背景:主動(dòng)脈夾層(aortic dissection,AD)是心血管疾病中較為兇險(xiǎn)的一種疾病,其發(fā)病急進(jìn)展快,一經(jīng)發(fā)現(xiàn)需要立即給予醫(yī)療處理,否則會(huì)出現(xiàn)致命性風(fēng)險(xiǎn)。AD的主要發(fā)病原因是血液由血管的內(nèi)膜破口進(jìn)入血管中層,在血壓的驅(qū)動(dòng)下在血管夾層中向前流動(dòng)從而撕裂血管。臨床常見(jiàn)的癥狀為突發(fā)的前胸及后背部劇烈的疼痛。主動(dòng)脈夾層常見(jiàn)的發(fā)病因素包括遺傳性因素如馬凡綜合癥,Ehlers-Danlos綜合癥,和非遺傳性因素如主動(dòng)脈中層囊性壞死、高血壓、動(dòng)脈粥樣硬化、梅毒性大動(dòng)脈炎、創(chuàng)傷性動(dòng)脈瘤等,其中高血壓被認(rèn)為是最主要的誘發(fā)因素。目前關(guān)于主動(dòng)脈夾層的具體發(fā)病機(jī)制尚無(wú)明確定論,主要認(rèn)為和血管中層平滑肌細(xì)胞增殖和凋亡失衡有關(guān)。已有研究表明,主動(dòng)脈夾層組織中血管平滑肌的增殖程度明顯高于正常人的升主動(dòng)脈組織,并通過(guò)一系列體內(nèi)和體外實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證編碼平滑肌細(xì)胞收縮的標(biāo)志蛋白增高/減低對(duì)主動(dòng)脈血管平滑肌細(xì)胞增殖的影響。當(dāng)前這一災(zāi)難性疾病尚缺乏早期有效的診斷措施,特別是血清學(xué)診斷標(biāo)志物,目前尚無(wú)集特異性和敏感性一體的AD血清診療標(biāo)志物。大部分AD患者仍是通過(guò)發(fā)病后行主動(dòng)脈血管造影來(lái)明確診斷。但因臨床以胸背部疼痛為首發(fā)癥...

