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鼠傷寒沙門菌ΔsodA缺失株的構建及其對巨噬細胞自噬的影響

發(fā)布時間:2021-04-07 16:57
  鼠傷寒沙門菌作為病原菌,在入侵宿主體內之后會遭遇到宿主出于免疫保護而形成的高活性氧(ROS)內環(huán)境。過量的ROS會對生物體的DNA、蛋白質和脂類等產生毒害作用。超氧化物歧化酶(Superoxide dismutase,SOD)作為唯一可以清除超氧陰離子(·O2-)的抗氧化酶系成員,是細胞抵御ROS脅迫的第一道防線。已有研究表明,SOD參與到細菌的生長、菌膜生成、毒力等方面,但是對于其在鼠傷寒沙門菌中的功能研究,迄今為止還未見報道。因此本實驗通過Red重組系統(tǒng),構建了鼠傷寒沙門菌SM52ΔsodA缺失株和SM52CΔsodA互補株,對其生物學特性以及對巨噬細胞自噬的影響進行探討,并且表達了SodA蛋白,對其酶學性質進行研究。為進一步研究sodA基因的功能以及在細胞自噬過程中的作用奠定良好基礎。主要內容如下:1.鼠傷寒沙門菌ΔsodA缺失株的構建及生物學特性研究利用Red同源重組系統(tǒng)構建鼠傷寒沙門菌sodA基因缺失株SM52ΔsodA以及互補株SM52CΔsodA,并對其生長速度、抗氧化脅迫、運動性、菌膜形成、耐環(huán)境壓力(酸、堿、滲透壓、血清)、ROS測定、酶活性等生物學特性進行研究。結果... 

【文章來源】:河南科技大學河南省

【文章頁數(shù)】:75 頁

【學位級別】:碩士

【部分圖文】:

鼠傷寒沙門菌ΔsodA缺失株的構建及其對巨噬細胞自噬的影響


Cm打靶片段的擴增Fig.2-1PCRproductoftargetingDNA

PCR鑒定,菌液,引物


圖 2-1 Cm 打靶片段的擴增Fig. 2-1 PCR product of targeting DNAM:5000 Marker;泳道1:打靶片段;:Marker DL5000;Lane 1:PCR product of 的構建渾濁狀態(tài)時,使用菌液 PCR 對其進行KD46 鑒定性引物可以擴增出明顯目的46 大小為 888 bp,證明 SM52pKD46

PCR鑒定,片段


圖 2-3 SM52 和 SM52ΔsodA 的外部 PCR 鑒定3 PCR for outside identification of SM52 和 SM5失株外部鑒定;泳道 2:SM52 野生株外部鑒定f SM52ΔsodA;Lane 2:PCR product of SM52;行內部檢測。對 invA 及 sodA 內部片段 sodA 內部片段,證明 SM52ΔsodA::Cm

【參考文獻】:
期刊論文
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碩士論文
[1]木瓜SOD的顆;庸ぜ捌渖飳W效應研究[D]. 趙靖.第三軍醫(yī)大學 2008
[2]玉米超氧化物歧化酶(SOD)提取及純化技術的研究[D]. 王海靈.吉林農業(yè)大學 2007



本文編號:3123840

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