本項研究將通過應(yīng)用現(xiàn)代營養(yǎng)學(xué)、病理學(xué)、氧化應(yīng)激模型、細胞系模型、實時熒光定量PCR(RT-PCR)、免疫熒光等技術(shù)，進行體內(nèi)與體外試驗，同時結(jié)合現(xiàn)今臨床醫(yī)學(xué)研究進展，從細胞與分子水平探討Ala-Gln對斷奶仔豬機體內(nèi)抗氧化能力的影響，掌握Ala-Gln與仔豬腸上皮細胞自噬關(guān)系，進而為初步揭示Ala-Gln對斷奶仔豬氧化應(yīng)激調(diào)節(jié)作用機理和研究新思路提供理論依據(jù)。 試驗一Ala-Gln對氧化應(yīng)激仔豬機體抗氧化能力的影響 試驗選取24頭健康狀況良好、胎次相近、(21±2)日齡斷奶仔豬，按照體重相近原則隨機分成2個組，每組12個重復(fù)，每個重復(fù)1頭豬。分別飼喂基礎(chǔ)日糧、基礎(chǔ)日糧＋0.3%Ala-Gln的試驗日糧。飼喂7天后，再將每個日糧處理組仔豬按照體重相近原則隨機分成兩個組即應(yīng)激組和非應(yīng)激組，應(yīng)激組腹腔注射8mg/kg(BW)Diquat，非應(yīng)激組注射等量的滅菌生理鹽水。應(yīng)激后繼續(xù)飼養(yǎng)7天，試驗期共14d。試驗第14d早上仔豬前腔靜脈采血，分離血清，并屠宰所有重復(fù)組斷奶仔豬，采集空腸、肝臟、脾臟樣品。試驗結(jié)果表明：(1)在氧化應(yīng)激狀態(tài)下，斷奶仔豬日糧中添加添加0.30%Ala-Gln提高了血清...

【文章頁數(shù)】：77 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
目錄
摘要
Abstract
縮寫詞表
第一章 文獻綜述
    1 研究目的和意義
    2 國內(nèi)外研究現(xiàn)狀
        2.1 氧化應(yīng)激
        2.2 丙氨酰谷氨酰胺二肽
        2.3 研究思路
    3 研究內(nèi)容和方法
        3.1 Ala-Gln 對氧化應(yīng)激仔豬機體抗氧化能力的影響
        3.2 Ala-Gln 對氧化應(yīng)激狀態(tài)下仔豬淋巴細胞抗氧化作用
        3.3 利用 H2O2構(gòu)建豬小腸上皮細胞氧化應(yīng)激模型
        3.4 Ala-Gln 對氧化應(yīng)激狀態(tài)下 IPEC-1 保護作用
        3.5 技術(shù)路線圖
第二章 試驗研究
    試驗一 Ala-Gln對氧化應(yīng)激仔豬機體抗氧化能力的影響
        摘要
        前言
        1 材料與方法
            1.1 試驗材料
            1.2 試驗動物與分組設(shè)計
            1.3 試驗日糧
            1.4 飼養(yǎng)管理
            1.5 樣品收集與處理
            1.6 測定指標(biāo)與方法
            1.7 數(shù)據(jù)統(tǒng)計處理
        2 結(jié)果與分析
            2.1 血清生化指標(biāo)及抗氧化能力
            2.2 空腸組織生化指標(biāo)及抗氧化能力
            2.3 肝臟組織生化指標(biāo)及抗氧化能力
            2.4 免疫器官指數(shù)
            2.5 空腸、肝臟和脾臟組織切片
            2.6 肝臟 GPx4、SOD1 mRNA 表達量分析
        3 討論
            3.1 Ala-Gln 對斷奶仔豬血清 Gln、GSH 含量及抗氧化能力的影響
            3.2 Ala-Gln 對斷奶仔豬空腸、肝臟組織抗氧化能力的影響
            3.3 Ala-Gln 對斷奶仔豬空腸、肝臟和脾臟組織抗生理結(jié)構(gòu)的影響
            3.4 Ala-Gln 對斷奶仔豬肝臟 GPx4、SOD1 mRNA 表達量的影響
        4 小結(jié)
    試驗二 Ala-Gln對氧化應(yīng)激狀態(tài)下仔豬淋巴細胞調(diào)控作用
        摘要
        前言
        1 材料與方法
            1.1 試驗設(shè)計
            1.2 主要試驗試劑與儀器
            1.3 試驗動物與淋巴細胞懸液制備
            1.4 試驗指標(biāo)與檢測方法
            1.5 統(tǒng)計分析
        2 結(jié)果與分析
            2.1 Ala-Gln 對氧化應(yīng)激淋巴細胞抗氧化酶活性和 MDA 含量的影響
            2.2 Ala-Gln 對氧化應(yīng)激淋巴細胞轉(zhuǎn)化率和細胞因子的影響
        3 討論
            3.1 Ala-Gln 對淋巴細胞抗氧化酶和 MDA 含量的影響
            3.2 Ala-Gln 對淋巴細胞轉(zhuǎn)化率和細胞因子的影響
        4 小結(jié)
    試驗三 H2O2對豬小腸上皮細胞氧化應(yīng)激的誘導(dǎo)作用
        摘要
        前言
        1 材料與方法
            1.1 試驗設(shè)計
            1.2 試驗主要試劑與儀器
            1.3 試驗操作準(zhǔn)備工作
            1.4 IPEC-1 細胞培養(yǎng)
            1.5 試驗指標(biāo)與檢測方法
            1.6 統(tǒng)計分析
        2 結(jié)果與分析
            2.1 H2O2對 IPEC-1 活力的影響
            2.2 H2O2對 IPEC-1 抗氧化酶活性和 MDA 含量的影響
        3 討論
        4 小結(jié)
    試驗四 Ala-Gln對氧化應(yīng)激狀態(tài)下豬小腸上皮細胞保護作用及其機制初步研究
        摘要
        前言
        1 材料與方法
            1.1 試驗設(shè)計
            1.2 試驗主要試劑與儀器
            1.3 試驗操作準(zhǔn)備工作
            1.4 IPEC-1 細胞培養(yǎng)
            1.5 試驗指標(biāo)與檢測方法
            1.6 統(tǒng)計分析
        2 結(jié)果與分析
            2.1 Ala-Gln 對氧化應(yīng)激狀態(tài) IPEC-1 活力的影響
            2.2 Ala-Gln 對 IPEC-1 抗氧化酶活性和 MDA 含量的影響
            2.3 Ala-Gln 對氧化應(yīng)激狀態(tài) IPEC-1 自噬的影響
        3 討論
        4 小結(jié)
第三章 全文結(jié)論、創(chuàng)新點及待解決問題
    1 全文結(jié)論
    2 創(chuàng)新點
    3 待解決問題
參考文獻
致謝



本文編號：3865048