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞的一種，是胚胎時(shí)期的一類(lèi)干細(xì)胞，在小腦皮質(zhì)發(fā)育過(guò)程中，可以發(fā)育分化為星形膠質(zhì)細(xì)胞和顆粒細(xì)胞。因此，放射狀膠質(zhì)細(xì)胞在中樞神經(jīng)系統(tǒng)中占據(jù)重要的角色，不僅可以引導(dǎo)神經(jīng)細(xì)胞從室區(qū)向有絲分裂后區(qū)域遷移，同時(shí)又為新生神經(jīng)細(xì)胞的遷移提供路徑和支架。但是最近越來(lái)越多的研究證明，中樞神經(jīng)系統(tǒng)內(nèi)的血管也參與了神經(jīng)細(xì)胞的遷移。血管的主要功能是運(yùn)輸一些氣體、營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)、激素和循環(huán)細(xì)胞。神經(jīng)系統(tǒng)內(nèi)的血管有著廣泛的功能，比如胚胎早期的“血管龕室”可以為神經(jīng)發(fā)生，神經(jīng)細(xì)胞遷移以及軸突延伸等提供一個(gè)“微環(huán)境”。 目前，國(guó)內(nèi)外對(duì)小腦皮質(zhì)的發(fā)育主要集中于細(xì)胞形態(tài)和神經(jīng)遞質(zhì)方面，但是關(guān)于小腦皮質(zhì)發(fā)育過(guò)程中，血管與細(xì)胞遷移之間的關(guān)系了解并不十分清楚。另外，有研究表明，小鼠神經(jīng)鞘磷脂合成酶2基因敲除（sphingomyelin synthase2knockout, SMS2-/-）會(huì)造成體內(nèi)神經(jīng)酰胺的堆積，神經(jīng)酰胺的堆積是否會(huì)影響小腦外顆粒層細(xì)胞的增殖，目前缺乏全面的報(bào)道。所以本研究將進(jìn)一步為我們闡明中樞神經(jīng)系統(tǒng)的發(fā)育及發(fā)育相關(guān)的疾病提供重要的理論依據(jù)，同時(shí)也有助于臨床上一些視網(wǎng)膜神經(jīng)組織與血液疾病的治療。 目的觀(guān)察小鼠小腦皮質(zhì)片層化的組織發(fā)生過(guò)程和放射狀膠質(zhì)細(xì)胞的分化；探討血管和放射狀膠質(zhì)細(xì)胞以及細(xì)胞遷移之間的關(guān)系，同時(shí)分析神經(jīng)酰胺堆積對(duì)小腦外顆粒層神經(jīng)細(xì)胞增殖的影響。 方法本課題應(yīng)用免疫熒光，BrdU抗體檢測(cè)技術(shù)配合墨汁灌注等技術(shù)對(duì)胚胎和出生后小鼠小腦皮質(zhì)進(jìn)行形態(tài)學(xué)觀(guān)察，對(duì)C57BL6J野生小鼠和神經(jīng)鞘磷脂合成酶2基因敲除小鼠小腦皮質(zhì)外顆粒層BrdU陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)和小腦皮質(zhì)內(nèi)血管體密度進(jìn)行比較和測(cè)量。 結(jié)果①小腦片層化的形成：小鼠小腦的發(fā)育始于第四腦室側(cè)壁的菱唇，E10時(shí)，菱唇主要由神經(jīng)上皮組成，至出生當(dāng)日，小腦皮質(zhì)形成了外顆粒層、分子層、浦肯野細(xì)胞層和顆粒層。隨著年齡的增長(zhǎng)，發(fā)育至P3時(shí)，浦肯野細(xì)胞層排列紊亂，大約3-6層，此時(shí)，外顆粒層的細(xì)胞大量的遷移至內(nèi)顆粒層。P10時(shí)，外顆粒層的細(xì)胞已經(jīng)基本全部遷移至內(nèi)顆粒層。大約在P22左右，小腦片層化完成，形成了三層典型結(jié)構(gòu)：分子層、浦肯野細(xì)胞層和顆粒層。②細(xì)胞的遷移：大約在E15時(shí)，浦肯野細(xì)胞開(kāi)始遷移，P7時(shí)，完成了它的遷移，排列成整齊的一層；同時(shí)，外顆粒層的細(xì)胞在P0時(shí)開(kāi)始向內(nèi)顆粒層遷移，發(fā)育至P10時(shí)，遷移基本停止。③放射狀膠質(zhì)細(xì)胞的分化：E15時(shí)，小腦內(nèi)出現(xiàn)大量的放射狀膠質(zhì)細(xì)胞，，隨著小腦皮質(zhì)的發(fā)育，大約在P14時(shí)，放射狀膠質(zhì)細(xì)胞完全分化為星形膠質(zhì)細(xì)胞。④小腦內(nèi)血管和放射狀膠質(zhì)細(xì)胞及細(xì)胞遷移的關(guān)系：墨汁灌注的方法顯示P0-P90小腦內(nèi)血管體密度呈現(xiàn)逐漸上升的趨勢(shì)，由年齡和血管體密度相關(guān)性分析可知：相關(guān)系數(shù)為0.992, P 0.05，說(shuō)明小鼠年齡和血管密度呈高度相關(guān)。E15-P7，小腦內(nèi)血管和放射狀膠質(zhì)細(xì)胞的走行和分布始終保持一致，分子層排列比較整齊，但是在顆粒層和白質(zhì)內(nèi)，血管和放射狀膠質(zhì)細(xì)胞的走行和分布比較紊亂。另外，研究中還發(fā)現(xiàn)許多BrdU陽(yáng)性細(xì)胞緊貼著血管遷移。⑤W T和SMS2-/-仔鼠對(duì)比：BrdU抗體可以特異性標(biāo)記處于S期的增殖細(xì)胞，通過(guò)對(duì)WT和SMS2-/-仔鼠P0至P14時(shí)小鼠小腦皮質(zhì)內(nèi)BrdU陽(yáng)性細(xì)胞密度的統(tǒng)計(jì)，發(fā)現(xiàn)BrdU陽(yáng)性細(xì)胞密度無(wú)明顯變化，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，P0.05；另外，兩種小鼠在形態(tài)結(jié)構(gòu)，細(xì)胞遷移和血管發(fā)生方面均無(wú)顯著差異。 結(jié)論小鼠小腦片層化過(guò)程主要經(jīng)歷了細(xì)胞增殖，分化和遷移。在小腦片層化形成的過(guò)程中，細(xì)胞遷移起著非常關(guān)鍵的作用，血管在小腦皮質(zhì)內(nèi)不僅和放射狀膠質(zhì)細(xì)胞相互作用，引導(dǎo)神經(jīng)細(xì)胞的遷移，并且為神經(jīng)細(xì)胞的遷移提供路徑和支架；神經(jīng)酰胺的堆積對(duì)小鼠小腦神經(jīng)細(xì)胞的增殖無(wú)影響。
【關(guān)鍵詞】：小腦片層化 血管 細(xì)胞遷移 放射狀膠質(zhì)細(xì)胞
【學(xué)位授予單位】：河南大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2013
【分類(lèi)號(hào)】：R338
【目錄】：

