雙功能磁性熒光微球是指具有超順磁性及熒光兩重特性的聚合物微球。表面修飾生物識別元件的磁性熒光微球可與目標物特異性結合,使目標物具有熒光及磁信號,已被較多地應用于生物組織雙信號成像。在分析檢測領域,磁性熒光微球可同時應用于磁富集凈化和制備熒光（磁）探針,實現復雜樣品中痕量待測物的檢測。循環(huán)腫瘤細胞（circulating tumor cells,CTCs）是癌癥（轉移）早期診斷及預后的重要生物指標。由于癌癥轉移早期患者血液中CTC含量極低,且復雜的血液成分會干擾CTC的分離檢測,臨床檢測中常采用磁性微球分離富集CTCs。本研究建立了在氨基化磁性硅球表面一步直接自組裝羧基化量子點（quantum dots,QDs）制備雙功能磁性熒光微球（magnetic fluorescent beads,MFBs）的新方法。該方法可簡便、快速地制備磁性熒光微球。通過優(yōu)化自組裝體系中乙醇含量、溶液pH值及量子點用量等因素調控納米粒子間的自組裝效率,本研究制備得到粒徑約180 nm,具有較好熒光強度及分散性的水溶性雙功能磁性熒光微球。應用鏈霉親和素修飾的磁性熒光微球及生物素化EpCAM抗體,本研究成功實現了人...

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【學位級別】：博士

【文章目錄】：
摘要
ABSTRACT
縮略語(Abbreviations)
第1章 引言
    1.1 生物識別元件功能化磁性材料在樣品檢測中的應用
        1.1.1 功能化磁性微納米材料在真菌毒素檢測中的應用
        1.1.2 生物識別元件功能化磁性材料在循環(huán)腫瘤細胞檢測分析中的應用
    1.2 磁性微納米材料在免疫層析試紙條檢測中的應用
        1.2.1 磁性材料作為吸附劑在ICA中的應用
        1.2.2 磁性材料作為信號探針在ICA中的應用
    1.3 熒光材料在免疫層析試紙條檢測中的應用
        1.3.1 熒光分子摻雜微球
        1.3.2 上轉換熒光納米材料
        1.3.3 鑭系元素螯合/摻雜材料
        1.3.4 量子點微球
    1.4 雙功能磁性熒光材料在ICA檢測中的應用
        1.4.1 基于磁性熒光材料ICA方法的優(yōu)勢及其研究進展
        1.4.2 基于QDs的磁性熒光材料合成
        1.4.3 用于ICA檢測的磁性熒光材料性能要求及可能的解決方法
    1.5 主要研究內容與意義
        1.5.1 研究內容
        1.5.2 研究意義
第2章 表層自組裝法合成磁性熒光微球及其在癌細胞標記中的初步應用
    2.1 主要試劑材料與儀器設備
        2.1.1 試劑材料
        2.1.2 儀器設備
    2.2 實驗方法與步驟
        2.2.1 表層自組裝法合成磁性熒光微球
        2.2.2 磁性熒光微球捕獲探針的制備
        2.2.3 人乳腺癌細胞MCF-7 的培養(yǎng)及染色
        2.2.4 磁性熒光探針捕獲癌細胞
    2.3 結果與討論
        2.3.1 氨基化磁性硅球的合成及表征
        2.3.2 自組裝磁性熒光微球的制備及表征
        2.3.3 自組裝磁性熒光微球在人乳腺癌細胞磁捕獲及成像中的初步應用
    2.4 本章小結
第3章基于磁性熒光微球的免疫層析方法高靈敏檢測黃曲霉毒素B1

    3.1 主要試劑材料與儀器設備
        3.1.1 試劑材料
        3.1.2 儀器設備
    3.2 實驗方法與步驟
        3.2.1 磁性熒光微球的制備及表征
        3.2.2 AFB1 單抗標記MFB及標記量優(yōu)化
        3.2.3 試紙條的研制
        3.2.4 基于MFB的免疫層析檢測流程
        3.2.5 老抽醬油的樣品前處理條件優(yōu)化
        3.2.6 AFB₁加標醬油樣品及加標醬油提取液樣品的配制
        3.2.7 基于MFB的競爭免疫層析檢測條件優(yōu)化
        3.2.8 MFB-ICA檢測性能評價
        3.2.9 超高效液相結合熒光檢測器檢測醬油中AFB₁

    3.3 結果與討論
        3.3.1 MFB和 MFB-mAb的表征
        3.3.2 MFB-mAbs探針制備
        3.3.3 制備基于MFB的免疫層析試紙條
        3.3.4 老抽醬油的樣品前處理
        3.3.5 優(yōu)化試紙條檢測條件
        3.3.6 MFB-ICA熒光定量檢測性能的評價
        3.3.7 MFB-ICA方法實用性評價
    3.4 本章小結
第4章 基于磁性熒光微球的免疫層析試紙條高靈敏檢測HIV p24蛋白
    4.1 主要試劑材料與儀器設備
        4.1.1 試劑材料
        4.1.2 儀器設備
    4.2 實驗方法與步驟
        4.2.1 磁性熒光微球的制備及表征
        4.2.2 試紙條的組裝
        4.2.3 抗HIV p24 單抗標記MFB條件優(yōu)化
        4.2.4 基于MFB的夾心免疫層析檢測條件優(yōu)化
        4.2.5 基于MFB的免疫層析檢測流程
        4.2.6 免疫磁富集效應對MFB-ICA檢測靈敏度的影響
        4.2.7 MFB-ICA的血清中HIV p24 檢測性能評價
    4.3 結果與討論
        4.3.1 MFB和 MFB-mAb的表征
        4.3.2 MFB-mAb₁探針制備
        4.3.3 優(yōu)化免疫層析試紙條制備參數
        4.3.4 優(yōu)化MFB-ICA檢測參數
        4.3.5 免疫磁富集效應對MFB-ICA檢測靈敏度的影響
        4.3.6 免疫磁回收對基質干擾的影響
        4.3.7 MFB-ICA熒光定量檢測性能評價
    4.4 本章小結
第5章 結論與展望
    5.1 結論
        5.1.1 表層自組裝法合成磁性熒光微球及在癌細胞標記中的初步應用
        5.1.2 磁性熒光微球的制備
        5.1.3 基于磁性熒光微球的小分子待測物高靈敏競爭熒光ICA的研究
        5.1.4 基于磁性熒光微球的大分子待測物高靈敏夾心熒光ICA的研究
    5.2 展望
致謝
參考文獻
附錄A 本文所用緩沖溶液的配制方案
附錄B 儀器設備
個人介紹
攻讀學位期間的研究成果



本文編號：4046709

boshi