AGR2通過(guò)誘導(dǎo)線粒體自噬發(fā)生改善腸黏膜屏障功能
發(fā)布時(shí)間:2022-01-13 18:26
目的 旨在探討人前梯度蛋白2(anterior gradient-2,AGR2)在腫瘤壞死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)誘導(dǎo)的腸黏膜屏障損傷中的作用及其機(jī)制。方法 通過(guò)體外培養(yǎng)人結(jié)腸腺癌細(xì)胞株Caco-2細(xì)胞建立腸黏膜屏障模型,預(yù)先轉(zhuǎn)染AGR2質(zhì)粒和對(duì)照質(zhì)粒,24 h后實(shí)驗(yàn)組加入TNF-α刺激細(xì)胞,通過(guò)實(shí)時(shí)定量PCR及Western blot檢測(cè)AGR2表達(dá),通過(guò)跨膜電阻檢測(cè)細(xì)胞膜通透性,透射電鏡下觀察線粒體自噬的發(fā)生。結(jié)果 Caco-2細(xì)胞培養(yǎng)21 d,跨膜電阻值(transepithelial electrical resistance,TEER)大于600 Ω·cm2,趨于穩(wěn)定,證實(shí)體外腸黏膜屏障模型成功構(gòu)建。在TNF-α誘導(dǎo)的腸上皮屏障損傷模型中,AGR2 mRNA及蛋白表達(dá)明顯下調(diào),TEER下降至200 Ω·cm2左右,透射電鏡下顯示線粒體形態(tài)破壞。而預(yù)先轉(zhuǎn)染AGR2質(zhì)?梢种芓NF-α引起的跨膜電阻值下降,TEER維持在400 Ω·cm2左右,透射電鏡下可見(jiàn)線粒體自噬小體產(chǎn)生。結(jié)論 體外實(shí)驗(yàn)證實(shí)AGR2基因可抑制TNF-α誘導(dǎo)的腸黏膜...
【文章來(lái)源】:國(guó)際兒科學(xué)雜志. 2020,47(03)
【文章頁(yè)數(shù)】: 頁(yè)
本文編號(hào):3586929
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