現(xiàn)代藥理研究表明,螃蟹甲具有較好的藥理作用,包括鎮(zhèn)痛､抗炎,鎮(zhèn)咳､祛痰､平喘,抗腫瘤,抑菌等｡藏藥螃蟹甲主要來(lái)源于唇形科糙蘇屬多年生草本植物螃蟹甲(Phlomis younghusbandii Mukerjee)的干燥塊根,廣泛分布于西藏､青海海拔3 100~4800 m的草甸､河灘草地和干燥山坡,習(xí)稱“露木爾”,為藏醫(yī)常用藥材,至今已有千余年的藥用歷史｡螃蟹甲藥材質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)已收載于1995年部頒《衛(wèi)生部藥品標(biāo)準(zhǔn)(藏藥第一冊(cè))》以及歷屆藏藥質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn),其味苦､性涼,具有清熱疏風(fēng)､潤(rùn)喉散寒､斂瘡生肌､化痰止咳的作用,多用于治療風(fēng)濕感冒､咳嗽痰多､咽喉疫病､培根寒癥､瘡瘍久潰不斂､支氣管炎､肺部疾病等,臨床應(yīng)用非常廣泛,療效顯著,作為野生藏藥材,已被列入藏藥瀕危物種之一｡
因此,目前迫切需要對(duì)螃蟹甲的化學(xué)成分､藥理作用和質(zhì)量控制方法等進(jìn)行深入研究,確定其各種生物活性的化學(xué)物質(zhì),為螃蟹甲藥用價(jià)值的進(jìn)一步開發(fā)和利用提供理論和科學(xué)依據(jù)｡

1化學(xué)成分研究概況

綜合國(guó)內(nèi)外相關(guān)文獻(xiàn)報(bào)道,目前從藏藥螃蟹甲中分離并鑒定的化合物主要集中在環(huán)烯醚萜苷類､呋喃拉布素型二萜類､黃酮類､苯乙醇苷類､揮發(fā)油類和其他類成分等,現(xiàn)總結(jié)如下｡

1.1環(huán)烯醚萜苷類化合物
Kasai等[4]首次從螃蟹甲干燥塊根中分離鑒定出3種環(huán)烯醚萜苷類化合物,分別被命名為penste-moside,phloyosidesⅠ,phloyosidesⅡ｡高詠莉等對(duì)螃蟹甲地上部分化學(xué)成分進(jìn)行了分析,通過采用乙醇提取,氯仿､正丁醇依次萃取,然后經(jīng)硅膠柱層析分離純化,進(jìn)一步通過理化常數(shù)和波譜分析確定了5種環(huán)烯醚萜苷類化合物,分別被命名為8-乙酰山梔苷甲酯(8-acetylshanzhiside methyl ester)､山梔苷甲酯(shanzhiside methyl ester)､糙蘇素(phlomiol)､sesamoside､pulchellosideⅠ,上述化合物均為首次從螃蟹甲地上部分中分離得到｡目前,從螃蟹甲中分離鑒定出的8種環(huán)烯醚萜苷類化合物的A環(huán)結(jié)構(gòu)完全一樣,在4位上均有甲酯基取代,B環(huán)在不同取代部位則有較多乙�；�､羥基､甲基,甚至有鹵素的取代｡LI Maoxing等[6]首次從螃蟹甲的干燥根中分離和鑒定出了1種環(huán)烯醚萜苷類成分,被命名為7,8-dehydropenstemoside｡

1.2呋喃拉布素型二萜類化合物
日本學(xué)者Katagiri等從螃蟹甲干燥根中分離鑒定出5種呋喃拉布素型二萜類(furanolabdane-type diterpene)化合物,分別被命名為phlomisosidesⅠ,phlomisosidesⅡ,phlomisosidesⅢ,phlomisosidesⅣ,phlomisosidesⅥ｡趙斌等將螃蟹甲乙酸乙酯提取部位采用不同的色譜方法對(duì)其進(jìn)行分離純化,根據(jù)得到化合物的理化性質(zhì)和光譜數(shù)據(jù)首次鑒定了1種新的呋喃拉布素型二萜類化合物,被命名為糙蘇苷F[15,16-epoxy-8(9),13(16),14-labdatrien-7-ketone-19-oic acid-β-D-gluco pyranosyl ester]｡