• 摘要4-6
• ABSTRACT6-11
• 引言11-13
• 1 材料、儀器與方法13-23
• 1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物13
• 1.2 實(shí)驗(yàn)材料13-14
• 1.2.1 免疫組織化學(xué)試劑13-14
• 1.2.2 HE 染色所用試劑14
• 1.2.3 Nissl 染色所用試劑14
• 1.3 實(shí)驗(yàn)試劑及配方14-16
• 1.4 主要儀器16-17
• 1.5 切片的制作17-18
• 1.5.1 石蠟切片17
• 1.5.2 震蕩切片17-18
• 1.6 HE 染色18
• 1.6.1 HE 染色原理18
• 1.6.2 HE 染色的步驟18
• 1.7 Nissl 染色18-19
• 1.7.1 Nissl 染色原理18-19
• 1.7.2 Nissl 染色的步驟19
• 1.8 免疫組織化學(xué)熒光染色19-20
• 1.8.1 免疫組織化學(xué)熒光染色原理19
• 1.8.2 免疫組織化學(xué)熒光染色步驟19-20
• 1.9 BrdU 標(biāo)記增殖細(xì)胞技術(shù)20
• 1.10 墨汁灌注法20-21
• 1.11 BrdU 陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)和血管體密度的統(tǒng)計(jì)學(xué)處理21-23
• 2 實(shí)驗(yàn)結(jié)果23-29
• 2.1 小腦皮質(zhì)片層化的形成23
• 2.2 小腦內(nèi)神經(jīng)細(xì)胞的遷移23-24
• 2.3 放射狀膠質(zhì)細(xì)胞的分化和組化特性24-25
• 2.4 小腦內(nèi)血管和放射狀膠質(zhì)細(xì)胞及細(xì)胞遷移之間的關(guān)系25-26
• 2.5 SMS2 基因?qū)π∧X外顆粒層增殖細(xì)胞的調(diào)控26-29
• 3 討論29-33
• 3.1 小腦皮質(zhì)的發(fā)育及放射狀膠質(zhì)細(xì)胞的分化29
• 3.2 血管與放射狀膠質(zhì)細(xì)胞之間的相互誘導(dǎo)29-30
• 3.3 血管可以作為支架引導(dǎo)細(xì)胞遷移30-31
• 3.4 神經(jīng)酰胺不參與調(diào)節(jié)小鼠小腦外顆粒層神經(jīng)細(xì)胞的增殖31-33
• 結(jié)論33-35
• 參考文獻(xiàn)35-39
• 附圖39-42
• 圖版說(shuō)明42-46
• 文獻(xiàn)綜述46-58
• 參考文獻(xiàn)54-58
• 附錄58-60
• 附錄 A 縮略語(yǔ)表58-59
• 附錄 B 攻讀碩士期間發(fā)表論文59-60
• 致謝60-61

【參考文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前5條

1 鄧錦波;徐曉波;范文娟;;小腦發(fā)育及其基因調(diào)節(jié)[J];解剖科學(xué)進(jìn)展;2010年02期

2 程相樹(shù);蔣杞英;胡艷秋;牛艷麗;李明善;于東明;鄧錦波;;小鼠小腦皮質(zhì)的組織發(fā)生[J];解剖學(xué)雜志;2007年05期

3 劉孝華;喬建坤;熊?chē)?guó)平;汪琳;;血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子及其受體mRNA在輸卵管妊娠蛻膜組織的表達(dá)[J];解剖學(xué)雜志;2008年03期

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5 鄧同興;王志新;高曉群;石淵淵;馬戰(zhàn)友;金海嘯;鄧錦波;;酒精誘導(dǎo)小鼠海馬齒狀回神經(jīng)細(xì)胞的增殖:神經(jīng)酰胺的可能作用[J];生理學(xué)報(bào);2011年06期

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本文編號(hào)：343627