第一部分：化療前后不同時期膠質(zhì)瘤組織中ATM的表達變化和意義 目的：探索化療前后不同時期膠質(zhì)瘤組織中ATM表達及變化規(guī)律，為確定分子靶向干預(yù)的最佳時機提供依據(jù)。 方法：利用人膠質(zhì)瘤U251細胞裸鼠皮下異位移植制作膠質(zhì)瘤模型，通過順鉑對荷瘤裸鼠進行化療(5mg／kg／d連續(xù)腹腔注射4—5天)，建立膠質(zhì)瘤化療和化療后進展模型。利用功能分類基因芯片系統(tǒng)檢測化療前后不同時期膠質(zhì)瘤組織中ATM的表達情況,并利用實時定量RT-PCR和免疫組織化學(xué)進行驗證。 結(jié)果：結(jié)果發(fā)現(xiàn)ATM在化療前后不同時期表達出現(xiàn)明顯變化，其中在化療結(jié)束時表達顯著增強，在化療后腫瘤消退至最小時ATM表達又明顯降低，然而在膠質(zhì)瘤進展時其表達再次明顯增強，定量RT-PCR和免疫組化結(jié)果與此相一致。 結(jié)論：化療前后不同時期膠質(zhì)瘤組織中ATM的表達呈動態(tài)變化，化療結(jié)束時和腫瘤進展期表達明顯上調(diào)。 第二部分：ATM基因慢病毒RNAi載體的構(gòu)建 目的：構(gòu)建ATM基因RNAi慢病毒載體，并檢測其體外抑制U251和U87膠質(zhì)瘤細胞中ATM的表達效率，為后續(xù)進一步研究奠定基礎(chǔ)。 方法：設(shè)計篩選ATM基因RNAi有效靶...

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【學(xué)位級別】：碩士

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圖2.基因芯片檢測ATM在化療不同時期表達變化

TM相對表達明顯比化療前表達上調(diào)(27.96±14.78VS=0.00)，腫瘤靜止時比化療結(jié)束時表達下調(diào)（4.40±3.41，P展時表達再次上調(diào)（30.15±7.02,P=0.00）。但是，化療結(jié)ATM相對表達無顯著差異(27.96±14.78VS30.15±7.....

圖3.2.RT-PCR檢測化療不同時期ATM表達

）；P=0.00(化療結(jié)束組VS腫瘤靜止組）；P=0.00(化療結(jié)束組VS腫止組VS腫瘤進展組）圖3.1.實時熒光定量RT-PCR檢測ATM擴增曲線

圖3.1.實時熒光定量RT-PCR檢測ATM擴增曲線

定量RT-PCR檢測結(jié)果和基因芯片結(jié)果相一致，化療不同s）分別為：1.00±0.00（對照組），4.98±0.58（化療腫瘤靜止組），8.04±0.34(腫瘤進展組)。各組間兩兩比3、圖3.1-圖3.3）表3.RT-PCR檢測化療不同時期ATM相對表達（x....

圖4.化療不同時期ATM表達免疫組織化學(xué)檢測（原始放大倍數(shù)400×，A對照組，B化療結(jié)束組，C腫瘤靜止組，D腫瘤進展組）

圖3.3.GAPDH和ATM擴增產(chǎn)物熔解曲線溶解度曲線2.4.化療不同時期ATM表達免疫組織化學(xué)檢測結(jié)果和基因芯片、RT-PCR檢測結(jié)果相一致，在化療結(jié)束時明顯比對照組表達增強，腫瘤靜止時表達減弱，在腫瘤進展時表達再次上調(diào)。（見圖4）

本文編號：4025220