本文關(guān)鍵詞：烤煙調(diào)制變黃期新植二烯代謝初探

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【摘要】：烘烤調(diào)制期是影響煙葉揮發(fā)性香氣物質(zhì)形成的重要階段。許多研究指出在烤煙揮發(fā)性香氣物質(zhì)中,萜類物質(zhì)新植二烯占總量的60-80%,是含量最高的一種;調(diào)制變黃期是新植二烯積累的主要時(shí)期。雖然早已有關(guān)于煙葉中新植二烯來源的推測(cè),但至今未見相關(guān)實(shí)驗(yàn)研究的具體報(bào)道。為研究煙葉中新植二烯的來源,本研究以烤煙品種云煙87為供試材料,在煙葉調(diào)制變黃階段進(jìn)行動(dòng)態(tài)取樣,定量分析了煙葉的還原糖、葉綠素和新植二烯的含量,并測(cè)定了煙草萜類代謝途徑中重要基因的表達(dá)狀況。主要研究結(jié)果如下：1.在變黃期,烤煙葉片還原糖含量波動(dòng)大,總體呈現(xiàn)先上升后下降的規(guī)律；在烘烤第40h和64h出現(xiàn)兩個(gè)高峰,在烘烤第48h-56h之間出現(xiàn)波谷：含量最高點(diǎn)出現(xiàn)在烘烤第64h,為干葉重的14.3%。葉綠素在變黃期不同階段分解速度不同,體現(xiàn)出前期分解快、中期分解慢、中后期分解快、后期分解慢的規(guī)律；到變黃期結(jié)束時(shí)其含量已從烘烤前的1.6mg/g降低至0.1mg/g。新植二烯含量總體呈現(xiàn)波動(dòng)上升趨勢(shì),在烘烤第32h、56h出現(xiàn)兩個(gè)波峰,在烘烤40h、72h出現(xiàn)兩個(gè)波谷；到80h其含量由0.03mg/g增加到0.359mg/g。2.對(duì)烘烤變黃期基因表達(dá)強(qiáng)度的研究應(yīng)該在烘烤開始后48h以內(nèi)進(jìn)行。對(duì)DXR和GGPPS基因在25℃和38℃下的轉(zhuǎn)錄表達(dá)進(jìn)行分析比較發(fā)現(xiàn),在1h以內(nèi)38℃處理組表達(dá)量高于25℃組,4h以后38℃處理組表達(dá)量低于25℃組,說明高溫脅迫在1h以內(nèi)有利于兩基因表達(dá),4h后會(huì)對(duì)兩基因表達(dá)產(chǎn)生抑制；38℃條件下DXR基因表達(dá)量在12h時(shí)最高,GGPPS基因表達(dá)量在4h最高,說明高溫對(duì)兩基因表達(dá)的影響不同；25℃條件下兩基因表達(dá)量都在4h最高,但DXR基因表達(dá)量在4h之后降幅低于GGPPS基因,說明在常溫離體環(huán)境下兩基因表達(dá)的變化不同。對(duì)烘烤變黃期烤煙葉中DXS、DXR、IspH、IPI、GGPPS、HMGR、MK和MDC這八個(gè)萜類物質(zhì)代謝酶對(duì)應(yīng)基因表達(dá)量進(jìn)行動(dòng)態(tài)測(cè)定,發(fā)現(xiàn)調(diào)制之前烤煙葉片中的MVA途徑和MEP途徑表達(dá)量差異很大,前者約是后者的10倍；調(diào)制過程中MVA途徑相關(guān)基因表達(dá)量變化更為明顯,MEP途徑限速酶相關(guān)基因表達(dá)量相對(duì)穩(wěn)定。3.通過對(duì)比不同時(shí)間點(diǎn)葉綠素與新植二烯的含量,發(fā)現(xiàn)兩者的變化規(guī)律不吻合；定量計(jì)算結(jié)果表明,葉綠素降解不能完全解釋新植二烯的產(chǎn)生原因。新植二烯的含量變化規(guī)律與還原糖的含量變化規(guī)律有關(guān),說明變黃期煙葉中的新植二烯可能有部分來源于萜類代謝MVA途徑或MEP途徑；灰色關(guān)聯(lián)度分析結(jié)果表明,MEP途徑相關(guān)基因表達(dá)狀況與新植二烯含量關(guān)系更為密切。
【關(guān)鍵詞】：還原糖 葉綠素 MVA途徑 MEP途徑 新植二烯
【學(xué)位授予單位】：四川農(nóng)業(yè)大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號(hào)】：TS44
【目錄】：