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【學(xué)位級(jí)別】：博士

【文章目錄】：
中文摘要
Abstract
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綜述 長(zhǎng)鏈非編碼RNA在心血管疾病中的研究進(jìn)展
    參考文獻(xiàn)
第1章 緒論
第2章 主動(dòng)脈夾層升主動(dòng)脈組織特點(diǎn)及增殖型血管平滑肌細(xì)胞模型誘導(dǎo)
    概述
    2.1 實(shí)驗(yàn)材料
        2.1.1 主動(dòng)脈夾層患者入組及對(duì)照體系建立
        2.1.2 實(shí)驗(yàn)試劑
        2.1.3 實(shí)驗(yàn)儀器
    2.2 方法
        2.2.1 升主動(dòng)脈組織HE染色法
        2.2.2 升主動(dòng)脈組織免疫組化
    2.3 結(jié)果
        2.3.1 入組患者信息
        2.3.2 血管形態(tài)學(xué)特點(diǎn)
        2.3.3 人升主動(dòng)脈血管平滑肌細(xì)胞增殖型細(xì)胞模型誘導(dǎo)
    2.4 討論
    2.5 小結(jié)
第3章 主動(dòng)脈夾層患者升主動(dòng)脈血管平滑肌細(xì)胞長(zhǎng)鏈非編碼RNA和m RNA表達(dá)譜的研究
    概述
    3.1 實(shí)驗(yàn)材料
        3.1.1 實(shí)驗(yàn)試劑
        3.1.2 實(shí)驗(yàn)儀器
        3.1.3 lncRNA和 m RNA芯片信息
    3.2 方法
        3.2.1 實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組組織RNA提取
        3.2.2 lncRNA和 m RNA基因芯片檢測(cè)
        3.2.3 基因芯片實(shí)時(shí)定量PCR驗(yàn)證
        3.2.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析
    3.3 結(jié)果
        3.3.1 升主動(dòng)脈樣本檢測(cè)
        3.3.2 RNA瓊脂糖凝膠電泳
        3.3.3 標(biāo)記效率質(zhì)控
        3.3.4 lncRNA和 mRNA高通量基因芯片結(jié)果
        3.3.5 lncRNA和 mRNA高通量基因芯片原始和矯正結(jié)果
        3.3.6 差異表達(dá)lncRNA高通量基因芯片結(jié)果篩選
        3.3.7 差異表達(dá)m RNA高通量基因芯片結(jié)果篩選
        3.3.8 實(shí)時(shí)定量PCR驗(yàn)證lncRNA和 mRNA高通量基因芯片準(zhǔn)確性
    3.4 討論
第4章 主動(dòng)脈夾層患者升主動(dòng)脈平滑肌組織差異表達(dá)lncRNA和 mRNA的現(xiàn)代高通量生物信息學(xué)分析
    概述
    4.1 生物信息學(xué)研究工具
    4.2 研究方法
        4.2.1 差異表達(dá)m RNA高通量基因芯片現(xiàn)代生物信息學(xué)分析
        4.2.2 差異表達(dá)lncRNA和 miRNA ceRNA調(diào)控網(wǎng)絡(luò)構(gòu)建
        4.2.3 韋恩分析
    4.3 結(jié)果
        4.3.1 交叉融合分析主動(dòng)脈夾層基因測(cè)序
        4.3.2 共同表達(dá)差異基因富集分析
        4.3.3 共表達(dá)差異基因蛋白互作網(wǎng)絡(luò)
        4.3.4 主動(dòng)脈夾層核心發(fā)病基因預(yù)測(cè)
        4.3.5 lncRNA及 miRNA預(yù)測(cè)以及韋恩分析
        4.3.6 lncRNA及miRNA以及mRNA調(diào)控網(wǎng)絡(luò)
    4.4 討論
第5章 linc01278 在主動(dòng)脈夾層血管平滑肌細(xì)胞增殖及表型轉(zhuǎn)化過(guò)程中的分子機(jī)制
    概述
    5.1 實(shí)驗(yàn)材料
        5.1.1 實(shí)驗(yàn)試劑
        5.1.2 實(shí)驗(yàn)儀器
    5.2 實(shí)驗(yàn)方法
        5.2.1熒光原位雜交實(shí)驗(yàn)
        5.2.2 linc01278 干擾實(shí)驗(yàn)
        5.2.3 linc01278 過(guò)表達(dá)實(shí)驗(yàn)
        5.2.4 細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)
        5.2.5 細(xì)胞遷移實(shí)驗(yàn)
    5.3 結(jié)果
        5.3.1 熒光原位雜交確認(rèn)linc01278 位于細(xì)胞質(zhì)中
        5.3.2 敲低linc01278 后主動(dòng)脈夾層血管平滑肌細(xì)胞發(fā)生表型轉(zhuǎn)換
        5.3.3 過(guò)表達(dá)linc01278 后主動(dòng)脈夾層血管平滑肌細(xì)胞發(fā)生表型轉(zhuǎn)換
    5.4 討論
第6章 miR-500b-5p與 linc01278和ACTG2 結(jié)合位點(diǎn)驗(yàn)證
    概述
    6.1 實(shí)驗(yàn)材料
        6.1.1 實(shí)驗(yàn)試劑
        6.1.2 實(shí)驗(yàn)儀器
        6.1.3 熒光素酶報(bào)告基因質(zhì)粒
    6.2 實(shí)驗(yàn)方法
        6.2.1 linc01278和ACTG2 結(jié)合位點(diǎn)序列合成
        6.2.2 將位點(diǎn)序列插入熒光素酶報(bào)告基因質(zhì)粒
        6.2.3 將帶有目的序列的pGL6-miR質(zhì)粒轉(zhuǎn)染293T細(xì)胞
        6.2.4 螢光素酶報(bào)告基因檢測(cè)
        6.2.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析
    6.3 結(jié)果
        6.3.1 linc01278與miR-500b-5p結(jié)合位點(diǎn)驗(yàn)證
        6.3.2 ACTG2與miR-500b-5p的結(jié)合位點(diǎn)驗(yàn)證
    6.4 討論
第7章 結(jié)論
創(chuàng)新點(diǎn)與不足之處
參考文獻(xiàn)
作者簡(jiǎn)介及在學(xué)期間所取得的科研成果
致謝



本文編號(hào)：3823816