目的 探討體內(nèi)噬菌體展示技術(shù)篩選的人髓樣乳腺癌Bcap-37細(xì)胞特異性結(jié)合肽的性質(zhì)和結(jié)合效果,為乳腺癌早期診斷提供分子靶向探針。方法 制備人髓樣乳腺癌Bcap-37細(xì)胞荷瘤裸鼠模型,采用噬菌體環(huán)七肽庫(kù)進(jìn)行3輪體內(nèi)篩選。免疫組織化學(xué)法檢測(cè)篩選的噬菌體在腫瘤及正常組織中的分布情況。酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA）鑒定單克隆噬菌體對(duì)Bcap-37細(xì)胞的親合力。提取陽(yáng)性單克隆噬菌體DNA并測(cè)序,選取重復(fù)率高的序列合成多肽,制備光學(xué)分子探針,應(yīng)用熒光分子成像驗(yàn)證合成的多肽在荷瘤小鼠體內(nèi)對(duì)乳腺移植瘤的特異性和靶向性。結(jié)果 第3輪體內(nèi)篩選的噬菌體回收率為第1輪的107.2倍。免疫組織化學(xué)結(jié)果顯示,隨篩選輪次增加,腫瘤組織中結(jié)合的噬菌體依次增加；腫瘤組織結(jié)合的噬菌體多于正常組織（肺臟、骨骼肌、肝臟、腎臟）,腫瘤組織切片掃描圖像的吸光度（A）值均較正常組織高,差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（均P<0.05）。ELISA結(jié)果顯示,隨機(jī)選取的50個(gè)單克隆噬菌體中,22個(gè)為陽(yáng)性（親合力≥2）。陽(yáng)性單克隆噬菌體DNA測(cè)序分析后,得到4條有重復(fù)的氨基酸序列,選擇重復(fù)率最高的氨基酸序列CSPLNTRFC,化學(xué)合成異硫氰酸熒... 

【文章來(lái)源】：腫瘤研究與臨床. 2020,(02)

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