【摘要】：目的：觀察氟西汀對內(nèi)皮素-1誘導(dǎo)的人肺動脈平滑肌細(xì)胞增殖與凋亡失衡的逆轉(zhuǎn)作用并探討其可能的機(jī)制。 方法：實(shí)驗(yàn)用細(xì)胞分成四組：空白組(Blank):含2%胎牛血清的高糖DMEM培養(yǎng)液,不加任何干預(yù)劑；內(nèi)皮素-1組(ET-1)：含2%胎牛血清的高糖DMEM培養(yǎng)液,其中加入ET-1,終濃度為0.1μM；內(nèi)皮素-1+氟西汀組(ET-1+F):含2%胎牛血清的高糖DMEM培養(yǎng)液,加入ET-1+Fluoxetine,終濃度分別為O.1μM,1.0μM；氟西汀組(F)：含2%胎牛血清的高糖DMEM培養(yǎng)液,其中加入Fluoxetine,終濃度為1.0μM。干預(yù)72小時(shí)后,分別檢測各組凋亡率,TRPC1、Caspase-3、Bcl-2、 Bcl-x1和kv1.5等基因的表達(dá)。 結(jié)果：同空白組比較,內(nèi)皮素組平滑肌細(xì)胞增殖顯著,TRPCI表達(dá)明顯增強(qiáng)(1.2448±0.2157VS0.6572±0.1076,P0.01),凋亡抑制基因Bcl-2、Bcl-x1表達(dá)增加,凋亡率顯著下降(1.1±0.1634vs2.3834±0.0703,P0.01),凋亡相關(guān)基因表達(dá)減少Caspase-3,kV1.5信使RNA、蛋白(0.0303±0.0034VS0.0661±0.0051,P0.05,1.2198±0.1016VS2.5717±0.1557,P0.001).加入氟西汀干預(yù)后,較內(nèi)皮素干預(yù)組,ET-1+F組平滑肌增殖明顯抑制,各種基因表達(dá)顯著逆轉(zhuǎn),TRPC1(0.7904±0.1043vs1.2448±0.2157,P0.051,Bcl-2、Bcl-xl,凋亡率(4.85±0.3852vs1.1±0.1634, P0.001),Caspase-3,kv1.5信使RNA、蛋白(0.1648±0.0087vs0.0303±0.0034, P0.001；2.1234±0.1766vs1.2198±0.1016,P0.001). 結(jié)論：氟西汀逆轉(zhuǎn)由內(nèi)皮素-1誘導(dǎo)的人肺動脈平滑肌細(xì)胞增殖與凋亡的失衡,其可能的機(jī)制是通過下調(diào)TRPC1的表達(dá)增加kv1.5的表達(dá)和活性,抑制細(xì)胞增殖,并上調(diào)Caspase-3的表達(dá),促進(jìn)細(xì)胞凋亡。
[Abstract]:Aim: to investigate the reversal effect of fluoxetine on endothelin-1 induced proliferation and apoptosis of human pulmonary artery smooth muscle cells (PASMC) and its possible mechanism. Methods: the cells were divided into four groups: blank group (Blank): containing 2% fetal bovine serum high sugar DMEM culture medium without any intervention; Endothelin-1 group (ET-1): high glucose DMEM medium containing 2% fetal bovine serum, in which the final concentration of ET-1, was 0.1 渭 m; In the endothelin-1 fluoxetine group (ET-1 F): containing 2% fetal bovine serum) high glucose DMEM medium, the final concentration of ET-1 Fluoxetine, was 0. 1 渭 m ~ (-1). In fluoxetine group, (F): contained 2% fetal bovine serum and high glucose DMEM medium, in which the final concentration of Fluoxetine, was 1.0 渭 M. After 72 hours of intervention, the apoptotic rate and the expression of TRPC1,Caspase-3,Bcl-2, Bcl-x1 and kv1.5 were detected. Results: compared with the blank group, the proliferation of smooth muscle cells in endothelin group was significant, the expression of TRPCI was significantly increased (1.2448 鹵0.2157VS0.6572 鹵0.1076 P0.01), and the Bcl-2,Bcl-x1 expression of apoptosis suppressor gene was increased. The apoptotic rate decreased significantly (1.1 鹵0.1634vs2.3834 鹵0.0703, P0.01), and the expression of apoptosis-related genes decreased the expression of Caspase-3,kV1.5 messenger RNA, protein (0.0303 鹵0.0034VS0.0661 鹵0.0051 P0.05N 1.2198 鹵0.1016VS2.5717 鹵0.1557 P0.001). After fluoxetine was added, smooth muscle proliferation and gene expression in ET-1 F group were significantly inhibited, and TRPC1 (0.7904 鹵0.1043vs1.2448 鹵0.2157 P0.051) Bcl-xl, and Bcl-xl were significantly inhibited in ET-1 F group compared with those in endothelin group. Apoptosis rate (4.85 鹵0.3852vs1.1 鹵0.1634, P0.001), Caspase-3,kv1.5 messenger RNA, protein (0.1648 鹵0.0087vs0.0303 鹵0.0034, P0.001); 2.1234 鹵0.1766vs1.2198 鹵0.1016g P0.001). Conclusion: fluoxetine can reverse the imbalance of proliferation and apoptosis of human pulmonary artery smooth muscle cells induced by endothelin-1. The possible mechanism of fluoxetine is to increase the expression and activity of kv1.5 by down-regulating the expression of TRPC1 and inhibit the proliferation of human pulmonary artery smooth muscle cells. The expression of Caspase-3 was upregulated and apoptosis was promoted.
【學(xué)位授予單位】：武漢大學(xué)
【學(xué)位級別】：博士
【學(xué)位授予年份】：2012
【分類號】：R363

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本文編號：2422258