1.3黃酮類化合物
范開等采用柱色譜法分離其成分,利用光譜數(shù)據(jù)確定其化學(xué)結(jié)構(gòu),從螃蟹甲的干燥塊根中分離鑒定了1種黃酮苷類化合物,被命名為木犀草素-7-O-葡萄糖苷(luteolin-7-O-β-D-glucopyranoside)｡趙斌從螃蟹甲塊根中分離和鑒定了2種黃酮苷類化合物,分別被命名為木犀草素(luteolin)､山柰酚(kaempferol)｡

1.4苯乙醇苷類化合物
LI Maoxing等采用質(zhì)譜和核磁共振等儀器首次從螃蟹甲的干燥塊根中分離和鑒定出了3種苯乙醇苷類成分,分別被命名為acteoside,alyssonoside,isoac-teoside｡

1.5揮發(fā)油
邊巴次仁等采用氣相色譜-質(zhì)譜(GC-MS)聯(lián)用儀對(duì)西藏產(chǎn)螃蟹甲塊根的揮發(fā)油化學(xué)成分進(jìn)行了分析研究,結(jié)果從分離出的30多個(gè)峰中鑒定出21種化學(xué)成分,主要為各種萜類和脂肪酸類,其中丁香酚､十六烷酸､9,12-(反,反)-十八二烯酸甲酯和愈創(chuàng)醇是螃蟹甲揮發(fā)油的主要成分｡

1.6其他類成分
此外,國(guó)內(nèi)學(xué)者還從螃蟹甲中分離和鑒定出了蒽醌類化合物如大黃酸(rhein)和大黃素(emo-din),生物堿如小檗堿,三萜及甾體類化合物如熊果酸,β-谷甾醇和胡蘿卜苷,脂肪酸類如三十烷酸和三十烷酸對(duì)羥基苯乙酯,糖類如蔗糖和果糖丁苷｡

2藥理活性研究概況

2.1鎮(zhèn)痛和抗炎作用
WANG Qiushi等報(bào)道了螃蟹甲地上部分甲醇提取物的鎮(zhèn)痛､抗炎活性并闡述了其潛在機(jī)制｡鎮(zhèn)痛活性評(píng)價(jià)采用醋酸扭體法和熱板法,抗炎活性的評(píng)價(jià)采用耳腫脹法和毛細(xì)血管通透性實(shí)驗(yàn)｡結(jié)果表明螃蟹甲地上部分甲醇提取物顯示出明顯的抗炎和鎮(zhèn)痛活性,其機(jī)制可能與下調(diào)腫瘤壞死因子-α(TNF-α),白細(xì)胞介素(IL)-6､誘導(dǎo)型一氧化氮合酶(iNOS)和環(huán)氧合酶-2(COX-2)的表達(dá)有關(guān)｡趙斌研究了螃蟹甲石油醚部位､乙酸乙酯部位､正丁醇部位及水部位,發(fā)現(xiàn)螃蟹甲乙酸乙酯和正丁醇提取部位(劑量3,6,12 g/kg)均有較好的抗炎作用｡
張超等以螃蟹甲水提取物(劑量25,50,100 mg/kg)為研究對(duì)象,采用小鼠醋酸扭體法､耳腫脹法､足腫脹法､熱板法及毛細(xì)血管通透性實(shí)驗(yàn)等方法來(lái)觀察其鎮(zhèn)痛､抗炎作用,結(jié)果表明螃蟹甲水提取物能顯著減少小鼠扭體反應(yīng)的次數(shù),且100 mg/kg組能明顯延長(zhǎng)熱板所致的小鼠舔后足的時(shí)間,對(duì)小鼠耳腫脹及足腫脹均有顯著的抑制作用,且能降低毛細(xì)血管的通透性,抑制醋酸所致的小鼠腹腔炎癥滲出,具有較好的鎮(zhèn)痛､抗炎活性｡
趙智等研究了螃蟹甲水提取物對(duì)潰瘍性結(jié)腸炎模型小鼠的抗炎作用,結(jié)果表明螃蟹甲水提取物對(duì)硫酸葡聚糖(DSS)誘導(dǎo)的潰瘍性結(jié)腸炎小鼠具有較好的保護(hù)作用,其作用可能是通過上調(diào)結(jié)腸組織中IL-10的含量來(lái)實(shí)現(xiàn)的｡以上研究表明,螃蟹甲水提取物､乙酸乙酯部位和正丁醇部位可能具有良好的鎮(zhèn)痛､抗炎作用,其具體作用機(jī)制還有待深入研究｡

