第一部分未成熟腦SC后不同時(shí)期海馬神經(jīng)發(fā)生和Notch信號(hào)途徑的動(dòng)態(tài)演變特征目的:探索未成熟腦在驚厥持續(xù)狀態(tài)（Status convulsion,SC）后不同時(shí)期海馬區(qū)神經(jīng)干細(xì)胞（Neural stem cells,NSCs）增殖、遷移、分化的動(dòng)態(tài)演變過(guò)程,明確Notch信號(hào)途徑在SC后不同時(shí)期的變化特點(diǎn)。方法:選取20日齡的健康雄性Sprague-Dawley（SD）大鼠120只,隨機(jī)分為SC模型組60只和正常對(duì)照組60只。采用氯化鋰-匹羅卡品腹腔注射誘導(dǎo)建立SC模型,進(jìn)行如下實(shí)驗(yàn):（1）用Ki67標(biāo)記細(xì)胞增殖狀態(tài),免疫熒光染色檢測(cè)SC后1d、3d、60d時(shí)海馬齒狀回（dentategyrus,DG）中細(xì)胞增殖情況。（2）SC模型建立后腹腔注射Brd U標(biāo)記NSCs,于SC后7天免疫熒光染色檢測(cè)Brd U分布情況,分析NSCs的遷移情況。（3）于SC后28天熒光染色雙標(biāo)Brd U和GFAP或雙標(biāo)Brd U和Neu N,以檢測(cè)NSCs分化為星型膠質(zhì)細(xì)胞和神經(jīng)元的情況。（4）免疫印跡法檢測(cè)SC后7d、28d、60d海馬Neu N和GFAP蛋白的表達(dá)。（5）尼氏染色分析SC后28d海馬神經(jīng)... 

【文章來(lái)源】：重慶醫(yī)科大學(xué)重慶市

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【學(xué)位級(jí)別】：博士

【部分圖文】：

動(dòng)物分組及實(shí)驗(yàn)流程

重慶醫(yī)科大學(xué)博士研究生學(xué)位論文46對(duì)照組，第3天增加更加明顯。而在SC后60天，SC組Ki67陽(yáng)性細(xì)胞的數(shù)量迅速減少，顯著低于正常對(duì)照組。SC組在以上檢測(cè)時(shí)間點(diǎn)Ki67陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)變化的差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。說(shuō)明長(zhǎng)時(shí)程驚厥后急性期幼年鼠海馬神經(jīng)發(fā)生顯著增加，而慢性期神經(jīng)發(fā)生減少。圖1-2SC后不同時(shí)期大鼠海馬DG區(qū)Ki67表達(dá)的動(dòng)態(tài)變化（Ki67：綠色，DAPI：藍(lán)色，100×，標(biāo)尺100μm，n=5）Figure1-2DynamicchangesofKi67+cellnumberlocatedwithinDGregionofratsfollowingSC（Ki67:green,DAPI:blue.Scalebars:100μm.n=5foreachtimepoint）表1-1SC后不同時(shí)期大鼠海馬DG區(qū)內(nèi)Ki67陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)變化（x±SD，n=5）Table1-1ChangeofKi67positivecellsinhippocampusDGregionofatdifferenttimeafterSC(x±SD，n=5)SC組對(duì)照組t值P值1d3d60d18.34±3.42***31.57±8.89***△3.05±1.13*7.22±2.165.03±1.865.98±1.746.1476.5343.1580.00030.00020.0134

重慶醫(yī)科大學(xué)博士研究生學(xué)位論文49圖1-4SC后28天不同組大鼠海馬不同分區(qū)NSCs分化為神經(jīng)元（BrdU綠色；NeuN紅色；DAPI藍(lán)色；黃箭頭：BrdU/NeuN雙標(biāo)；白箭頭：BrdU單標(biāo)；200×，標(biāo)尺:100μm)Figure1-4DifferentiationofNSCsintoneuronsinthehippocampus28daysafterSC(BrdUgreen;Neunred;DAPIblue;Yellowarrow:BrdU/Neundoublelabel;whitearrow:BrdUsinglelabel;200×,scale:100μm)圖1-5SC后28天不同組大鼠海馬不同分區(qū)NSCs分化為膠質(zhì)細(xì)胞（BrdU綠色；GFAP紅色；DAPI藍(lán)色；黃箭頭：BrdU/GFAP雙標(biāo)；白箭頭：BrdU單標(biāo)；200×；標(biāo)尺:100μm)Figure1-5NSCsdifferentiatedintoglialcellsindifferenthippocampaldivisions28daysafter


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