• 摘要4-6
• Abstract6-10
• 1 文獻(xiàn)綜述10-21
• 1.1 烤煙質(zhì)量10-11
• 1.1.1 烤煙煙葉質(zhì)量10
• 1.1.2 煙葉化學(xué)成分10-11
• 1.2 烤煙揮發(fā)性香氣物質(zhì)11-12
• 1.2.1 揮發(fā)性香氣物質(zhì)種類與作用11
• 1.2.2 影響揮發(fā)性香氣物質(zhì)含量的因素11-12
• 1.3 萜類物質(zhì)與烤煙品質(zhì)的關(guān)系12
• 1.4 萜烯類物質(zhì)代謝研究進(jìn)展12-18
• 1.4.1 MVA途徑研究概述12-14
• 1.4.2 MEP途徑研究概述14-16
• 1.4.3 兩條途徑之間關(guān)系的探討16-18
• 1.5 植醇與新植二烯18-20
• 1.5.1 植醇研究進(jìn)展18-19
• 1.5.2 煙葉中的新植二烯研究進(jìn)展19-20
• 1.6 逆境與煙葉次生代謝產(chǎn)物積累20
• 1.7 萜類物質(zhì)研究方法進(jìn)展20-21
• 1.7.1 萜類物質(zhì)提取與測(cè)定20-21
• 1.7.2 相關(guān)基因表達(dá)研究21
• 2 研究目的與意義21-23
• 2.1 研究?jī)?nèi)容和目的21-22
• 2.2 研究意義22-23
• 3 材料與方法23-27
• 3.1 儀器與試劑23
• 3.1.1 試劑23
• 3.1.2 儀器23
• 3.2 取樣方法23-24
• 3.2.1 高溫逆境實(shí)驗(yàn)取樣方案23-24
• 3.2.2 調(diào)制過程中的取樣方案24
• 3.3 提取與測(cè)定方法24-27
• 3.3.1 物質(zhì)提取方法24-25
• 3.3.2 葉綠素與還原糖測(cè)定方法25
• 3.3.3 新植二烯含量測(cè)定方法25
• 3.3.4 基因表達(dá)強(qiáng)度測(cè)定方法25-27
• 4 結(jié)果分析27-51
• 4.1 方法優(yōu)化實(shí)驗(yàn)結(jié)果分析27-37
• 4.1.1 低濃度葉綠素測(cè)定方法的適用性檢驗(yàn)27
• 4.1.2 新植二烯含量測(cè)定方法的優(yōu)化27-28
• 4.1.3 取樣時(shí)間的優(yōu)化實(shí)驗(yàn)28-30
• 4.1.4 引物設(shè)計(jì)與測(cè)試30-32
• 4.1.5 高溫逆境實(shí)驗(yàn)32-37
• 4.2 變黃階段煙葉樣品分析37-51
• 4.2.1 煙葉動(dòng)態(tài)含水率測(cè)定37-38
• 4.2.2 葉綠素含量測(cè)定38-39
• 4.2.3 還原糖含量測(cè)定39-41
• 4.2.4 新植二烯測(cè)定41-43
• 4.2.5 萜烯代謝路徑關(guān)鍵酶的基因表達(dá)測(cè)定43-51
• 5 結(jié)論與討論51-57
• 5.1 實(shí)驗(yàn)方法優(yōu)化的結(jié)論51
• 5.2 變黃期的還原糖與葉綠素含量變化51
• 5.3 RNA在變黃期的降解程度51-52
• 5.4 溫度與萜類相關(guān)基因表達(dá)量之間的關(guān)系52
• 5.5 新植二烯含量的變化52
• 5.6 關(guān)于新植二烯來源的討論52-55
• 5.6.1 新植二烯來源于葉綠素降解的可能性分析53-54
• 5.6.2 新植二烯來源于變黃期合成的可能性分析54
• 5.6.3 新植二烯與MEP途徑的關(guān)系54-55
• 5.7 下一步研究建議55-57
• 參考文獻(xiàn)57-63
• 致謝63

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3 ;[J];;年期

中國碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前1條

1 閆雙全;烤煙調(diào)制變黃期新植二烯代謝初探[D];四川農(nóng)業(yè)大學(xué);2015年

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本文編號(hào)：1009001