鼠傷寒沙門菌ΔsodA缺失株的構建及其對巨噬細胞自噬的影響
發(fā)布時間:2021-04-07 16:57
鼠傷寒沙門菌作為病原菌,在入侵宿主體內之后會遭遇到宿主出于免疫保護而形成的高活性氧(ROS)內環(huán)境。過量的ROS會對生物體的DNA、蛋白質和脂類等產生毒害作用。超氧化物歧化酶(Superoxide dismutase,SOD)作為唯一可以清除超氧陰離子(·O2-)的抗氧化酶系成員,是細胞抵御ROS脅迫的第一道防線。已有研究表明,SOD參與到細菌的生長、菌膜生成、毒力等方面,但是對于其在鼠傷寒沙門菌中的功能研究,迄今為止還未見報道。因此本實驗通過Red重組系統(tǒng),構建了鼠傷寒沙門菌SM52ΔsodA缺失株和SM52CΔsodA互補株,對其生物學特性以及對巨噬細胞自噬的影響進行探討,并且表達了SodA蛋白,對其酶學性質進行研究。為進一步研究sodA基因的功能以及在細胞自噬過程中的作用奠定良好基礎。主要內容如下:1.鼠傷寒沙門菌ΔsodA缺失株的構建及生物學特性研究利用Red同源重組系統(tǒng)構建鼠傷寒沙門菌sodA基因缺失株SM52ΔsodA以及互補株SM52CΔsodA,并對其生長速度、抗氧化脅迫、運動性、菌膜形成、耐環(huán)境壓力(酸、堿、滲透壓、血清)、ROS測定、酶活性等生物學特性進行研究。結果...
【文章來源】:河南科技大學河南省
【文章頁數(shù)】:75 頁
【學位級別】:碩士
【部分圖文】:
Cm打靶片段的擴增Fig.2-1PCRproductoftargetingDNA
圖 2-1 Cm 打靶片段的擴增Fig. 2-1 PCR product of targeting DNAM:5000 Marker;泳道1:打靶片段;:Marker DL5000;Lane 1:PCR product of 的構建渾濁狀態(tài)時,使用菌液 PCR 對其進行KD46 鑒定性引物可以擴增出明顯目的46 大小為 888 bp,證明 SM52pKD46
圖 2-3 SM52 和 SM52ΔsodA 的外部 PCR 鑒定3 PCR for outside identification of SM52 和 SM5失株外部鑒定;泳道 2:SM52 野生株外部鑒定f SM52ΔsodA;Lane 2:PCR product of SM52;行內部檢測。對 invA 及 sodA 內部片段 sodA 內部片段,證明 SM52ΔsodA::Cm
【參考文獻】:
期刊論文
[1]分子生物學技術在食源性致病菌檢測中的研究進展[J]. 唐廷廷,韓國全,王利娜,肖玲,王成程,文昕. 食品安全質量檢測學報. 2016(09)
[2]多重PCR技術在食源性致病菌檢測中應用的研究進展[J]. 李凡,許恒毅,李福來. 食品工業(yè)科技. 2015(21)
[3]黑脈羊肚菌SOD的純化及特性研究[J]. 侯玉艷,吳素蕊,張麗,趙天瑞,邰麗梅. 食品工業(yè)科技. 2015(15)
[4]兩種檢測SOD酶活性方法的比較[J]. 曲敏,秦麗楠,劉羽佳,范宏臣,朱姝,王金鳳. 食品安全質量檢測學報. 2014(10)
[5]實時熒光定量PCR技術在食源性致病菌檢測中的應用[J]. 李敏,綦國紅. 中國食物與營養(yǎng). 2014(08)
[6]沙門菌分子鑒定和分型方法的研究進展[J]. 王玉平. 中國衛(wèi)生檢驗雜志. 2014(10)
[7]鼠傷寒沙門菌SL1344株ΔcrpΔasd缺失株的構建及生物學特性初步研究[J]. 田芳華,程相朝,張春杰,李銀聚,李靜,張明亮,李小康,李正,趙戰(zhàn)勤. 中國獸醫(yī)學報. 2013(11)
[8]動物血液資源的開發(fā)利用研究進展[J]. 楊葆春,靳義超,李全,吳海玥,賈濮華. 青海畜牧獸醫(yī)雜志. 2011(05)
