目的:優(yōu)化人外周血淋巴細(xì)胞增殖試驗(yàn)條件;考察動物源材料的Gal抗原含量與淋巴細(xì)胞增殖效應(yīng)的相關(guān)性;并比較人外周血淋巴細(xì)胞與小鼠脾臟淋巴細(xì)胞增殖試驗(yàn)對動物源材料的敏感性差異。方法:從細(xì)胞接種量,陽性對照（刀豆球蛋白A,Con A）的工作濃度與細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)間,優(yōu)化人外周血淋巴細(xì)胞增殖試驗(yàn)的最佳條件;利用優(yōu)化的試驗(yàn)方法,通過人外周血淋巴細(xì)胞與動物源性材料的（牛跟腱或由牛跟腱純化的膠原蛋白海綿）勻漿液或浸提液共培養(yǎng),考察材料的不同前處理方式對人外周血淋巴細(xì)胞增殖的影響;參考標(biāo)準(zhǔn)YY/T 1561-2017,檢測材料勻漿液或浸提液的Gal抗原含量,分析其抗原含量與淋巴細(xì)胞增殖效應(yīng)的相關(guān)性;同時(shí)參考標(biāo)準(zhǔn)YY/T 1465.1-2016,考察材料勻漿液與浸提液對小鼠脾臟淋巴細(xì)胞增殖效應(yīng)的影響,并對比分析對動物源材料的敏感性差異。結(jié)果:人外周血淋巴細(xì)胞增殖試驗(yàn)最佳反應(yīng)條件經(jīng)優(yōu)化確定為:細(xì)胞接種量為1×10⁵,陽性對照（Con A）的終濃度選擇5～10μg·mL^-1,培養(yǎng)時(shí)間為4 d。人外周血淋巴細(xì)胞與膠原蛋白海綿（勻漿組與浸提液組）共培養(yǎng)后,樣品組與正常細(xì)胞對... 

【文章來源】：藥物分析雜志. 2019,39(08)北大核心CSCD

【文章頁數(shù)】：8 頁

【文章目錄】：
1 材料
    1.1 試驗(yàn)樣品
    1.2 試劑與耗材
    1.3 主要設(shè)備
2 方法
    2.1 標(biāo)準(zhǔn)曲線的建立
    2.2 試驗(yàn)條件優(yōu)化
        2.2.1 陽性對照制備
        2.2.2 人外周血淋巴細(xì)胞接種和檢測
    2.3 考察樣品的淋巴細(xì)胞增殖效應(yīng)
        2.3.1 樣品制備
        2.3.2 試驗(yàn)樣品與細(xì)胞共培養(yǎng)及細(xì)胞增殖率檢測
    2.4 小鼠脾臟淋巴細(xì)胞增殖試驗(yàn)
    2.5 Gal抗原含量檢測
    2.6 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析
3 結(jié)果
    3.1 標(biāo)準(zhǔn)曲線
    3.2 試驗(yàn)條件優(yōu)化結(jié)果
    3.3 樣品淋巴細(xì)胞增殖效應(yīng)的檢測結(jié)果
    3.4 小鼠脾臟淋巴細(xì)胞增殖檢測結(jié)果
    3.5 Gal抗原含量檢測結(jié)果
4 小結(jié)和討論


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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本文編號：3239274