目的:構(gòu)建腫瘤壞死因子受體相關(guān)因子6(TRAF6)截短體質(zhì)粒pCMV-Myc-TRAF6 N和pCMV-Myc-TRAF6 C。方法:采用反向PCR法。結(jié)果:經(jīng)雙酶切鑒定,分別得到約900和750 bp的TRAF6截短體質(zhì)粒pCMVMyc-TRAF6 N和pCMV-Myc-TRAF6 C,符合預(yù)期;轉(zhuǎn)染293FT細胞后,Western印跡檢測到TRAF6 N和TRAF6 C的表達。結(jié)論:構(gòu)建了TRAF6蛋白截短體質(zhì)粒,有助于進一步驗證TRAF6的生物學功能。

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【文章目錄】：
1 材料和方法
    1.1 材料
    1.2 PCR引物的設(shè)計與合成
    1.3 截短體質(zhì)粒的構(gòu)建
    1.4 轉(zhuǎn)化及提取
    1.5 病毒包裝和轉(zhuǎn)染
    1.6 免疫印跡法檢測目的基因的表達
2 結(jié)果
    2.1 TRAF6截短體基因克隆的轉(zhuǎn)化
    2.2 p CMV-Myc-TRAF6 N和p CMV-Myc-TRAF6C質(zhì)粒的鑒定
    2.3 轉(zhuǎn)染后TRAF6 N和TRAF6 C蛋白的表達
3 討論



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