目的： 應(yīng)用文獻(xiàn)檢索和生物信息庫(kù)預(yù)測(cè)，尋找miR-34a參與調(diào)控Wnt/β-catenin信號(hào)通路的線索。通過(guò)分子生物學(xué)技術(shù)在神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞（SK-N-SH細(xì)胞）中過(guò)表達(dá)miR-34a，而后檢測(cè)Wnt/β-catenin信號(hào)通路活性的變化，以及腫瘤細(xì)胞增殖和凋亡的情況。為闡明miR-34a和Wnt/β-catenin信號(hào)通路在神經(jīng)母細(xì)胞瘤發(fā)病機(jī)制中的作用提供依據(jù)，也為進(jìn)一步研究神經(jīng)母細(xì)胞瘤發(fā)生的分子機(jī)制和基因治療方法提供新的思路和實(shí)驗(yàn)依據(jù)。 方法： 1、檢索相關(guān)文獻(xiàn)資料并應(yīng)用生物信息學(xué)方法——靶基因預(yù)測(cè)軟件(PicTar、TargetScan、microRNA.org、RNA22)預(yù)測(cè)并分析可能調(diào)控Wnt/β-catenin信號(hào)通路的microRNA，同時(shí)預(yù)測(cè)miR-34a潛在的靶基因。 2、構(gòu)建miR-34a的模擬物并將其轉(zhuǎn)入SK-N-SH細(xì)胞中，再以半定量反轉(zhuǎn)錄PCR（RT-PCR）、熒光定量PCR（Real-time PCR）檢測(cè)miR-34a在細(xì)胞中的表達(dá)情況。 3、在SK-N-SH細(xì)胞中過(guò)表達(dá)miR-34a后，蟲(chóng)熒光素報(bào)告實(shí)驗(yàn)分析Wnt1和catenin-δ-1的mRNA轉(zhuǎn)...

【文章頁(yè)數(shù)】：56 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

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