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糜蛋白酶降解溴氰菊酯的作用及機(jī)理研究

發(fā)布時(shí)間:2020-12-27 11:30
  媒介昆蟲的擬除蟲菊酯抗性已經(jīng)在世界范圍內(nèi)存在,是控制媒介傳染病的一個(gè)主要障礙。為闡明媒介昆蟲對(duì)擬除蟲菊酯的抗性機(jī)制,本實(shí)驗(yàn)室先前已經(jīng)鑒別并報(bào)道了一系列擬除蟲菊酯代表種溴氰菊酯抗性相關(guān)基因,其中包括糜蛋白酶基因。其后,通過(guò)將糜蛋白酶基因過(guò)表達(dá)和RNA干涉,進(jìn)一步證實(shí)糜蛋白酶基因上調(diào)是引起溴氰菊酯抗性的原因之一。為進(jìn)一步研究糜蛋白酶對(duì)溴氰菊酯的作用,我們進(jìn)行糜蛋白酶體外直接催化降解溴氰菊酯實(shí)驗(yàn),并測(cè)定了該酶解反應(yīng)的相關(guān)動(dòng)力學(xué)參數(shù)。應(yīng)用氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀和紫外-可見(jiàn)光分光光度法來(lái)檢測(cè)糜蛋白酶降解不同濃度(4.96-24.80μM)溴氰菊酯,其定量檢測(cè)是通過(guò)檢測(cè)反應(yīng)體系中溴氰菊酯的減少來(lái)實(shí)現(xiàn)。溴氰菊酯的糜蛋白酶降解物(含未被降解的溴氰菊酯底物)保留時(shí)間分別為37.968 min、37.415min、36.490 min和35.895 min。與NIST質(zhì)譜數(shù)據(jù)庫(kù)比對(duì)后發(fā)現(xiàn),37.968 min為未被降解的溴氰菊酯,其余峰為溴氰菊酯的糜蛋白酶降解產(chǎn)物。溴氰菊酯紫外-可見(jiàn)光分光光度法測(cè)量的吸收波長(zhǎng)為264 nm,其代謝產(chǎn)物吸收波長(zhǎng)分別為250 nm和296 nm。應(yīng)用GraphPad Prism... 

【文章來(lái)源】:南京醫(yī)科大學(xué)江蘇省

【文章頁(yè)數(shù)】:90 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】:博士

【文章目錄】:
一. 摘要
    1. 中文摘要
    2. 英文摘要
二. 正文
    1. 前言
    2. 材料與方法
    3. 結(jié)果
    4. 討論
三. 小結(jié)
四. 參考文獻(xiàn)
五. 附錄: 在讀期間已擬發(fā)表的論文
六. 致謝
七. 綜述


【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]消除農(nóng)藥殘留的研究進(jìn)展[J]. 楊曉云,劉昌波,徐漢虹,王芳.  世界農(nóng)藥. 2005(02)
[2]淡色庫(kù)蚊細(xì)胞色素P450抗性相關(guān)基因克隆與初步鑒定[J]. 朱昌亮,李建民,田海生,馬磊,李秀蘭,吳觀陵.  中國(guó)寄生蟲學(xué)與寄生蟲病雜志. 2000(05)



本文編號(hào):2941668

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