[9]大蒜超氧化物歧化酶(SOD)的提取及分離純化方法研究綜述[J]. 王志鑫,孔維寶. 甘肅農業(yè)科技. 2010(10)
[10]豬霍亂沙門氏菌C78-1株Δcrp缺失株的構建及其生物學特性初步研究[J]. 郁川,程相朝,趙戰(zhàn)勤,張春杰,李銀聚,吳庭才. 畜牧獸醫(yī)學報. 2010(05)
碩士論文
[1]木瓜SOD的顆;庸ぜ捌渖飳W效應研究[D]. 趙靖.第三軍醫(yī)大學 2008
[2]玉米超氧化物歧化酶(SOD)提取及純化技術的研究[D]. 王海靈.吉林農業(yè)大學 2007
本文編號:3123840
【文章來源】:河南科技大學河南省
【文章頁數(shù)】:75 頁
【學位級別】:碩士
【部分圖文】:
Cm打靶片段的擴增Fig.2-1PCRproductoftargetingDNA
圖 2-1 Cm 打靶片段的擴增Fig. 2-1 PCR product of targeting DNAM:5000 Marker;泳道1:打靶片段;:Marker DL5000;Lane 1:PCR product of 的構建渾濁狀態(tài)時,使用菌液 PCR 對其進行KD46 鑒定性引物可以擴增出明顯目的46 大小為 888 bp,證明 SM52pKD46
圖 2-3 SM52 和 SM52ΔsodA 的外部 PCR 鑒定3 PCR for outside identification of SM52 和 SM5失株外部鑒定;泳道 2:SM52 野生株外部鑒定f SM52ΔsodA;Lane 2:PCR product of SM52;行內部檢測。對 invA 及 sodA 內部片段 sodA 內部片段,證明 SM52ΔsodA::Cm
【參考文獻】:
期刊論文
[1]分子生物學技術在食源性致病菌檢測中的研究進展[J]. 唐廷廷,韓國全,王利娜,肖玲,王成程,文昕. 食品安全質量檢測學報. 2016(09)
[2]多重PCR技術在食源性致病菌檢測中應用的研究進展[J]. 李凡,許恒毅,李福來. 食品工業(yè)科技. 2015(21)
[3]黑脈羊肚菌SOD的純化及特性研究[J]. 侯玉艷,吳素蕊,張麗,趙天瑞,邰麗梅. 食品工業(yè)科技. 2015(15)
[4]兩種檢測SOD酶活性方法的比較[J]. 曲敏,秦麗楠,劉羽佳,范宏臣,朱姝,王金鳳. 食品安全質量檢測學報. 2014(10)
[5]實時熒光定量PCR技術在食源性致病菌檢測中的應用[J]. 李敏,綦國紅. 中國食物與營養(yǎng). 2014(08)
[6]沙門菌分子鑒定和分型方法的研究進展[J]. 王玉平. 中國衛(wèi)生檢驗雜志. 2014(10)
[7]鼠傷寒沙門菌SL1344株ΔcrpΔasd缺失株的構建及生物學特性初步研究[J]. 田芳華,程相朝,張春杰,李銀聚,李靜,張明亮,李小康,李正,趙戰(zhàn)勤. 中國獸醫(yī)學報. 2013(11)
[8]動物血液資源的開發(fā)利用研究進展[J]. 楊葆春,靳義超,李全,吳海玥,賈濮華. 青海畜牧獸醫(yī)雜志. 2011(05)
[9]大蒜超氧化物歧化酶(SOD)的提取及分離純化方法研究綜述[J]. 王志鑫,孔維寶. 甘肅農業(yè)科技. 2010(10)
[10]豬霍亂沙門氏菌C78-1株Δcrp缺失株的構建及其生物學特性初步研究[J]. 郁川,程相朝,趙戰(zhàn)勤,張春杰,李銀聚,吳庭才. 畜牧獸醫(yī)學報. 2010(05)
碩士論文
[1]木瓜SOD的顆;庸ぜ捌渖飳W效應研究[D]. 趙靖.第三軍醫(yī)大學 2008
[2]玉米超氧化物歧化酶(SOD)提取及純化技術的研究[D]. 王海靈.吉林農業(yè)大學 2007
本文編號:3123840
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