本文關(guān)鍵詞：成纖維細胞激活蛋白及其突變體真核表達質(zhì)粒的構(gòu)建及鑒定

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【摘要】：目的構(gòu)建并鑒定人成纖維細胞激活蛋白(FAPα)真核表達質(zhì)粒pc DNA-w FAPα(野生型FAPα)、pc DNA-t FAPα(胞外段FAPα)和pc DNA-m FAPα(缺失624~704位氨基酸的突變型FAPα)。方法以口腔癌組織總RNA為模板,采用RT-PCR方法擴增w FAPαc DNA基因片段,連接至真核表達質(zhì)粒pc DNA3.1(+)獲得重組pc DNA-w FAPα質(zhì)粒。以重組pc DNA-w FAPα為模板,擴增t FAPα基因片段;用overlap PCR技術(shù),獲得m FAPα基因;分別連接至pc DNA3.1(+)獲得重組pc DNA-t FAPα和pc DNA-m FAPα質(zhì)粒。結(jié)果酶切鑒定和測序驗證皆顯示pc DNA-w FAPα、pc DNA-t FAPα和pc DNA-m FAPα為正確重組質(zhì)粒。結(jié)論成功構(gòu)建人野生型FAPα(w FAPα)、胞外段FAPα(t FAPα)和突變型FAPα(m FAPα)真核表達質(zhì)粒,為進一步研究FAPα在口腔鱗癌發(fā)病過程中的分子機制奠定基礎(chǔ)。
【作者單位】： 南方醫(yī)科大學南方醫(yī)院口腔科南方醫(yī)科大學口腔醫(yī)學院;
【關(guān)鍵詞】： 成纖維細胞激活蛋白 真核表達載體 pc DNA.(+)
【基金】：國家自然科學基金資助項目(編號:81472536) 廣東省科技計劃項目(編號:2012B031800139,2014A020212440)
【分類號】：R739.85
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