發(fā)布時(shí)間：2020-09-27 18:40

　　 目的:本研究制備S-D大鼠的脊髓突觸體,并對(duì)大鼠脊髓突觸體中神經(jīng)遞質(zhì)進(jìn)行定性、定量分析研究。方法:本實(shí)驗(yàn)使用不連續(xù)性Percoll密度梯度離心的方法去提取大鼠脊髓的突觸體,然后在透射電鏡下觀察大鼠脊髓突觸體的形態(tài)及其結(jié)構(gòu)。采用超高效液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用法對(duì)大鼠脊髓突觸體中神經(jīng)遞質(zhì)進(jìn)行測(cè)定。結(jié)果:本研究制備的大鼠脊髓突觸體,呈一形態(tài)結(jié)構(gòu)完整且具有膜結(jié)構(gòu)的橢圓形顆粒,其中包含有突觸小泡、線粒體、細(xì)胞漿等。檢測(cè)出大鼠脊髓突觸體中含有多巴胺(DA)、去甲腎上腺素(NE)、3-甲氧酪胺(3-MT)、3-羥基-2-氨基苯甲酸(3-HAA)、5-羥色胺(5-HT)、高香草酸(HVA)、r-氨基丁酸(GABA)、3,4-二羥基苯乙酸(DOPAC)、5-羥基吲哚乙酸(5-HIAA)、色氨酸(TRP)、犬尿氨酸(KYN)、3-羥基犬尿氨酸(3-HK)等神經(jīng)遞質(zhì)。結(jié)論:不連續(xù)性Percoll密度梯度離心法能制備出大鼠脊髓突觸體,并可用液相色譜-質(zhì)譜法檢測(cè)出大鼠脊髓突觸體中所含神經(jīng)遞質(zhì)及其相關(guān)代謝產(chǎn)物,說明脊髓突觸體具有生理活性。
【學(xué)位單位】：蘭州大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位年份】：2019
【中圖分類】：R338
【部分圖文】：

圖 1 S-D 脊髓脊髓突觸體制備簡(jiǎn)圖圖 2 percoll 密度梯度離心分層.2.2 樣品前處理將提取的脊髓突觸體吸入 1.5mL 的 EP 離心管；依次加入適量的萃取液甲醇的混合物，按 1:3 混合）和 50μL 混合內(nèi)標(biāo)應(yīng)用液；以 Tissuelyser 儀均質(zhì)化，均質(zhì)化條件：利用不銹鋼珠以 30Hz 的頻率震動(dòng) 3 min，反復(fù) 3 后在 4℃條件下，15000r/min 離心 15min；提取上清液入 1.5mL EP 離心管

percoll 密度梯度離心分層.5mL 的 EP 離心管；依次加入和 50μL 混合內(nèi)標(biāo)應(yīng)用液；以銹鋼珠以 30Hz 的頻率震動(dòng) 3離心 15min；提取上清液入 1.5中加入 50μL 的碳酸氫鈉（p/mL），旋轉(zhuǎn) 1min 使其混合均溶液 18000rpm 高速冷凍離心 1瓶中，進(jìn)樣 5μL 上機(jī)測(cè)定。腈中加入 0.1%的甲酸配制為

大鼠脊髓突觸體電鏡圖

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2 畢鋼,諸秉根,陳宜張;類固醇激素對(duì)大鼠小腦和脊髓突觸體攝取甘氨酸的快速作用[J];第二軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報(bào);1999年05期

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1 劉剛;大鼠脊髓突觸體的制備及其神經(jīng)遞質(zhì)的定性定量分析研究[D];蘭州大學(xué);2019年

2 劉一海;大鼠脊髓突觸體內(nèi)游離Ca~(2+)濃度及ATP含量、ATP酶活性檢測(cè)的實(shí)驗(yàn)研究[D];蘭州大學(xué);2018年

3 李長(zhǎng)帥;基于Percoll的大鼠脊髓突觸體的制備[D];蘭州大學(xué);2018年

4 鄭冰冰;大鼠脊髓突觸體氨基酸神經(jīng)遞質(zhì)的測(cè)定[D];蘭州大學(xué);2018年

5 程超;大鼠自然衰老過程中脊髓突觸體及血小板膜外周型苯二氮卓受體的變化[D];山東大學(xué);2009年

本文編號(hào)：2828226