2.2鎮(zhèn)咳､祛痰､平喘作用
黃小平等比較了螃蟹甲不同提取純化工藝產(chǎn)物的鎮(zhèn)咳､祛痰､平喘作用,采用小鼠氨水引咳法､小鼠酚紅呼吸道排泌法實(shí)驗(yàn)評(píng)價(jià)其鎮(zhèn)咳､祛痰､平喘作用,結(jié)果發(fā)現(xiàn)螃蟹甲不同提取工藝鎮(zhèn)咳､祛痰､平喘作用效果不同,其中工藝一(螃蟹甲飲片1 kg,加8倍量水,冷浸30 min,煎煮1.5 h,過濾,濾渣重復(fù)2次,合并濾液,冷卻至室溫,轉(zhuǎn)移至處理好的D101大孔吸附樹脂柱,先用水洗脫,至洗脫液近無(wú)色,棄水洗脫液,改用80%乙醇洗脫,收集乙醇洗脫液,減壓回收乙醇,濃縮至稠膏,真空干燥,得工藝產(chǎn)物)產(chǎn)物具有良好的鎮(zhèn)咳､祛痰､平喘作用,且提取物易干燥,吸濕性小｡
隨后黃小平等又研究了螃蟹甲不同提取物的鎮(zhèn)咳､祛痰作用,發(fā)現(xiàn)螃蟹甲正丁醇部位能顯著減少小鼠咳嗽次數(shù),減少呼吸道分泌物,是其鎮(zhèn)咳､祛痰的有效部位｡同時(shí),趙斌對(duì)螃蟹甲的鎮(zhèn)咳､祛痰､平喘作用部位進(jìn)行篩選發(fā)現(xiàn),螃蟹甲的乙酸乙酯部位和正丁醇部位都有較好的鎮(zhèn)咳､祛痰､平喘作用,其中鎮(zhèn)咳､祛痰作用以正丁醇部位為佳,平喘作用以乙酸乙酯部位明顯,再次驗(yàn)證了前人的研究工作｡劉敬等對(duì)藏藥螃蟹甲的鎮(zhèn)咳､祛痰､平喘作用的有效部位進(jìn)行篩選研究,發(fā)現(xiàn)螃蟹甲的乙酸乙酯部位和正丁醇部位為其鎮(zhèn)咳､祛痰､平喘的主要有效部位｡劉明蓉等發(fā)現(xiàn)螃蟹甲的總皂苷類成分是其鎮(zhèn)咳､祛痰､平喘的主要有效成分｡

