Hutchinson—Gilford早老癥（HGPS）是一種罕見的遺傳性疾病,其臨床特征為患者幼年時期即出現(xiàn)衰老癥狀并累及多種組織器官,包括皮膚、肌肉、骨骼以及心血管系統(tǒng)。HGPS伴發(fā)有老年人常見的并發(fā)癥,并最終導致死亡,該疾病患兒的平均壽命約13.5歲。HGPS是由于LMNA基因的點突變干擾了A型核纖層蛋白前體（prelamin A）翻譯后的加工過程,從而導致異常prelamin A在細胞核堆積的結果。Zmpste24是參與由prelamin A形成成熟的核纖層蛋白A（lamin A）過程所必須的酶。Zmpste24基因敲除小鼠具有典型的早老表現(xiàn),是目前研究細胞衰老機制的首選模型。瞬時性受體電位通道（transient receptor potential,TRP）是參與調(diào)節(jié)胞內(nèi)鈣離子平衡的一種通道,廣泛表達于哺乳動物的多種組織中,并參與調(diào)節(jié)例如細胞增殖、細胞凋亡、遞質(zhì)釋放、細胞分化、基因轉(zhuǎn)錄等諸多重要的生理功能。研究發(fā)現(xiàn)由早老癥患者的內(nèi)皮細胞誘導的多能干細胞高表達TRPV2,最終導致細胞凋亡,與細胞衰老密切相關。但是TRP通道對骨髓間充質(zhì)干細胞（Bone marrow mesene... 

【文章來源】：中國人民解放軍空軍軍醫(yī)大學陜西省 211工程院校

【文章頁數(shù)】：68 頁

【學位級別】：碩士

【文章目錄】：
縮略語表
中文摘要
英文摘要
前言
文獻回顧
實驗一 Zmpste24~(-/-)、WT小鼠BMMSCs的分離培養(yǎng)及干性檢測
    1 實驗材料
        1.1 實驗試劑
        1.2 實驗儀器
        1.3 實驗動物
        1.4 統(tǒng)計分析
    2 實驗方法
        2.1 BMMSCs的分離培養(yǎng)與純化
        2.2 BMMSCs干細胞表面標志物鑒定
        2.3 BMMSCs克隆形成能力的檢測（CFU-F）
    3 實驗結果
        3.1 BMMSCs的分離培養(yǎng)與純化
        3.2 BMMSCs干細胞表面標志物鑒定
        3.3 BMMSCs克隆形成能力的檢測
    4 討論
實驗二 Zmpste24~(-/-)、WT小鼠BMMSCs增殖、凋亡能力以及細胞衰老情況的檢測
    1 實驗材料
        1.1 實驗試劑
        1.2 實驗儀器
        1.3 實驗動物
        1.4 統(tǒng)計分析
    2 實驗方法
        2.1 BMMSCs細胞增殖能力的檢測
        2.2 BMMSCs凋亡水平檢測
        2.3 SA-β-gal染色檢測BMMSCs的衰老情況
        2.4 BMMSCs的細胞周期蛋白及衰老相關基因表達水平的檢測
    3 實驗結果
        3.1 BMMSCs增殖能力的檢測
        3.2 BMMSCs凋亡水平檢測
        3.3 BMMSCs的衰老情況檢測
        3.4 BMMSCs的細胞周期蛋白及衰老相關基因表達水平的檢測
    4 討論
實驗三 Zmpste24~(-/-)、WT小鼠BMMSCs的TRP通道表達情況及與增殖凋亡相關通道的篩選
    1 實驗材料
        1.1 實驗試劑
        1.2 實驗儀器
        1.3 實驗動物
        1.4 統(tǒng)計分析
    2 實驗方法
        2.1 RT-PCR檢測兩種小鼠BMMSCs的TRP通道的表達
        2.2 影響B(tài)MMSCs細胞增殖、凋亡的TRP通道的篩選
        2.3 Western-Blot檢測兩種小鼠TRPM8通道的表達
    3 實驗結果
        3.1 兩種小鼠BMMSCs的TRP通道的表達檢測
        3.2 抑制BMMSCs細胞增殖、促進凋亡后TRP通道的表達情況
        3.3 兩種小鼠BMMSCs的TRPM8通道的表達
    4 討論
實驗四 抑制TRPM8通道后Zmpste24~(-/-)小鼠BMMSCs的細胞周期及氧化應激因子的變化研究
    1 實驗材料
        1.1 實驗試劑
        1.2 實驗儀器
        1.3 實驗動物
        1.4 統(tǒng)計分析
    2 實驗方法
        2.1 兩種小鼠BMMSCs氧化應激因子的表達檢測
        2.2 抑制TRPM8通道后Zmpste24~(-/-)小鼠BMMSCs的細胞周期及氧化應激因子的變化
    3 實驗結果
        3.1 兩種小鼠BMMSCs氧化應激因子的檢測
        3.2 抑制TRPM8通道后Zmpste24~(-/-)小鼠BMMSCs的細胞周期及氧化應激因子的變化
    4 討論
小結
參考文獻
附錄
個人簡歷和研究成果
致謝



本文編號：3183383