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Cathepsin L在白藜蘆醇誘導的腦膠質瘤細胞凋亡及細胞周期阻滯中的作用

發(fā)布時間:2017-05-19 08:14

  本文關鍵詞:Cathepsin L在白藜蘆醇誘導的腦膠質瘤細胞凋亡及細胞周期阻滯中的作用,由筆耕文化傳播整理發(fā)布。


【摘要】:目的:本課題以人腦膠質瘤U251和U87細胞為模型,初步探討cathepsin L在白藜蘆醇(resveratrol)誘導細胞增殖、凋亡中的作用及其機制。方法:采用CCK-8法檢測細胞活性;集落形成以及annexin V/PI雙染流式實驗檢測resveratrol對膠質瘤細胞U251和U87的細胞毒性作用。Western blot檢測resveratrol對cathepsin L以及cyclin A、cyclin B1、cyclin D1和凋亡相關蛋白Bcl-2/Bax表達水平的影響,免疫熒光染色檢測cathepsin L的變化。PI單染檢測藥物對膠質瘤細胞周期的影響。用si RNA干擾cathepsin L觀察resveratrol對細胞周期及細胞凋亡的影響。U87細胞轉染p53突變質粒后,觀察細胞對resveratrol的敏感性變化。結果:Western blot結果顯示resveratrol能夠顯著激活cathepsin L,免疫熒光實驗進一步驗證了給藥后膠質瘤細胞cathepsin L的增加。CCK-8、集落形成實驗及流式細胞術及western blot結果提示,resveratrol能夠誘導細胞的凋亡;U87細胞對resveratrol的敏感性比U251細胞更強。PI單染流式細胞術結果表明resveratrol可以引起U251細胞G1期阻滯,U87細胞為S期阻滯。Resveratrol可以明顯下調細胞周期蛋白的表達水平,表明resveratrol確實能夠誘導膠質瘤細胞周期阻滯。在干擾cathepsin L以后由resveratrol引起的細胞毒性增強,克隆形成率明顯降低,細胞周期阻滯作用增強。U87細胞轉染p53突變質粒后,細胞對resveratrol的敏感性減弱。結論:Cathepsin L參與了resveratrol對膠質瘤細胞的增殖,誘導其凋亡和細胞周期阻滯的作用,抑制cathepsin L可以增強膠質瘤細胞對resveratrol的敏感性,并且這種作用具有一定的p53依賴性。
【關鍵詞】:cathepsin L 白藜蘆醇 膠質瘤細胞 凋亡 細胞周期
【學位授予單位】:蘇州大學
【學位級別】:碩士
【學位授予年份】:2015
【分類號】:R739.41
【目錄】:
  • 中文摘要4-5
  • Abstract5-8
  • 前言8-10
  • 實驗部分10-17
  • 材料與方法10-17
  • 一、材料10
  • 二、實驗方法10-17
  • 實驗結果17-29
  • 1. Resveratrol作用于膠質瘤細胞后cathepsin L的表達增加17-19
  • 2. Resveratrol抑制膠質瘤細胞的增殖并誘導細胞凋亡19-22
  • 3. 抑制cathepsin L可以增強膠質瘤細胞對resveratrol的敏感性22-25
  • 4. Resveratrol可以引起膠質瘤細胞的周期阻滯25-27
  • 5. 抑制cathepsin L加劇細胞周期阻滯27-28
  • 6. U87 細胞進行p53mut轉染后,對resveratrol敏感性減弱28-29
  • 討論29-33
  • 結論33-34
  • 參考文獻34-40
  • 綜述40-52
  • Reference46-52
  • 攻讀學位期間公開發(fā)表的論文52-53
  • 致謝53-54

【參考文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前1條

1 ;Combined Detection of Serum Matrix Metalloproteinase 9,Acetyl Heparinase and Cathepsin L in Diagnosis of Ovarian Cancer[J];Chinese Journal of Cancer Research;2012年01期


  本文關鍵詞:Cathepsin L在白藜蘆醇誘導的腦膠質瘤細胞凋亡及細胞周期阻滯中的作用,,由筆耕文化傳播整理發(fā)布。



本文編號:378155

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