有氧訓(xùn)練與補(bǔ)充亮氨酸對增齡小鼠骨骼肌蛋白質(zhì)合成的影響研究
發(fā)布時間:2017-06-27 15:21
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【摘要】:研究目的:探討兩方面問題,第一,有氧訓(xùn)練能否促進(jìn)骨骼肌蛋白質(zhì)合成從而對抗衰老所致的肌肉萎縮;第二,訓(xùn)練的同時進(jìn)行亮氨酸補(bǔ)充能否進(jìn)一步優(yōu)化其干預(yù)效果。 研究方法:十三月齡小鼠分為安靜對照(AlaC)、運動(AlaE)、亮氨酸(LeuC)和亮氨酸運動(LeuE)組。LeuC與LeuE組進(jìn)食添加5%Leu的飼料,AlaC與AlaE組添加3.4%不影響骨骼肌蛋白質(zhì)代謝的Ala配成等氮飼料。AlaE組與LeuE組每日進(jìn)行45分鐘游泳訓(xùn)練,每周5天,共計8周,負(fù)重為自身體重的2.8-3%。末次訓(xùn)練后24小時處死所有小鼠,禁食17小時。血糖儀測血糖,ELISA法測胰島素,氨基酸分析儀測血漿氨基酸譜,HE染色觀察骨骼肌形態(tài),RT-PCR測腓腸肌LAT1、CD98、PAT1、SNAT2與GCN2基因表達(dá),免疫印跡法測PI3K Ⅲ和MHC Ⅱ的蛋白表達(dá)與mTOR、p70S6K、4E-BP1和AMPK的磷酸化率。 研究結(jié)果:與安靜對照組小鼠相比,有氧訓(xùn)練使小鼠體重、血糖(p0.05)與AMPK磷酸化率(p0.01)下降;血漿游離氨基酸含量、腓腸肌濕重、濕重/體重比、腓腸肌纖維橫截面積與直徑呈上升趨勢;LAT1(p0.01)、CD98(p0.01)與PAT1(p0.05)的基因表達(dá),PI3K Ⅲ (p0.05)與MHC Ⅱ (p0.01)蛋白表達(dá)以及mTOR (p0.01)、p70S6K (p0.01)、4E-BP1(p0.01)磷酸化率均升高;而胰島素水平、SNAT2與GCN2基因表達(dá)無變化;單純補(bǔ)充亮氨酸產(chǎn)生了類似的作用,但其血糖與PAT1基因表達(dá)表現(xiàn)為升高趨勢,AMPK磷酸化率則僅表現(xiàn)出下降趨勢。有氧訓(xùn)練聯(lián)合亮氨酸進(jìn)行干預(yù)表現(xiàn)出了協(xié)同促進(jìn)的效應(yīng),氨基酸、基因、蛋白與磷酸化變化趨勢與有氧訓(xùn)練一致,但腓腸肌濕重(p0.05)、肌纖維橫截面積(p0.01)與直徑(p0.01)均表現(xiàn)出了顯著的增高。 研究結(jié)論:有氧訓(xùn)練與亮氨酸均可促進(jìn)骨骼肌蛋白質(zhì)合成,且聯(lián)合進(jìn)行干預(yù)效果更佳。但亮氨酸主要通過pI3k Ⅲ來活化mTOR通路,對AMPK的抑制并不顯著;有氧訓(xùn)練作用更為廣泛,同時活化PI3K Ⅲ并抑制AMPK的活性。L與imino氨基酸轉(zhuǎn)運系統(tǒng)參與了對mTOR通路的調(diào)節(jié),但具體機(jī)制仍不清楚,推測與其雙重功能有關(guān)。
【關(guān)鍵詞】:運動 Sarcopenia 蛋質(zhì)合成
【學(xué)位授予單位】:北京體育大學(xué)
【學(xué)位級別】:博士
【學(xué)位授予年份】:2013
【分類號】:G804.2
【目錄】:
- 摘要5-6
- ABSTRACT6-12
- ~.略詞12-14
- 1 前言14-18
- 1.1 選題依據(jù)14-15
- 1.2 研究內(nèi)容15-16
- 1.3 研究假設(shè)16-17
- 1.4 技術(shù)路線17-18
- 2 文獻(xiàn)綜述18-41
- 2.1 Sarcopenia簡介18-19
- 2.2 Sarcopenia的可能性機(jī)制19-21
- 2.3 Sarcopenia的干預(yù)——對骨骼肌蛋白質(zhì)平衡的調(diào)節(jié)21-27
- 2.3.1 激素替代療法21-22
- 2.3.2 運動療法22-25
- 2.3.3 營養(yǎng)補(bǔ)劑25-27
- 2.4 亮氨酸與蛋白質(zhì)合成27-38
- 2.4.1 亮氨酸簡介27
- 2.4.2 亮氨酸與蛋白質(zhì)合成代謝27-31
- 2.4.3 亮氨酸促進(jìn)蛋白質(zhì)合成的關(guān)鍵蛋白與可能性機(jī)制31-38
- 2.5 氨基酸轉(zhuǎn)運系統(tǒng)與蛋白質(zhì)合成38-41
