豬流行性腹瀉(Porcine epidemic diarrhea,PED)是由豬流行性腹瀉病毒(Porcine epidemic diarrhea virus,PEDV)引起的仔豬出現(xiàn)嚴(yán)重腹瀉乃至死亡的高度接觸性腸道傳染病。為了深入了解該病病原特征,我們以2011年分離自福建某發(fā)病豬場的PEDV流行毒FJzz1/2011株為研究對象,從病原學(xué)角度對其生物學(xué)特性進(jìn)行研究。首先將FJzz1/2011株在Vero細(xì)胞中連續(xù)傳代與純化,結(jié)果顯示:F1代及蝕斑純化后F5、F10和F20代病毒感染后均能形成細(xì)胞融合和多核體細(xì)胞病變;對分離及純化的各代次毒株進(jìn)行RT-PCR檢測,結(jié)果僅PEDV呈陽性,且各代次毒株均能被抗PEDV的抗體識別,表明我們獲得的FJzz1/2011株不含有其他病毒,且在電鏡下可以觀察到周圍有棒狀突起的呈明顯冠狀病毒特征的病毒粒子形態(tài)。病毒增殖曲線結(jié)果顯示,該毒株在感染后6-24h內(nèi)增殖速率較快,24h可達(dá)到復(fù)制高峰。對流行毒FJzz1/2011株進(jìn)行全基因測序,發(fā)現(xiàn)該毒株S基因存在較大變異,與經(jīng)典毒株CV777相比,流行毒FJzz1/2011株存在6個氨基酸的插入(插入位置:...

【文章頁數(shù)】：93 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
英文縮略表
第一章 引言
    1.1 PED的發(fā)生史
        1.1.1 PEDV的發(fā)生與發(fā)展
        1.1.2 PEDV的流行現(xiàn)狀
    1.2 PED的流行特點(diǎn)
        1.2.1 傳染與傳播
        1.2.2 臨床癥狀
        1.2.3 病原感染后的組織嗜性
        1.2.4 組織病理變化
        1.2.5 PEDV的感染特點(diǎn)
    1.3 PEDV的病原學(xué)特征
        1.3.1 PEDV病原學(xué)分類地位
        1.3.2 PEDV生物與理化性質(zhì)
        1.3.3 PEDV的分離與培養(yǎng)特性
        1.3.4 PEDV編碼蛋白的結(jié)構(gòu)與功能
        1.3.5 PEDV與冠狀病毒
    1.4 PEDV的診斷與防控
        1.4.1 診斷與鑒別診斷
        1.4.2 PEDV的防控
        1.4.3 其它防控措施
    1.5 目的與意義
第二章 PEDV流行毒FJzz1/2011株對仔豬的致病性分析
    摘要
    前言
    2.1 材料與方法
        2.1.1 實(shí)驗(yàn)材料
        2.1.2 PEDV流行毒FJzz1/2011株的生物學(xué)特性分析
        2.1.3 PEDV流行毒FJzz1/2011株對仔豬的致病性分析
    2.2 結(jié)果
        2.2.1 PEDV流行毒FJzz1/2011株的生物學(xué)特性
        2.2.2 PEDV流行毒FJzz1/2011株對仔豬的致病性分析
    2.3 討論
第三章 PEDV流行毒FJzz1/2011株N蛋白抗原表位的鑒定
    摘要
    前言
    3.1 材料與方法
        3.1.1 實(shí)驗(yàn)材料
        3.1.2 PEDV流行毒N蛋白的表達(dá)
        3.1.3 PEDV-N蛋白抗原表位的篩選
        3.1.4 單抗PN-D6抗原表位的鑒定
        3.1.5 PN-D4對應(yīng)抗原表位的鑒定
        3.1.6 抗原表位EP-D4、EP-D6的Western-Blot鑒定
        3.1.7 PN-D6與PN-D4抗原表位分析
        3.1.8 EP-D4及EP-D6的特異性檢測
        3.1.9 單抗PN-D6和PN-D4在病毒感染細(xì)胞中的定位
    3.2 結(jié)果
        3.2.1 PEDV-N、N1及N2蛋白的表達(dá)與鑒定
        3.2.2 PEDV-N蛋白表位的篩選
        3.2.3 PN-D6抗原表位的鑒定
        3.2.4 PN-D4抗原表位的鑒定
        3.2.5 EP-D4及EP-D6的Western-Blot分析
        3.2.6 PN-D6抗原表位的分析
        3.2.7 PN-D4抗原表位的分析
        3.2.8 EP-D4及EP-D6的特異性檢測
        3.2.9 PN-D6與PN-D4在病毒感染細(xì)胞中的定位
    3.3 討論
第四章 全文結(jié)論
參考文獻(xiàn)
致謝
作者簡歷



本文編號：4043169