2.3抗菌作用
張大為等從螃蟹甲的葉和莖中分離得到52株內(nèi)生真菌,經(jīng)過分子鑒定,分別屬于Phoma,Chaet-osphaeronema,Fusarium,Leptosphaeria等12屬,其中擬莖點(diǎn)霉屬Phoma為其優(yōu)勢(shì)菌群｡又以原核表達(dá)的可溶型1型人類免疫缺陷病毒(human immunode-ficiency virus type 1,HIV-1)的整合酶(integrase,IN)對(duì)52株內(nèi)生真菌的發(fā)酵產(chǎn)物進(jìn)行體外抗HIV-1整合酶鏈轉(zhuǎn)移反應(yīng)活性試驗(yàn)｡結(jié)果發(fā)現(xiàn),來(lái)自Chaetosphaeronema屬真菌的7個(gè)樣品對(duì)整合酶鏈轉(zhuǎn)移反應(yīng)表現(xiàn)出強(qiáng)烈的抑制作用,其對(duì)應(yīng)的IC 50值分別為6.60,5.20,2.86,7.86,4.47,4.56和3.23μg/mL｡該研究表明,螃蟹甲內(nèi)生真菌在抗HIV-1整合酶活性物質(zhì)方面有進(jìn)一步的開發(fā)價(jià)值｡
杜寶中等研究了螃蟹甲干燥塊根水､乙醇､乙醚提取物體外抗耐亞胺培南銅綠假單胞菌的抗菌活性,結(jié)果發(fā)現(xiàn)其對(duì)標(biāo)準(zhǔn)菌株ATCC27853,25922,25923的最低抑菌濃度(MIC)分別為26.04,52.08,13.02,62.50,125.00,62.50 mg/mL,而且發(fā)現(xiàn)各質(zhì)量濃度乙醚提取物平板上均有菌生｡
水､乙醇提取物對(duì)33株耐亞胺培南銅綠假單胞菌的抑制50%細(xì)菌生長(zhǎng)的最低藥物濃度(MIC 50)及抑制90%細(xì)菌生長(zhǎng)的最低藥物濃度(MIC 90)分別為52.08,6 2.50 mg/mL和104.17,125.00 mg/mL｡證實(shí)了藏藥螃蟹甲干燥塊根水､乙醇提取物對(duì)耐亞胺培南銅綠假單胞菌具有明顯的抗菌作用,而乙醚提取物無(wú)明顯的抗菌作用｡
同時(shí),該課題組還進(jìn)一步研究了同產(chǎn)地螃蟹甲干燥塊根水､乙醇提取物體外葡萄球菌抗菌活性,以微量稀釋法測(cè)定拉薩地區(qū)及林芝地區(qū)產(chǎn)螃蟹甲干燥塊根水､乙醇提取物對(duì)45株葡萄球菌臨床分離株及標(biāo)準(zhǔn)菌株ATCC27853的MIC,MIC 50,MIC 90及滅菌最低濃度(MBC),結(jié)果發(fā)現(xiàn)拉薩產(chǎn)和林芝產(chǎn)螃蟹甲水､乙醇提取物在體外對(duì)金黃色葡萄球菌標(biāo)準(zhǔn)菌株ATCC25923以及45株葡萄球菌臨床分離株均有明顯的抗菌作用｡但不同產(chǎn)地提取物抗菌作用存在一定差異,拉薩產(chǎn)螃蟹甲提取物體外抗菌作用優(yōu)于林芝產(chǎn)螃蟹甲,且同一產(chǎn)地藥材乙醇提取物抗菌作用優(yōu)于水提取物,其原因可能為螃蟹甲抗菌活性成分主要存在于醇提取物之中,證實(shí)了藏藥螃蟹甲干燥塊根水､乙醇提取物對(duì)葡萄球菌具有明顯抗菌作用｡

2.4抗腫瘤作用
謝文利等采用體內(nèi)､體外2種方法研究了藏藥螃蟹甲中環(huán)烯醚萜苷類成分糙蘇素(劑量2.5,5.0,10.0 mg/kg)的抗腫瘤作用及其機(jī)制,采用MTT比色法檢測(cè)糙蘇素對(duì)S180荷瘤小鼠自然殺傷細(xì)胞(NK)殺傷活性的影響和對(duì)S180荷瘤小鼠T淋巴細(xì)胞增殖反應(yīng)的影響｡結(jié)果發(fā)現(xiàn)糙蘇素對(duì)體外培養(yǎng)的人腫瘤細(xì)胞和接種的小鼠腫瘤具有明顯抑制作用,同時(shí)能夠增強(qiáng)淋巴細(xì)胞增殖功能和NK細(xì)胞的殺傷能力,抗腫瘤作用可能是通過抑制腫瘤細(xì)胞的端粒酶活性而實(shí)現(xiàn)的｡

3螃蟹甲的質(zhì)量控制研究概況

3.1螃蟹甲的含量測(cè)定
李茂星等建立了反相高效液相色譜(RP-HPLC)同時(shí)測(cè)定藏藥螃蟹甲中5種環(huán)烯醚萜苷的含量測(cè)定方法,結(jié)果表明該方法簡(jiǎn)便､準(zhǔn)確､重復(fù)性好､結(jié)果穩(wěn)定,可作為螃蟹甲藥材的質(zhì)量控制方法｡同時(shí),張軍莉等建立了螃蟹甲中8-乙酰氧基山梔苷甲酯的高效液相色譜(HPLC)測(cè)定方法,結(jié)果表明該方法簡(jiǎn)便､準(zhǔn)確､專屬性強(qiáng),可用于螃蟹甲藥材中8-乙酰氧基山梔苷甲酯的含量測(cè)定｡
趙斌等采用RP-HPLC法測(cè)定螃蟹甲藥材中山梔苷甲酯的含量,結(jié)果表明該方法簡(jiǎn)便､準(zhǔn)確､重復(fù)性好,可作為螃蟹甲藥材的質(zhì)量控制方法｡李茂星等建立RP-HPLC法同時(shí)測(cè)定藏藥螃蟹甲和其他3種唇形科植物中3個(gè)苯乙醇苷的含量,結(jié)果表明該方法專屬性強(qiáng)､靈敏度高､精確度與重現(xiàn)性好,可作為螃蟹甲藥材的質(zhì)量控制方法｡同時(shí),李茂星等[30]建立測(cè)定獨(dú)一味､螃蟹甲､糙蘇和蘿卜秦艽中5種環(huán)烯醚萜苷含量的HPLC方法,結(jié)果表明該方法簡(jiǎn)便､準(zhǔn)確､重復(fù)性好,可用于分析獨(dú)一味､螃蟹甲､糙蘇和蘿卜秦艽中5種環(huán)烯醚萜苷的含量｡

