【摘要】： 涎腺腺樣囊性癌是口腔頜面部較常見的惡性腫瘤,具有嗜神經(jīng)和血管等特性,對放療和化療不敏感,傳統(tǒng)治療方法不能取得令人滿意的治療效果,隨著分子生物學(xué)技術(shù)發(fā)展,轉(zhuǎn)基因治療涎腺腺樣囊性癌成為新的策略,但轉(zhuǎn)基因治療腫瘤存在特異性差的問題。近年來研究發(fā)現(xiàn)hTERT在永生化細胞系和85%的人腫瘤組織中都具有較高的活性,而在大多數(shù)正常體細胞中則無活性,本課題組前期研究發(fā)現(xiàn)hTERT在涎腺腺樣囊性癌陽性率100%,而在正常涎腺組織內(nèi)陰性或弱陽性。腫瘤壞死因子(TNF)相關(guān)的凋亡誘導(dǎo)配體(TRAIL)是TNF家族成員,能引起多種腫瘤細胞凋亡,而對正常細胞影響較小,目前,TRAIL已被應(yīng)用于多種腫瘤的轉(zhuǎn)基因治療研究。 針對腫瘤轉(zhuǎn)基因治療特異性差的問題,根據(jù)hTERT和TRAIL均具有腫瘤特異性的特性,在國家自然基金面上項目和國家自然基金國際合作項目資金支持下,以同源重組法構(gòu)建了AdCMV-TRAIL和AdTERT-TRAIL腺病毒載體,通過體外、體內(nèi)轉(zhuǎn)染涎腺腺樣囊性癌細胞或正常細胞,探討它們對涎腺腺樣囊性癌的作用,結(jié)果顯示通過雙特異性AdTERT-TRAIL實現(xiàn)了TRAIL基因在SACC-83細胞中表達,進而對涎腺腺樣囊性癌細胞具有腫瘤特異性殺傷作用:其對菏瘤裸鼠器官、肝臟功能和全血成分沒有明顯影響,這種特異性殺傷作用是由TRAIL基因激活了Caspase-3基因,從而啟動了下游的凋亡途徑。這就為AdTERT-TRAIL轉(zhuǎn)基因治療涎腺腺樣囊性癌奠定了理論基礎(chǔ)和實驗技術(shù)基礎(chǔ)。
【圖文】：

轉(zhuǎn)染效率一EGFP轉(zhuǎn)染ACC一2和SACC一8324h后，在EGFP表達后發(fā)出綠色熒光的細胞，在轉(zhuǎn)染(圖3.1，3.2)，此后逐漸減弱，至lw時仍未轉(zhuǎn)染腺病毒組細胞未見熒光著色;每個普通光和熒光下照相，然后分析轉(zhuǎn)染效率時兩種腺樣囊性癌細胞轉(zhuǎn)染效率達到了97用此MOI值作為轉(zhuǎn)染時腺病毒的滴度。

AdCMV一EGFP轉(zhuǎn)染腺樣囊性癌SACC一83細熒光顯微鏡下影像(x400)性TRAIL基因mRNA檢測3d，提取腫瘤細胞總RNA進行RT一PCR擴285、185、553條清晰的帶，說明所提取。經(jīng)RT一PCR擴增瓊脂糖電泳紫外燈下觀AIL轉(zhuǎn)染腫瘤細胞后，，可擴增出約594bP瘤細胞中則未擴增出目的片段;2種腺樣APDH片段(圖3.3，3.4)。
【學(xué)位授予單位】：吉林大學(xué)
【學(xué)位級別】：博士
【學(xué)位授予年份】：2009
【分類號】：R739.87

【參考文獻】

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1 楊義軍,鄭曉飛,朱捷,呂星,羅瑛,孫志賢;hTERT啟動子調(diào)控osm基因表達在體外的抑癌作用[J];癌癥;2003年06期

2 柯小亮;孫宏晨;臧光祥;劉金鐘;苗雷英;喬春燕;;腺病毒介導(dǎo)EGFP共轉(zhuǎn)染p16基因?qū)ο贅幽倚园┘毎挠绊慬J];北京口腔醫(yī)學(xué);2009年01期

3 臧光祥;穆亞冰;孫宏晨;劉金鐘;張澤兵;柯小亮;苗雷英;;腺病毒介導(dǎo)的TRAIL基因?qū)ι圜[狀細胞癌細胞株的影響[J];華西口腔醫(yī)學(xué)雜志;2007年06期

4 臧光祥;孫宏晨;穆亞冰;張澤兵;柯小亮;劉金鐘;蘇濤;;hTERT啟動TRAIL基因的腺病毒載體對人舌鱗癌細胞影響[J];口腔醫(yī)學(xué)研究;2007年05期

5 胡曉文,孫宏晨,歐陽喈;涎腺腫瘤中端粒長度及端粒酶活性測定的意義[J];現(xiàn)代口腔醫(yī)學(xué)雜志;2002年02期

本文編號：2706787