目的:齲病是最常見(jiàn)的口腔疾病,也是當(dāng)今世界共同關(guān)注的公共衛(wèi)生問(wèn)題。通過(guò)再礦化的方法來(lái)控制齲病的進(jìn)展,并恢復(fù)牙齒的美觀、強(qiáng)度和功能是現(xiàn)代口腔醫(yī)學(xué)的一個(gè)重要目標(biāo)。實(shí)現(xiàn)羥基磷灰石晶體定向有序再礦化,從而在脫礦牙釉質(zhì)表面恢復(fù)與天然釉質(zhì)相似的結(jié)構(gòu)形態(tài)和力學(xué)性能,是當(dāng)今仿生礦化領(lǐng)域的熱點(diǎn)問(wèn)題。為了模擬天然釉質(zhì)(釉原蛋白)的生物礦化過(guò)程,本研究采用溶菌酶(LZM)模擬釉原蛋白穩(wěn)定非晶態(tài)磷酸鈣(ACP),形成LZM/ACP納米粒子。利用次氯酸鈉(NaClO)降解溶菌酶來(lái)模擬金屬基質(zhì)蛋白酶在體內(nèi)分解釉原,生成ACP納米粒子。在甘氨酸(Gly)的引導(dǎo)下,ACP納米粒子可以有序排列,由非晶態(tài)轉(zhuǎn)變磷灰石晶體,最終形成了類(lèi)似于天然釉質(zhì)的定向有序的棒狀羥基磷灰石晶體。方法:1、常溫下依次把CaCl_2·2H_2O和K_2HPO_4加入到溶菌酶(LZM)溶液中,利用LZM穩(wěn)定ACP形成LZM-ACP納米微粒,利用透射電子顯微鏡(Transmission Electron Microscope,TEM)來(lái)表征微粒形態(tài)特征,選區(qū)電子衍射(Selected Area Electron Diffraction,SAED)進(jìn)行晶體樣品的形貌特征與晶體學(xué)性質(zhì)的原位分析。2、收集無(wú)齲無(wú)裂紋的下頜垂直阻生齒制備釉質(zhì)切片,隨機(jī)分為4組(酸蝕牙釉質(zhì)組A,LZM-ACP處理組B,LZM-ACP+Gly處理組C,天然釉質(zhì)組D,每組各10個(gè)樣品)。A、B、C使用氣槍吹干,37%磷酸凝膠酸蝕釉質(zhì)30s、大量去離子水沖洗去凈磷酸、氣槍吹干至釉質(zhì)表面呈白堊色。D組天然牙不酸蝕作為對(duì)照組。A組:酸蝕釉質(zhì)片直接浸泡于人工唾液中(5mL/樣本)B組:酸蝕釉質(zhì)片經(jīng)LZM/ACP+NaClO處理后浸泡于人工唾液(5mL/樣本)C組:酸蝕釉質(zhì)片經(jīng)LZM/ACP+NaClO+Gly處理后浸泡于人工唾液(5mL/樣本)D組:天然牙齒未經(jīng)任何處理浸于人工唾液中(5mL/樣本)以上各組釉質(zhì)分別礦化3天、7天,利用X射線(xiàn)衍射(Diffraction of X-Rays,XRD)分析其衍射圖譜,確定晶體的原子和分子結(jié)構(gòu);掃描電鏡(Scanning Electron Microscope,SEM)觀察樣品的表面形態(tài);X射線(xiàn)能譜元素成像分析技術(shù)(EDX-Mapping)進(jìn)行元素的定性和定量分析,并可分析樣品微區(qū)的化學(xué)成分等信息,以檢測(cè)酸蝕釉質(zhì)再礦化效果。結(jié)果:1、溶菌酶可以和ACP形成LZM/ACP納米微粒來(lái)穩(wěn)定溶液中較高濃度鈣磷離子。2、在釉質(zhì)齲體外人工模型中,仿照人體中金屬基質(zhì)蛋白酶降解釉原蛋白的過(guò)程,LZM/ACP納米微粒被NaClO分解,在甘氨酸的誘導(dǎo)下,ACP納米顆�？焖儆行虻卦谒嵛g釉質(zhì)表面沉積。3、經(jīng)檢測(cè),酸蝕釉質(zhì)表面再礦化層的形態(tài)結(jié)構(gòu)與天然釉質(zhì)相似。結(jié)論:溶菌酶可以穩(wěn)定較高濃度的無(wú)定形磷酸鈣,在NaClO的分解下,通過(guò)甘氨酸的引導(dǎo)可以實(shí)現(xiàn)酸蝕釉質(zhì)表面再礦化,這一過(guò)程是基于非經(jīng)典的結(jié)晶理論,通過(guò)納米粒子的定向附著來(lái)實(shí)現(xiàn)的,為臨床早期齲的微創(chuàng)治療提供了一種很有前景的方法。
【學(xué)位單位】：天津醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位年份】：2019
【中圖分類(lèi)】：R781.1
【文章目錄】：
中文摘要
Abstract
縮略語(yǔ)/符號(hào)說(shuō)明
前言
    研究現(xiàn)狀、成果
    研究目的、方法
1.對(duì)象和方法
    1.1 材料與設(shè)備
        1.1.1 實(shí)驗(yàn)材料
        1.1.2 實(shí)驗(yàn)設(shè)備
    1.2 實(shí)驗(yàn)方法
        1.2.1 溶菌酶-無(wú)定形磷酸鈣納米復(fù)合物的制備
        1.2.2 透射電鏡(Transmission Electron Microscope,TEM)+選區(qū)電子衍射(SelectedArea Electron Diffraction,SAED)表征 LZM/ACP、LZM/ACP+Na Cl O 納米復(fù)合物
        1.2.3 人工唾液制備
        1.2.4 脫礦牙釉質(zhì)樣品制備
        1.2.5 脫礦牙釉質(zhì)再礦化實(shí)驗(yàn)
        1.2.6 表征
        1.2.7 統(tǒng)計(jì)分析
2 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
    2.1 TEM結(jié)果
    2.2 XRD結(jié)果
    2.3 SEM結(jié)果
3 討論
結(jié)論
參考文獻(xiàn)
發(fā)表論文和參加科研情況說(shuō)明
綜述 牙釉質(zhì)再礦化方法的研究進(jìn)展
    綜述參考文獻(xiàn)
致謝
個(gè)人簡(jiǎn)歷

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