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定向誘導去分化脂肪(d-DFAT)細胞對大鼠面神經(jīng)缺損的修復作用

發(fā)布時間:2024-04-03 03:18
  面神經(jīng)損傷是口腔頜面外科臨床上一種常見且較為嚴重的創(chuàng)傷并發(fā)癥之一,常伴隨腮腺區(qū)域的外傷及手術(shù)相關(guān)創(chuàng)傷,進而導致面神經(jīng)麻痹。繼發(fā)于面神經(jīng)損傷后引起的周圍性面神經(jīng)麻痹,是一種既影響患者面部運動功能(鼓腮無力,眼瞼不能閉合等)又影響美觀(口角歪斜,鼻唇溝消失等)的嚴重疾病,會給患者及家人帶來了社交、審美等心理、精神障礙。近年來,隨著組織工程和再生醫(yī)學(Tissue engineering and regenerative medicine,TE/RM)飛速發(fā)展,針對長間斷面神經(jīng)缺損的問題研究出一系列組織工程神經(jīng)移植物(Tissue engineered nerve grafts,TENGs),其包含神經(jīng)導管支架、支持細胞(種子細胞)、神經(jīng)營養(yǎng)因子、細胞外基質(zhì)以及細胞粘附分子等成分,通過模擬自體神經(jīng)移植物的結(jié)構(gòu)及生物學特點,建立理想的再生微環(huán)境以更好地促進再生神經(jīng)軸突由近端向遠端生長并再支配靶器官。臨床上,脂肪組織可以通過反復使用安全、微創(chuàng)的吸脂術(shù)獲得,因此其成為理想的種子細胞來源。成熟脂肪細胞是脂肪組織中最豐富的細胞類型,其占脂肪組織的90%以上。從脂肪組織中分離出的成熟脂肪細胞可以通過體外...

【文章頁數(shù)】:103 頁

【學位級別】:博士

【文章目錄】:
摘要
abstract
引言
第1章 DFAT細胞和ASCs的分離、培養(yǎng)及鑒定
    1.1 概述
    1.2 材料與方法
        1.2.1 實驗動物
        1.2.2 實驗試劑
        1.2.3 實驗器械
        1.2.4 相關(guān)試劑
        1.2.5 方法
    1.3 結(jié)果
        1.3.1 DFAT細胞及ASCs的體外培養(yǎng)及傳代
        1.3.2 DFAT細胞及ASCs成骨、成脂誘導結(jié)果
        1.3.3 DFAT細胞及ASCs圖像流式鑒定結(jié)果
    1.4 討論
    1.5 結(jié)論
第2章 脂肪來源干細胞誘導成類雪旺樣細胞
    2.1 概述
    2.2 材料與方法
        2.2.1 實驗試劑
        2.2.2 實驗器械
        2.2.3 相關(guān)試劑
        2.2.4 方法
    2.3 結(jié)果
        2.3.1 DFAT細胞及ASCs誘導過程中細胞形態(tài)變化
        2.3.2 類雪旺樣細胞(d-DFAT細胞、d-ASCs)的鑒定
    2.4 討論
    2.5 結(jié)論
第3部分 脂肪組織來源種子細胞與生物凝膠復合神經(jīng)導管修復大鼠面神經(jīng)頰支缺損的研究
    3.1 概述
    3.2 材料與方法
        3.2.1 實驗動物
        3.2.2 實驗試劑
        3.2.3 實驗器械
        3.2.4 相關(guān)試劑
        3.2.5 方法
    3.3 結(jié)果
        3.3.1 實驗動物情況
        3.3.2 觸須運動評估
        3.3.3 神經(jīng)電生理評估
        3.3.4 甲苯胺藍染色
        3.3.5 NF-200+GFAP+β-TubulinⅢ染色
    3.4 討論
    3.5 結(jié)論
第4部分 構(gòu)建3D定向誘導去分化脂肪(d-DFAT)細胞聚合體
    4.1 概述
    4.2 材料與方法
        4.2.1 實驗試劑
        4.2.2 實驗器械
        4.2.3 相關(guān)試劑
        4.2.4 方法
    4.3 結(jié)果
        4.3.1 3D d-DFAT細胞聚合體形成情況
        4.3.2 3D d-DFAT細胞聚合體的組織學評估
    4.4 討論
    4.5 結(jié)論
總結(jié)與展望
致謝
參考文獻
攻讀學位期間的研究成果
綜述
    參考文獻



本文編號:3946633

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