3.2螃蟹甲的HPLC指紋圖譜
高詠莉等建立螃蟹甲藥材的HPLC指紋圖譜,用于螃蟹甲的品質(zhì)控制及產(chǎn)地鑒別,實(shí)驗(yàn)采用HPLC法對(duì)拉薩､昌都､林芝､那曲､山南､乃東､錯(cuò)那等產(chǎn)地的10批螃蟹甲藥材進(jìn)行HPLC圖譜的比較,以14個(gè)共有峰為評(píng)價(jià)指標(biāo),并對(duì)其中的4個(gè)色譜峰進(jìn)行了指認(rèn)｡結(jié)果表明不同產(chǎn)地的螃蟹甲藥材,化合物shanzhiside methyl ester和sesamoside的峰面積相對(duì)比較穩(wěn)定且峰面積較高,而化合物8-acetyls-hanzhisidemethyl ester和pulchelloside-I的峰面積相對(duì)較小且差異較大｡所以在對(duì)不同產(chǎn)地的螃蟹甲藥材進(jìn)行質(zhì)量評(píng)價(jià)時(shí),應(yīng)將8-acetylshanzhiside methylester或pulchelloside-I作為定性､定量指標(biāo),從而對(duì)不同產(chǎn)地螃蟹甲藥材進(jìn)行更好､更科學(xué)的質(zhì)量評(píng)價(jià)｡

3.3螃蟹甲成方制劑的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)
董海彥建立了藏藥七味螃蟹甲丸(螃蟹甲､訶子､石灰華､甘草､叢菔､檀香和丁香)的質(zhì)量控制方法,實(shí)驗(yàn)采用薄層色譜法對(duì)處方中丁香､檀香進(jìn)行定性鑒別,采用HPLC法測(cè)定訶子中沒食子酸和甘草中甘草酸的含量,結(jié)果表明該方法專屬性強(qiáng)､簡(jiǎn)便可行､重復(fù)性好,可以有效控制七味螃蟹甲丸的內(nèi)在質(zhì)量｡

4結(jié)語(yǔ)

近年來(lái),隨著人們對(duì)藏醫(yī)藥的不斷關(guān)注,有關(guān)藏藥螃蟹甲的研究引起了一些研究者的興趣｡目前,有關(guān)螃蟹甲的研究資料非常有限,化學(xué)成分的研究非常少,對(duì)其化學(xué)成分的研究沒有系統(tǒng)性､完整性;藥理活性的研究也較少,集中在鎮(zhèn)痛､抗炎,鎮(zhèn)咳､祛痰､平喘,抗菌和抗腫瘤方面等,而且發(fā)揮作用的活性物質(zhì)還不明確,相關(guān)藥理作用機(jī)制研究也報(bào)道甚少;有關(guān)質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的研究也沒有建立一個(gè)系統(tǒng)､廣泛､適用的方法;而且其制劑也很簡(jiǎn)單,劑型也少｡
由于螃蟹甲是青藏高原地區(qū)野生植物藥材,主要分布在高海拔､低壓缺氧､強(qiáng)紫外線和長(zhǎng)時(shí)間光照的特殊生態(tài)環(huán)境,筆者推測(cè)其可能具有良好的抗疲勞和耐缺氧活性｡截至目前,通過文獻(xiàn)檢索分析,有關(guān)螃蟹甲野生藥材抗疲勞和耐缺氧活性的研究也未見報(bào)道,筆者認(rèn)為該方面的內(nèi)容應(yīng)該是研究螃蟹甲的一個(gè)重要方向｡隨著對(duì)該藥的不斷深入研究,有可能開發(fā)出一種新型的抗缺氧藥物,為進(jìn)入高原和長(zhǎng)期居住在高原的人群的身體健康提供物質(zhì)保障｡因此,有必要對(duì)藏藥習(xí)用藥材螃蟹甲的各個(gè)方面展開深入研究｡

參考文獻(xiàn):（略）