【摘要】：背景:鹿茸是唯一可以完全再生的哺乳動物附屬器官,其每年基于角柄骨膜(PP)細胞的增殖與分化周期性再生。PP由生茸區(qū)骨膜(AP)發(fā)育而來的,AP主要存在于仔公鹿額外脊處,移植AP到鹿體上的其他部位時可以誘導(dǎo)異位鹿茸形成。PP根據(jù)其與皮膚接觸的緊密程度,分為致敏區(qū)和休眠區(qū),致敏區(qū)與緊覆于其上的皮膚相互作用,使鹿茸干細胞發(fā)育成完整的鹿茸。因此,致敏區(qū)與休眠區(qū)差異蛋白質(zhì)組必定于再生過程中起重要作用。鹿茸為研究哺乳動物的器官再生提供了絕佳的模型。先前的研究表明,PP細胞開始鹿茸的再生是由睪酮(T)的減少引發(fā)的。睪酮水平對角柄的生長有積極作用,但對鹿茸的生長有負面影響。方法:兩只公鹿,每隔兩周定時采集血樣。在第一次采血后進行閹割,然后比較鹿茸再生前后的睪酮水平。給一只鹿施用外源睪酮,另外一只則作為對照。在鹿茸發(fā)起再生前收集致敏區(qū)PP和休眠區(qū)PP組織,使用放射免疫測定法分析雄激素水平,然后用Label-free方法檢測差異蛋白質(zhì)點,進行質(zhì)譜分析以獲得肽質(zhì)量指紋印跡。通過Kobas.3等軟件探索蛋白質(zhì)的信號轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑。最后用qRTPCR法驗證一些關(guān)鍵的差異表達蛋白(DEPs)。結(jié)果:在再生與非再生組共檢測到2956個差異表達蛋白。在再生組中,有243種顯著上調(diào),98種顯著下調(diào);有2615種在兩組中并未達到顯著水平。我們通過KEGG(P0.05)鑒定了與雄激素相關(guān)的信號轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑,例如雌激素信號轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑,內(nèi)質(zhì)網(wǎng)蛋白質(zhì)加工和焦點粘連等。DEPs的Gene Ontology(GO)注釋分為生物過程、細胞成分和分子功能。在所有這些GO-term注釋中,我們根據(jù)差異顯著性排名選擇顯示前十位(P0.05)。討論:睪酮可能在鹿茸再生中發(fā)揮了關(guān)鍵作用。發(fā)現(xiàn)一些鑒定的DEP和信號傳導(dǎo)途徑與雄激素有關(guān),雄激素可能參與鹿茸再生。鹿茸作為生物醫(yī)學研究模型,對其再生過程進行各個層面(發(fā)育、細胞更新和修復(fù)機制)的探索,會對人類組織和器官的疾病或損傷有很大的益處。
【學位授予單位】：中國農(nóng)業(yè)科學院
【學位級別】：博士
【學位授予年份】：2019
【分類號】：S825

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本文編號：2593073