目前,卵母細(xì)胞體外成熟培養(yǎng)技術(shù)已取得很大進(jìn)展,但體外成熟得到的卵母細(xì)胞仍存在發(fā)育能力較差的問題。本研究旨在探討血管內(nèi)皮生長因子(VEGF)對水牛卵母細(xì)胞體外成熟及其后續(xù)胚胎發(fā)育的影響,并初步研究其相關(guān)作用機(jī)制,以期進(jìn)一步完善水牛體外成熟培養(yǎng)體系,提高體外胚胎生產(chǎn)效率。 首先,初步探討了VEGF及其受體VEGFR1與VEGFR2在卵泡發(fā)育和卵丘卵母細(xì)胞復(fù)合物(COCs)體外成熟培養(yǎng)過程中的表達(dá)變化規(guī)律。VEGF在卵巢組織表達(dá)的免疫組織化學(xué)檢測結(jié)果發(fā)現(xiàn),不同時期卵泡中均有VEGF表達(dá),且主要在顆粒細(xì)胞中表達(dá)。水牛COCs中VEGF表達(dá)情況的免疫熒光染色檢測結(jié)果顯示,VEGF主要在卵丘細(xì)胞中表達(dá),在卵母細(xì)胞不表達(dá)。水牛COCs在體外成熟過程中的VEGF及其受體表達(dá)變化實(shí)時熒光定量PCR (Q-PCR)檢測結(jié)果發(fā)現(xiàn),VEGF在成熟培養(yǎng)過程中(0h、6h、12h與24h)的表達(dá)呈下降趨勢,其中VEGF在成熟前(0h)表達(dá)量顯著高于成熟6h(P<0.05),而成熟6h、12h與24h間VEGF表達(dá)量差異不顯著(P>0.05)；VEGFR1與VEGFR2在成熟過程中均呈現(xiàn)出先升后降的趨勢...

【文章頁數(shù)】：58 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
ABSTRACT
第一部分 文獻(xiàn)綜述
    1 卵母細(xì)胞體外成熟
        1.1 卵母細(xì)胞的發(fā)生
        1.2 卵母細(xì)胞減數(shù)分裂恢復(fù)調(diào)控
        1.3 卵母細(xì)胞體外成熟培養(yǎng)及其影響因素
        1.4 顆粒細(xì)胞對卵母細(xì)胞發(fā)育的影響
    2 血管內(nèi)皮生長因子(VEGF)
        2.1 VEGF的分子結(jié)構(gòu)
        2.2 VEGF的信號通路與生物學(xué)功能
        2.3 VEGF在卵巢發(fā)育中表達(dá)情況及其功能
        2.4 VEGF對卵母細(xì)胞成熟的影響
    3 研究目的與意義
第二部分 試驗(yàn)部分
    第一章 內(nèi)源性VEGF在卵泡和COCs中的表達(dá)規(guī)律的初步研究
        1 材料與方法
            1.1 材料
            1.2 方法
            1.3 統(tǒng)計(jì)分析
        2 結(jié)果與分析
            2.1 免疫組化檢測卵泡發(fā)育過程中VEGF的表達(dá)情況
            2.2 水牛卵丘卵母細(xì)胞復(fù)合物VEGF免疫熒光染色
            2.3 卵母細(xì)胞體外成熟過程中VEGF及其受體mRNA的表達(dá)情況
        3 討論
        4 結(jié)論
    第二章 VEGF對水牛卵母細(xì)胞體外成熟培養(yǎng)效果的影響及其作用機(jī)制的研究
        1 材料與方法
            1.1 實(shí)驗(yàn)材料
            1.2 主要儀器設(shè)備及試劑
            1.3 試驗(yàn)方法
            1.4 試驗(yàn)設(shè)計(jì)
            1.5 統(tǒng)計(jì)分析
        2 結(jié)果與分析
            2.1 VEGF對水牛卵母細(xì)胞體外成熟效果的影響
            2.2 VEGF對水牛卵母細(xì)胞IVF早期胚胎發(fā)育的影響
            2.3 VEGF對水牛卵母細(xì)胞SCNT早期胚胎發(fā)育的影響
            2.4 VEGF對水牛裸卵體外成熟培養(yǎng)的影響
            2.5 VEGF對卵丘細(xì)胞凋亡的影響
            2.6 VEGF對凋亡相關(guān)基因表達(dá)的影響
            2.7 VEGF對卵丘細(xì)胞發(fā)育相關(guān)基因表達(dá)的影響
        3 討論
        4 結(jié)論
參考文獻(xiàn)
附錄1
附表2 英文中文對照表
致謝
攻讀碩士期間發(fā)表學(xué)術(shù)論文



本文編號：3865046