植物激素乙烯在果實(shí)成熟和衰老過(guò)程中發(fā)揮重要的作用,通過(guò)乙烯信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑來(lái)引起乙烯反應(yīng),使果實(shí)在色澤、質(zhì)地、風(fēng)味和香氣等方面發(fā)生顯著的變化。乙烯應(yīng)答因子（Ethylene-responsive factors,ERFs）是乙烯信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑中的下游組分,可以認(rèn)別和結(jié)合靶基因5’上游啟動(dòng)子順式作用元件GCC盒,從而調(diào)節(jié)多種功能基因的表達(dá)來(lái)調(diào)控果實(shí)的發(fā)育。本研究從甜瓜品種河套蜜瓜成熟果實(shí)中克隆得到CmERFⅤ-4、CmERFⅢ-15基因cDNA,大小分別為554 bp、672bp,并分別構(gòu)建了超表達(dá)載體pPZP221（35S-ERFV-4-NOS）、pPZP221 （35S-ERFⅢ-15-NOS）（?）RNAi載體pART27-ERFV-4、pART27-ERFⅢ-15。實(shí)時(shí)熒光定量PCR檢測(cè)結(jié)果表明,CmERFV-4基因相對(duì)于其他組織在根中的表達(dá)量最高,相對(duì)于果實(shí)其它發(fā)育時(shí)期在40天時(shí)的表達(dá)量最高,而CmERFⅢ-15基因相對(duì)于其他組織在葉子中的表達(dá)量最高,相對(duì)于果實(shí)其它發(fā)育時(shí)期在40天時(shí)的表達(dá)量最高。通過(guò)農(nóng)桿菌介導(dǎo)的瞬時(shí)表達(dá)技術(shù),將含超表達(dá)載體和RNAi載體的農(nóng)桿菌菌液注射到果實(shí)中,注射... 

【文章來(lái)源】：內(nèi)蒙古大學(xué)內(nèi)蒙古自治區(qū) 211工程院校

【文章頁(yè)數(shù)】：67 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

圖１．２農(nóng)桿菌介導(dǎo)的瞬時(shí)表達(dá)技術(shù)流程??Ｆｉｇ．?１．２?Ａｇｒｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ－ｍｅｄｉａｔｅｄ?ｔｒａｎｓｉｅｎｔ?ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ?ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ?ｐｒｏｃｅｄｕｒｅ??，、、、、

田間試臉

?Ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ?ｏｒｇａｎｉｚａｔｉｏｎｓ??圖３．名ＣｍＥＲＦＶ－４基因在甜瓜不同組織中的?圖３．９?Ｏｗ￡Ｍ／／／－／５基因在甜瓜不同組織中的??ＲＴ－ｑＰＣＲ?檢測(cè)?ＲＴ－ｑＰＣＲ?檢測(cè)??Ｆｉｇ．?３．８?ＲＴ－ｑＰＣＲ?ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ?ｏｆ?ＣｍＥＲＦＶ－４?ｇｅｎｅ?ｉｎ?Ｆｉｇ．?３．９?ＲＴ－ｑＰＣＲ?ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ?ｏｆ?ＣｍＥＲＦＩＩｌ－１５?ｇｅｎｅ?ｉｎ??ｍｅｌｏｎ?ｗｉｔｈ?ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ?ｏｒｇａｎｉｚａｔｉｏｎｓ?ｍｅｌｏｎ?ｗｉｔｈ?ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ?ｏｒｇａｎｉｚａｔｉｏｎｓ??３．２．２基因在果實(shí)不同發(fā)育階段的表達(dá)特性分析??實(shí)時(shí)焚光定量ＰＣＲ分析結(jié)果表明（圖３．１０－３．１１），ＣｍＥＲＦＹ－ｒｎ因在甜瓜授粉后１０－２０天時(shí)，??轉(zhuǎn)錄水平?jīng)]有顯著變化，表達(dá)水平較低，變化幅度較小。在授粉后第３０天時(shí)，基因的表達(dá)量??開始上升，且在授粉后第４０天時(shí)，基因的表達(dá)量達(dá)到最高，表達(dá)量分別為授粉后第１０天的３０??倍，第２０天的１０倍，第３０天的５倍。Ｏｗ以Ｆ／／／－／５基因在甜瓜授粉后１０－２０天時(shí)，表達(dá)量逐漸上??升


本文編號(hào)：3066173