miR-204通過Wnt信號通路對骨質(zhì)疏松癥小鼠成骨細(xì)胞增殖的影響及機(jī)制分析
發(fā)布時(shí)間:2022-12-09 02:00
目的 探討miR-204通過Wnt信號通路對骨質(zhì)疏松癥小鼠成骨細(xì)胞增殖的影響及機(jī)制分析。方法 雌性昆明小鼠分為:對照組、假手術(shù)組和骨質(zhì)疏松癥組,采用雙側(cè)卵巢切除法建立去卵巢骨質(zhì)疏松小鼠模型并進(jìn)行鑒定;提取小鼠原代成骨細(xì)胞并鑒定;細(xì)胞轉(zhuǎn)染并檢測miR-204的表達(dá)水平;MTT檢測各組細(xì)胞活力;各組細(xì)胞堿性磷酸酶(ALP)活性的檢測;Transwell檢測各組細(xì)胞的侵襲能力;細(xì)胞流式術(shù)檢測各組細(xì)胞凋亡情況;細(xì)胞流式術(shù)檢測各組細(xì)胞Caspase-3活性;雙熒光素酶報(bào)告基因檢測miR-204和β-catenin、LRP-5間的相互作用;Western blot檢測Wnt信號通路相關(guān)蛋白表達(dá)情況。結(jié)果 骨質(zhì)疏松癥組小鼠骨密度較對照組和假手術(shù)組明顯降低(P=0.007,P=0.057),表明骨質(zhì)疏松癥小鼠造模成功。miR-204的表達(dá)水平在miR-204模擬物組明顯提高(P=0.072),在miR-204抑制劑組下降(P=0.031);miR-204模擬物組成骨細(xì)胞活力和ALP活性提高(P=0.007,P=0.043),miR-204抑制劑組成骨細(xì)胞活力和ALP活性下降(P=0.007,P=0.0...
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