- 3 材料與方法41-58
- 3.1 實驗動物分組與干預(yù)41-42
- 3.2 動物處死與取材42
- 3.3 飼料配制42-47
- 3.3.1 飼料氨基酸含量的檢測44-45
- 3.3.2 飼料粗蛋白的測定45
- 3.3.3 飼料鈣含量的測定45-46
- 3.3.4 飼料磷含量的測定46-47
- 3.4 血糖測試47
- 3.4.1 主要儀器與試劑47
- 3.4.2 測試方法47
- 3.5 血乳酸測試47-48
- 3.5.1 主要試劑與儀器47-48
- 3.5.2 測試方法48
- 3.6 血清胰島素檢測48-49
- 3.6.1 主要試劑48
- 3.6.2 主要儀器48
- 3.6.3 測試方法48-49
- 3.7 血漿游離氨基酸測試49-50
- 3.7.1 主要試劑49
- 3.7.2 主要儀器49
- 3.7.3 測試方法49-50
- 3.8 肌肉石蠟切片H&E染色測量肌纖維橫截面積與直徑50-51
- 3.8.1 主要試劑50
- 3.8.2 主要儀器50
- 3.8.3 測試方法50-51
- 3.9 Western Blotting測定通路蛋白表達(dá)51-54
- 3.9.1 主要試劑51-52
- 3.9.2 主要儀器52
- 3.9.3 測試方法52-54
- 3.10 qPCR測定氨基酸轉(zhuǎn)運載體基因表達(dá)54-57
- 3.10.1 主要試劑54
- 3.10.2 主要儀器54-55
- 3.10.3 測試方法55-57
- 3.11 數(shù)據(jù)統(tǒng)計方法57-58
- 4 實驗結(jié)果58-107
- 4.1 體重58-60
- 4.2 采食量60-63
- 4.3 空腹血糖水平的比較63-65
- 4.4 血清胰島素的比較65-66
- 4.5 血漿氨基酸水平的比較66-76
- 4.6 腓腸肌濕重、濕重/體重比值的比較76-78
- 4.7 腓腸肌纖維橫截面積、直徑的比較78-81
- 4.8 腓腸肌總蛋白含量的比較81-82
- 4.9 氨基酸轉(zhuǎn)運體與調(diào)控因子mRNA表達(dá)的比較82-86
- 4.10 MHC蛋白表達(dá)量的比較86-87
- 4.11 mTOR蛋白磷酸化率的比較87-92
- 4.12 p70S6K蛋白磷酸化率的比較92-97
- 4.13 4E-BP1蛋白磷酸化率的比較97-101
- 4.14 PI3K Ⅲ蛋白表達(dá)量的比較101-102
- 4.15 AMPK蛋白磷酸化率的比較102-107
- 5 分析與討論107-133
- 5.1 亮氨酸與丙氨酸的補(bǔ)充107-108
- 5.2 運動方式108-109
- 5.3 有氧運動與亮氨酸對體重和采食量的影響109-112
- 5.4 有氧運動與亮氨酸對空腹血糖與胰島素的影響112-115
- 5.5 有氧運動與亮氨酸對血漿游離氨基酸的影響115-117
- 5.6 有氧運動與亮氨酸對腓腸肌濕重、濕重/體重比值的影響117-119
- 5.7 有氧運動與亮氨酸對肌纖維橫截面積與直徑的影響119-121
- 5.8 有氧運動與亮氨酸對腓腸肌總蛋白與MHC的影響121-124
- 5.9 有氧運動與亮氨酸對其跨膜轉(zhuǎn)運蛋白——氨基酸轉(zhuǎn)運系統(tǒng)的影響124-127
- 5.10 有氧運動與亮氨酸對mTOR及其上、下游蛋白表達(dá)的調(diào)節(jié)127-133
- 6 結(jié)論133-134
- 7 創(chuàng)新點與不足之處134-135
- 7.1 創(chuàng)新點134
- 7.2 不足之處134-135
- 致謝135-137
- 參考文獻(xiàn)137-150
- 附錄150-151
- 個人簡歷 在讀期間發(fā)表的學(xué)術(shù)論文與研究成果151
【參考文獻(xiàn)】
中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前3條
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本文關(guān)鍵詞:有氧訓(xùn)練與補(bǔ)充亮氨酸對增齡小鼠骨骼肌蛋白質(zhì)合成的影響研究,由筆耕文化傳播整理發(fā)布。
本文編號:490302
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