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聚集誘導(dǎo)發(fā)光核酸探針在癌癥的檢測和光動力治療中的應(yīng)用

發(fā)布時間:2023-05-30 22:53
  熒光材料的研究推進(jìn)了科技的發(fā)展,也使得我們能夠獲取更多的知識。尤其是利用熒光材料,我們可以更好的了解生化過程以及生物分子的功能。然而,傳統(tǒng)的熒光材料在高濃度或者團(tuán)聚后,其受聚集誘導(dǎo)猝滅(ACQ)的影響導(dǎo)致熒光猝滅。為了防止受熒光材料團(tuán)聚引起熒光猝滅的影響,傳統(tǒng)的熒光材料用于生物領(lǐng)域時,需要其在水溶液中有良好的溶解性。通過在熒光團(tuán)引入極性基團(tuán)的策略增加染料在水溶液中的溶解性。然而,由于傳統(tǒng)的熒光材料本身含有疏水的苯環(huán)容易引起染料在水溶液中團(tuán)聚,所以在水溶液中傳統(tǒng)熒光材料團(tuán)聚后,熒光依然會發(fā)生減弱甚至是猝滅的現(xiàn)象。最近發(fā)展的聚集誘導(dǎo)發(fā)光材料在良溶劑呈單分散狀態(tài)時熒光很弱,而聚集后由于分子內(nèi)的轉(zhuǎn)動受阻熒光增強。盡管基于聚集誘導(dǎo)發(fā)光材料報道了一系列探針用于檢測以及光動力治療。但是聚集誘導(dǎo)發(fā)光材料用于生命分析和治療及與其它治療方法聯(lián)合用于癌癥治療的研究還是相對較少。本課題以聚集誘導(dǎo)發(fā)材料為中心,利用聚集誘導(dǎo)發(fā)光材料獨有的聚集誘導(dǎo)發(fā)光特性以及聚集誘導(dǎo)發(fā)光材料可以作為光敏劑的優(yōu)點,發(fā)展了基于聚集誘導(dǎo)發(fā)光材料用于診斷和治療的方法,拓展了聚集誘導(dǎo)發(fā)光材料的生物應(yīng)用。具體研究內(nèi)容包括以下三個方面:(1)聚...

【文章頁數(shù)】:132 頁

【學(xué)位級別】:博士

【文章目錄】:
摘要
Abstract
1 緒論
    1.1 引言
    1.2 聚集誘導(dǎo)發(fā)光材料在生物體系中的應(yīng)用
        1.2.1 檢測
        1.2.3 治療
    1.3 本文主要研究內(nèi)容
    1.4 參考文獻(xiàn)
2 基于DNA-AIE探針檢測組織中MnSOD mRNA和預(yù)后分析
    2.1 引言
    2.2 實驗部分
        2.2.1 試劑
        2.2.2 儀器
        2.2.3 凝膠電泳實驗
        2.2.4 TPE-R-N3 的合成
        2.2.5 TPE-R-DNA的合成
        2.2.6 細(xì)胞培養(yǎng)
        2.2.7 細(xì)胞毒性
        2.2.8 細(xì)胞內(nèi)MnSOD mRNA的檢測
        2.2.9 激光共聚焦熒光成像
        2.2.10 熒光定量PCR
        2.2.11 臨床樣本分析
        2.2.12 組織學(xué)分析
    2.3 結(jié)果與討論
        2.3.1 TPE-R-DNA的合成與設(shè)計機理
        2.3.2 TPE-R-DNA的表征
        2.3.3 可行性分析
        2.3.4 TPE-R-DNA體外檢測MnSOD mRNA
        2.3.5 熒光成像
        2.3.6 組織中的MnSOD mRNA成像
    2.4 本章小結(jié)
    2.5 參考文獻(xiàn)
3 基于MnO2-核酸酶-AIE光敏劑復(fù)合物用于細(xì)胞選擇性成像和光動力-基因聯(lián)合治療
    3.1 引言
    3.2 實驗部分
        3.2.1 試劑
        3.2.2 儀器
        3.2.3 MnO2 納米片的合成
        3.2.4 MnO2-核酸酶-TB納米復(fù)合物的合成
        3.2.5 體外酶切反應(yīng)
        3.2.6 凝膠電泳實驗
        3.2.7 免疫印跡實驗
        3.2.8 體外治療
        3.2.9 單線態(tài)氧的測定
        3.2.10 細(xì)胞培養(yǎng)
        3.2.11 激光共聚焦熒光成像
        3.2.12 細(xì)胞中的單線態(tài)氧的測定
        3.2.13 定量PCR
        3.2.14 免疫熒光實驗
        3.2.15 細(xì)胞毒性測定
        3.2.16 活體實驗
        3.2.17 體內(nèi)光動力治療
        3.2.18 MDT納米材料毒性評估
        3.2.19 免疫組化染色
    3.3 結(jié)果與討論
        3.3.1 MnO2 納米片合成與表征
        3.3.2 MnO2 納米片負(fù)載TB和核酸酶
        3.3.3 MDT溶液實驗
        3.3.4 MDT細(xì)胞內(nèi)可行性研究
        3.3.5 活體實驗
    3.4 本章小結(jié)
    3.5 參考文獻(xiàn)
4 基于關(guān)-開型AIE探針檢測端粒酶及端粒酶響應(yīng)的光動力治療
    4.1 引言
    4.2 實驗部分
        4.2.1 試劑
        4.2.2 儀器
        4.2.3 化合物的合成
        4.2.4 單線態(tài)氧的測定
        4.2.5 細(xì)胞培養(yǎng)
        4.2.6 端粒酶的提取
        4.2.7 激光共聚焦熒光成像
        4.2.8 體外光動力實驗
    4.3 結(jié)果與討論
        4.3.1 SSNB的合成及SSNB的光學(xué)性質(zhì)
        4.3.2 SSNB體外檢測端粒酶
        4.3.3 細(xì)胞內(nèi)檢測端粒酶
        4.3.4 原位成像
        4.3.5 端粒酶激活光動力治療
    4.4 本章小結(jié)
    4.5 參考文獻(xiàn)
5 總結(jié)與展望
    5.1 研究內(nèi)容總結(jié)
    5.2 主要創(chuàng)新點
    5.3 下一步工作展望
致謝
附錄1 攻讀博士學(xué)位期間發(fā)表的論文目錄
附錄2 化合物譜圖
博士學(xué)位論文創(chuàng)新點概述



本文編號:3825192

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